目的:研究白及醇提物對PM_2.5所致J774a.1細胞損傷的保護作用,并探討其作用機制。方法:采用MTS檢測不同濃度PM_2.5(0、25、50、100、200、400μg/mL)和不同濃度白及醇提物(0、1.25、2.5、5、10、20μg/mL)對J774a.1細胞活力的影響,確定合適的造模濃度和給藥濃度。以PM_2.5誘導(dǎo)J774a.1細胞損傷,將細胞分為空白對照組、模型組及白及醇提物組物低、中、高濃度組,采用DCFH-DA熒光探針檢測活性氧水平;NO試劑盒檢測NO的表達量;實時熒光定量PCR法測定促炎介質(zhì)iNOS、IL-18 mRNA水平;流式細胞術(shù)檢測炎癥因子TNF-α、IL-6水平;Western blot檢測TLR4、COX2蛋白表達及NF-κBp65蛋白磷酸化水平。結(jié)果:PM_2.5濃度為200μg/mL,白及醇提物濃度為5～20μg/mL時,未見明顯細胞毒性。與模型組比較,各濃度白及醇提物均可顯著降低細胞上清中NO、IL-6、TNF-α釋放量及細胞內(nèi)活性氧水平(P<0.01),5、...

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【文章目錄】：
1 材料與儀器
    1.1 細胞株
    1.2 藥物與試劑
    1.3 主要儀器
2 方法
    2.1 白及醇提物的制備
    2.2 PM2.5的采集與制備
    2.3 細胞培養(yǎng)及傳代
    2.4 MTS檢測細胞增殖
    2.5 細胞內(nèi)活性氧(ROS)水平檢測
    2.6 上清中NO含量檢測
    2.7 iNOS、IL-18 mRNA表達的檢測
    2.8 炎性細胞因子檢測
    2.9 Western blot檢測相關(guān)蛋白表達
    2.10 統(tǒng)計學(xué)處理
3 結(jié)果
    3.1 MTS檢測PM2.5和白及醇提物對J774a.1細胞增殖的影響
    3.2 白及醇提物對PM2.5損傷J774a.1細胞內(nèi)活性氧(ROS)水平的影響
    3.3 白及醇提物對PM2.5損傷J774a.1細胞NO、IL-6、TNF-α釋放量的影響
    3.4 白及醇提物對PM2.5損傷J774a.1細胞iNOS、IL-18mRNA表達的影響
    3.5 白及醇提物對PM2.5損傷J774a.1細胞TLR4/NF-κB通路相關(guān)蛋白表達的影響
4 討論



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