背景:肝纖維化(liver fibrosis)是多種慢性肝損害所致的可逆性病理改變,是肝硬化發(fā)展的必經(jīng)階段。其主要表現(xiàn)為肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cell,HSC)激活所致的肝細(xì)胞外間質(zhì)成分過度異常沉積,影響肝臟的功能。目前肝纖維化在診治方面雖然有一些進(jìn)展,但仍缺乏確定有效的藥物,且相關(guān)分子機(jī)制尚不完全明確。有研究表明Enhancer of Zeste Homolog 2(EZH2)在促進(jìn)肌成纖維細(xì)胞(myofibroblast,MFB)分化中發(fā)揮重要作用,但其具體機(jī)制仍不完全清楚。鼠尾草酚(carnosol,CS)是迷迭香中提取的一種脂溶性有效成分,具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤等多種藥理活性,但其對(duì)肝纖維化的治療作用國內(nèi)外未見報(bào)道。目的:探究CS對(duì)肝纖維化的保護(hù)作用,以及Sirtuin 1(SIRT1)/EZH2在抗肝纖維化中的分子機(jī)制。方法:1.CS在大鼠肝纖維化中保護(hù)作用的研究60只雄性Sprague-Dawley大鼠隨機(jī)分為五組:(A)空白對(duì)照組;(B)CS空白給藥組(30mg/kg);(C)CCl4腹腔注射組;(D)CCl4+CS低劑量(15mg/kg)給藥組...

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
    1.藥物及試劑
    2.主要儀器
    3.主要溶液配制
    4.藥物配制
    5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    6.大鼠肝纖維化模型建立
    7.動(dòng)物分組及給藥
    8.肝組織HE染色、Masson染色
    9.生化指標(biāo)檢測(cè)
    10.實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞株
    11.細(xì)胞培養(yǎng)
    12.細(xì)胞分組及給藥
    13.SIRT1-siRNA,EZH2-siRNA,EZH2過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
    14.Westernblot法測(cè)定SIRT1,EZH2,acetyl-EZH2,α-SMA,CollagenⅠ,E-cadherin,Vimentin蛋白表達(dá)水平
    15.免疫沉淀法測(cè)定乙酰化EZH2水平
    16.免疫熒光法觀察E-Cadherin,Vimentin在個(gè)分組中的變化情況
    17.Real-TimePCR法檢測(cè)CollagenⅠ,α-SMA,TIMP1CTGF的mRNA水平
    18.統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果
結(jié)果
    1.CS對(duì)CCl4及TGFβ1誘導(dǎo)的肝纖維化的保護(hù)作用
        1.1 CS對(duì)CCl4誘導(dǎo)的大鼠肝損傷的影響
        1.2 CS對(duì)CCl4誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化的影響
        1.3 CS對(duì)HSC激活的抑制作用
        1.4 CS對(duì)EMT現(xiàn)象的抑制作用
        1.5 CS對(duì)TGFβ1誘導(dǎo)的肝細(xì)胞纖維化的保護(hù)作用
    2.CS對(duì)肝纖維化保護(hù)作用機(jī)制的研究
        2.1 EZH2對(duì)HSC激活的影響
        2.2 EZH2對(duì)EMT現(xiàn)象的影響
        2.3 CS對(duì)CCl4誘導(dǎo)的大鼠肝臟SIRT1表達(dá)的影響
        2.4 CS對(duì)AML-12細(xì)胞中SIRT1表達(dá)的影響
        2.5 SIRT1在CS介導(dǎo)的肝纖維化保護(hù)中的作用
        2.6 CS對(duì)CCl4誘導(dǎo)的大鼠肝臟中EZH2表達(dá)的影響
        2.7 在AML12細(xì)胞中CS對(duì)EZH2的抑制作用與SIRT相關(guān)
        2.8 SIRT1對(duì)AML-12細(xì)胞中EZH2乙�；降挠绊�
        2.9 SIRT1/EZH2信號(hào)通路對(duì)肝纖維化的影響
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 肝纖維化中肝星狀細(xì)胞激活的機(jī)制研究
    參考文獻(xiàn)
附錄
    縮略詞
攻讀學(xué)位期間論文發(fā)表情況
致謝



本文編號(hào)：3762265