發(fā)布時間：2023-03-05 17:44

　　本研究采用細胞培養(yǎng)、臺盼藍染色、DAPI和TUNEL染色、RNA干擾、Western blot分析等細胞分子生物學(xué)技術(shù)和方法,以PC12細胞和小鼠原代神經(jīng)元為實驗對象,研究了白藜蘆醇對鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡的影響,深入探討白藜蘆醇靶向mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抗鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡和S6K1在此過程的重要作用。結(jié)果如下:1白藜蘆醇通過抑制Akt/mTOR通路抗鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡PC12細胞和小鼠原代神經(jīng)元用白藜蘆醇(100 μM)預(yù)處理1 h后暴露于鎘(10和20 μM ) 8 h或24 h。Western blot分析Akt/mTOR通路相關(guān)蛋白表達;臺盼藍和DAPI染色分別分析活細胞數(shù)量和凋亡細胞表現(xiàn)。結(jié)果顯示:鎘以濃度依賴的方式誘導(dǎo)神經(jīng)細胞Akt、mTOR、S6K1、S6、4E-BP1磷酸化增加,這被白藜蘆醇有力地阻滯;與之一致的,白藜蘆醇顯著減低鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細胞活性下降和凋亡。這些結(jié)果表明白藜蘆醇抑制Akt/mTOR通路抗鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡。2白藜蘆醇靶向mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抗鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡以PC12細胞和小鼠原代神經(jīng)元為實驗對象,細胞用雷帕霉素(200ng/ml)預(yù)處理48h后再用白藜蘆醇(1...

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞
摘要
Summary
引言
第一部分 文獻綜述
    第一章 鎘誘導(dǎo)神經(jīng)毒性損傷及其機制研究進展
        1 鎘對神經(jīng)系統(tǒng)的毒性作用
        2 鎘誘導(dǎo)神經(jīng)損傷發(fā)生的機制
            2.1 鎘引起氧化應(yīng)激誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡
            2.2 鎘引起胞內(nèi)DNA損傷誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡
            2.3 鎘結(jié)合金屬硫蛋白誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡
            2.4 鎘影響酶的活性誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡
            2.5 鎘干擾多條細胞信號誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡
            2.6 鎘破壞細胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡
        3 鎘與神經(jīng)退行性疾病的關(guān)系研究進展
            3.1 鎘與阿爾茨海默癥(AD)
            3.2 鎘與帕金森病(PD)
            3.3 鎘與肌萎縮性側(cè)索硬化癥(ALS)
        4 小結(jié)
        參考文獻
    第二章 白藜蘆醇活性作用及其對神經(jīng)的保護效應(yīng)
        1 白藜蘆醇的理化特性
        2 白藜蘆醇的植物來源及含量
        3 白藜蘆醇的活性作用
            3.1 白藜蘆醇的抗癌活性
            3.2 白藜蘆醇的抗炎活性
            3.3 白藜蘆醇的抗氧化活性
        4 白藜蘆醇對神經(jīng)的保護效應(yīng)
        5 白藜蘆醇的神經(jīng)保護機制
            5.1 白藜蘆醇通過調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)發(fā)揮神經(jīng)保護效應(yīng)
            5.2 白藜蘆醇通過調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激發(fā)揮神經(jīng)保護效應(yīng)
            5.3 白藜蘆醇通過抑制酶的活性發(fā)揮神經(jīng)保護效應(yīng)
        6 白藜蘆醇與神經(jīng)退行性疾病的關(guān)系
            6.1 白藜蘆醇與帕金森病(PD)
            6.2 白藜蘆醇與阿爾茨海默癥(AD)
            6.3 白藜蘆醇與肌萎縮性側(cè)索硬化癥(ALS)
        7 小結(jié)
        參考文獻
    第三章 Akt/mTOR通路及其與神經(jīng)細胞凋亡的關(guān)系
        1 mTOR通路
            1.1 mTOR的分子結(jié)構(gòu)
            1.2 mTOR的上游和下游分子
            1.3 Akt/mTOR通路
        2 Akt/mTOR通路與神經(jīng)細胞凋亡的關(guān)系
        3 Akt/mTOR通路與神經(jīng)變性疾病的關(guān)系
            3.1 Akt/mTOR與PD
            3.2 Akt/mTOR與AD
            3.3 Akt/mTOR與ALS
        4 小結(jié)
        參考文獻
第二部分 實驗研究
    第四章 白藜蘆醇抑制Akt/mTOR通路抗鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡研究
        1 材料與方法
            1.1 主要藥品與試劑
            1.2 實驗動物
            1.3 細胞培養(yǎng)及原代大腦皮質(zhì)神經(jīng)元分離和培養(yǎng)
            1.4 臺盼藍染色計數(shù)活細胞數(shù)量
            1.5 DAPI染色分析細胞凋亡
            1.6 蛋白免疫印跡(Western blot)分析
            1.7 實驗數(shù)據(jù)的處理與分析
        2 實驗結(jié)果
            2.1 白藜蘆醇抑制鎘激活A(yù)kt、mTOR及其介導(dǎo)的S6K1和4E-BP1通路
            2.2 白藜蘆醇抑制鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細胞活性下降和凋亡
        3 討論
        參考文獻
    第五章 白藜蘆醇靶向mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抗鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡研究
        1 材料與方法
            1.1 主要藥品與試劑
            1.2 實驗動物
            1.3 細胞培養(yǎng)及原代大腦皮質(zhì)神經(jīng)元分離和培養(yǎng)
            1.4 臺盼藍染色計數(shù)活細胞數(shù)量
            1.5 TUNEL染色分析細胞凋亡
            1.6 蛋白免疫印跡(Western Blot)分析
            1.7 實驗數(shù)據(jù)的處理與分析
        2 實驗結(jié)果
            2.1 白藜蘆醇靶向抑制鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細胞Akt/mTOR信號通路
            2.2 雷帕霉素強化白藜蘆醇抑制鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細胞Caspase-3激活和凋亡
        3 討論
        參考文獻
    第六章 S6K1在白藜蘆醇抗鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡中作用研究
        1 材料與方法
            1.1 主要藥品與試劑
            1.2 細胞培養(yǎng)
            1.3 重組腺病毒的構(gòu)建和細胞感染
            1.4 臺盼藍染色計數(shù)活細胞數(shù)量
            1.5 TUNEL染色分析細胞凋亡
            1.6 蛋白免疫印跡(Western Blot)分析
            1.7 實驗數(shù)據(jù)的處理與分析
        2 實驗結(jié)果
            2.1 持續(xù)激活S6K1對白藜蘆醇抑制鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細胞Akt、S6K1/S6和Caspase-3表達和細胞活性降低影響
            2.2 持續(xù)激活S6K1對白藜蘆醇抑制鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細胞凋亡的影響
        3 討論
        參考文獻
第三部分 全文結(jié)論
附1
致謝



本文編號：3756647