目的:檢測(cè)三黃煎劑的主要成分,構(gòu)建合理的質(zhì)控體系;建立他莫昔芬耐藥的乳腺癌細(xì)胞系;檢測(cè)三黃煎劑對(duì)他莫昔芬耐藥細(xì)胞系生物行為學(xué)的影響;探尋三黃煎劑的可能的作用靶點(diǎn)。方法:1.使用高壓液相方法檢測(cè)三黃煎劑的三種單體的成分,在波長260nm處檢測(cè)毛蕊異黃酮葡萄糖苷,在波長430nm處檢測(cè)姜黃素,在波長254nm處檢測(cè)大黃素。2.使用CCK-8的實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制實(shí)驗(yàn),檢測(cè)不同濃度的4-OH他莫昔芬對(duì)乳腺癌MCF-7的抑制能力以及其對(duì)MCF-7他莫昔芬耐藥細(xì)胞的抑制能力,二者IC50之比即為耐藥指數(shù),同時(shí)也使用該方法檢測(cè)三黃煎劑對(duì)他莫昔芬耐藥細(xì)胞的抑制作用。3.使用Hoechst 33258染色的方法觀測(cè)凋亡情況,直觀的顯示在不同4-OH他莫昔芬的濃度之下,MCF-7和MCF-7他莫昔芬耐藥細(xì)胞凋亡的情況。4.使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)的方式檢測(cè)不同藥物的不同濃度對(duì)不同細(xì)胞的細(xì)胞周期的影響。5.使用transwell實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)在不同藥物干預(yù)情況下,對(duì)他莫昔芬耐藥細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響。6.使用管腔形成的實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)不同藥物對(duì)他莫昔芬耐藥細(xì)胞的血管新生能力的影響。7.使用雞胚實(shí)驗(yàn),在體內(nèi)檢測(cè)三黃...

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一章 理論研究
    中醫(yī)部分
        中醫(yī)學(xué)對(duì)腫瘤的認(rèn)識(shí)(歷史沿革)
        中醫(yī)學(xué)對(duì)乳腺癌的認(rèn)識(shí)(歷史沿革)
        乳腺癌內(nèi)分泌治療的中醫(yī)藥診治進(jìn)展
        中醫(yī)對(duì)乳腺癌他莫昔芬治療耐藥的認(rèn)識(shí)
        三黃煎劑前期研究成果
    現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論研究
        第一部分 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)乳腺癌他莫昔芬耐藥的認(rèn)識(shí)及研究進(jìn)展
        第二部分 細(xì)胞周期蛋白調(diào)控在乳腺癌他莫昔芬耐藥治療中運(yùn)用與機(jī)制
        第三部分 乳腺癌他莫昔芬耐藥與血管新生
        第四部分 乳腺癌他莫昔芬耐藥與遷移和侵襲
        第五部分 乳腺癌他莫昔芬耐藥與PI3K信號(hào)通路
第二章 實(shí)驗(yàn)研究
    第一部分 三黃煎劑的制備及主要成分測(cè)定
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.總結(jié)
    第二部分 他莫昔芬耐藥乳腺癌細(xì)胞株的培養(yǎng)與鑒定
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.總結(jié)
    第三部分 乳腺癌MCF-7他莫昔芬耐藥機(jī)制探討
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.總結(jié)
    第四部分 三黃煎劑對(duì)他莫昔芬耐藥乳腺癌細(xì)胞株細(xì)胞周期的影響
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.總結(jié)
    第五部分 三黃煎劑對(duì)乳腺癌他莫昔芬耐藥細(xì)胞遷移、侵襲和血管新生的影響
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 實(shí)驗(yàn)方法
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4 總結(jié)
    第六部分 三黃煎劑抑制乳腺癌他莫昔芬耐藥PI3K信號(hào)通路及相關(guān)蛋白表達(dá)
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.總結(jié)
    第七部分 三黃煎劑抑制乳腺癌他莫昔芬耐藥的作用與抑制PI3K信號(hào)通路密切相關(guān)
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.小結(jié)
    第八部分 雞胚實(shí)驗(yàn)
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.小結(jié)
第三章 討論
局限和展望
參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3749951