目的:檢測三黃煎劑的主要成分,構(gòu)建合理的質(zhì)控體系;建立他莫昔芬耐藥的乳腺癌細(xì)胞系;檢測三黃煎劑對他莫昔芬耐藥細(xì)胞系生物行為學(xué)的影響;探尋三黃煎劑的可能的作用靶點(diǎn)。方法:1.使用高壓液相方法檢測三黃煎劑的三種單體的成分,在波長260nm處檢測毛蕊異黃酮葡萄糖苷,在波長430nm處檢測姜黃素,在波長254nm處檢測大黃素。2.使用CCK-8的實(shí)驗(yàn)方法檢測細(xì)胞增殖抑制實(shí)驗(yàn),檢測不同濃度的4-OH他莫昔芬對乳腺癌MCF-7的抑制能力以及其對MCF-7他莫昔芬耐藥細(xì)胞的抑制能力,二者IC50之比即為耐藥指數(shù),同時(shí)也使用該方法檢測三黃煎劑對他莫昔芬耐藥細(xì)胞的抑制作用。3.使用Hoechst 33258染色的方法觀測凋亡情況,直觀的顯示在不同4-OH他莫昔芬的濃度之下,MCF-7和MCF-7他莫昔芬耐藥細(xì)胞凋亡的情況。4.使用流式細(xì)胞儀檢測的方式檢測不同藥物的不同濃度對不同細(xì)胞的細(xì)胞周期的影響。5.使用transwell實(shí)驗(yàn)法檢測在不同藥物干預(yù)情況下,對他莫昔芬耐藥細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響。6.使用管腔形成的實(shí)驗(yàn)方法檢測不同藥物對他莫昔芬耐藥細(xì)胞的血管新生能力的影響。7.使用雞胚實(shí)驗(yàn),在體內(nèi)檢測三黃...

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一章 理論研究
    中醫(yī)部分
        中醫(yī)學(xué)對腫瘤的認(rèn)識(歷史沿革)
        中醫(yī)學(xué)對乳腺癌的認(rèn)識(歷史沿革)
        乳腺癌內(nèi)分泌治療的中醫(yī)藥診治進(jìn)展
        中醫(yī)對乳腺癌他莫昔芬治療耐藥的認(rèn)識
        三黃煎劑前期研究成果
    現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論研究
        第一部分 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對乳腺癌他莫昔芬耐藥的認(rèn)識及研究進(jìn)展
        第二部分 細(xì)胞周期蛋白調(diào)控在乳腺癌他莫昔芬耐藥治療中運(yùn)用與機(jī)制
        第三部分 乳腺癌他莫昔芬耐藥與血管新生
        第四部分 乳腺癌他莫昔芬耐藥與遷移和侵襲
        第五部分 乳腺癌他莫昔芬耐藥與PI3K信號通路
第二章 實(shí)驗(yàn)研究
    第一部分 三黃煎劑的制備及主要成分測定
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.總結(jié)
    第二部分 他莫昔芬耐藥乳腺癌細(xì)胞株的培養(yǎng)與鑒定
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.總結(jié)
    第三部分 乳腺癌MCF-7他莫昔芬耐藥機(jī)制探討
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.總結(jié)
    第四部分 三黃煎劑對他莫昔芬耐藥乳腺癌細(xì)胞株細(xì)胞周期的影響
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.總結(jié)
    第五部分 三黃煎劑對乳腺癌他莫昔芬耐藥細(xì)胞遷移、侵襲和血管新生的影響
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 實(shí)驗(yàn)方法
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4 總結(jié)
    第六部分 三黃煎劑抑制乳腺癌他莫昔芬耐藥PI3K信號通路及相關(guān)蛋白表達(dá)
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.總結(jié)
    第七部分 三黃煎劑抑制乳腺癌他莫昔芬耐藥的作用與抑制PI3K信號通路密切相關(guān)
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.小結(jié)
    第八部分 雞胚實(shí)驗(yàn)
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.小結(jié)
第三章 討論
局限和展望
參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
作者簡介



本文編號：3749951