目的:通過麝香含藥血清干預(yù)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs),擬從信號通路入手進(jìn)行研究,探討信號通路與干細(xì)胞遷移學(xué)說及中醫(yī)引經(jīng)理論的相關(guān)性,為研究引經(jīng)藥提供了新思路,為其遷移機(jī)制提供理論依據(jù)。方法:通過給大鼠灌服高、中、低劑量的麝香并制備不同濃度含藥血清,以灌服等體積生理鹽水制備的血清作為空白對照組。采用貼壁篩選法體外培養(yǎng)大鼠BMSCs,培養(yǎng)至第三代,用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面抗原,經(jīng)過成骨成脂誘導(dǎo)鑒定認(rèn)為培養(yǎng)BMSCs成功后,利用制備的不同濃度麝香含藥血清的5%濃度含藥血清干預(yù)第三代BMSCs,利用MTT法檢測BMSCs增殖情況,成骨誘導(dǎo)后進(jìn)行堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)定性、定量檢測,I-型膠原免疫熒光染色,測定鈣化結(jié)節(jié)數(shù)。通過加入不同信號通路阻斷劑利用Transwell小室檢測BMSCs細(xì)胞遷移率變化,比較不同時間段各組間、組內(nèi)差異,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,從而探討不同濃度麝香對大鼠BMSCs增殖、成骨分化等的影響,同時探討不同濃度麝香介導(dǎo)信號通路對BMSCs遷移影響。結(jié)果:采用全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)的大鼠...

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
前言
一、立題依據(jù)
    1、研究背景
    2、研究內(nèi)容
    3、研究意義
二、實(shí)驗(yàn)研究
    技術(shù)路線圖
    1、實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥物
        1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.4 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
        1.5 實(shí)驗(yàn)主要試劑配備
    2、實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)動物分組
        2.2 實(shí)驗(yàn)動物給藥
        2.3 含藥血清制備
        2.4 體外培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
        2.5 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的鑒定
        2.6 含藥血清對BMSCs增殖、分化影響
        2.7 不同濃度麝香對BMSCs遷移影響
        2.8 信號通路阻斷劑對BMSCs遷移影響
        2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 BMSCs形態(tài)學(xué)特點(diǎn)
        3.2 細(xì)胞表型鑒定
        3.3 BMSCs成骨、成脂誘導(dǎo)分化結(jié)果
        3.4 含藥血清對BMSCs增殖影響結(jié)果
        3.5 含藥血清對BMSCs成骨誘導(dǎo)分化結(jié)果
        3.6 不同濃度麝香對BMSCs遷移影響
        3.7 含藥血清在信號通路阻斷劑干預(yù)下對BMSCs遷移影響
三、分析與討論
    1、BMSCs在骨科疾病中的應(yīng)用價值
    2、MAPK/ERK1/2、PKC、PI3K/AKT信號通路與BMSCs的相關(guān)研究
    3、麝香促外源性BMSCs遷移機(jī)制初探
    4、中醫(yī)引經(jīng)理論探討
四、結(jié)語
    1、結(jié)論
    2、存在問題與展望
        2.1 創(chuàng)新點(diǎn)
        2.2 存在問題
        2.3 展望
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
科研課題及學(xué)術(shù)論文
    1、科研課題
    2、參加學(xué)術(shù)會議交流
    3、獲獎情況
    4、論文發(fā)表
附錄
    1、實(shí)驗(yàn)動物證明
    2、實(shí)驗(yàn)圖片



本文編號：3756553