目的:研究白及醇提物對(duì)PM_2.5所致J774a.1細(xì)胞損傷的保護(hù)作用,并探討其作用機(jī)制。方法:采用MTS檢測(cè)不同濃度PM_2.5(0、25、50、100、200、400μg/mL)和不同濃度白及醇提物(0、1.25、2.5、5、10、20μg/mL)對(duì)J774a.1細(xì)胞活力的影響,確定合適的造模濃度和給藥濃度。以PM_2.5誘導(dǎo)J774a.1細(xì)胞損傷,將細(xì)胞分為空白對(duì)照組、模型組及白及醇提物組物低、中、高濃度組,采用DCFH-DA熒光探針檢測(cè)活性氧水平;NO試劑盒檢測(cè)NO的表達(dá)量;實(shí)時(shí)熒光定量PCR法測(cè)定促炎介質(zhì)iNOS、IL-18 mRNA水平;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)炎癥因子TNF-α、IL-6水平;Western blot檢測(cè)TLR4、COX2蛋白表達(dá)及NF-κBp65蛋白磷酸化水平。結(jié)果:PM_2.5濃度為200μg/mL,白及醇提物濃度為5～20μg/mL時(shí),未見(jiàn)明顯細(xì)胞毒性。與模型組比較,各濃度白及醇提物均可顯著降低細(xì)胞上清中NO、IL-6、TNF-α釋放量及細(xì)胞內(nèi)活性氧水平(P<0.01),5、...

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【文章目錄】：
1 材料與儀器
    1.1 細(xì)胞株
    1.2 藥物與試劑
    1.3 主要儀器
2 方法
    2.1 白及醇提物的制備
    2.2 PM2.5的采集與制備
    2.3 細(xì)胞培養(yǎng)及傳代
    2.4 MTS檢測(cè)細(xì)胞增殖
    2.5 細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平檢測(cè)
    2.6 上清中NO含量檢測(cè)
    2.7 iNOS、IL-18 mRNA表達(dá)的檢測(cè)
    2.8 炎性細(xì)胞因子檢測(cè)
    2.9 Western blot檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)
    2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
3 結(jié)果
    3.1 MTS檢測(cè)PM2.5和白及醇提物對(duì)J774a.1細(xì)胞增殖的影響
    3.2 白及醇提物對(duì)PM2.5損傷J774a.1細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平的影響
    3.3 白及醇提物對(duì)PM2.5損傷J774a.1細(xì)胞NO、IL-6、TNF-α釋放量的影響
    3.4 白及醇提物對(duì)PM2.5損傷J774a.1細(xì)胞iNOS、IL-18mRNA表達(dá)的影響
    3.5 白及醇提物對(duì)PM2.5損傷J774a.1細(xì)胞TLR4/NF-κB通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
4 討論



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