發(fā)布時間：2023-02-11 13:54

　　目的:研究外用甘草乳膏對UVB輻射引起的BALB/C小鼠皮膚光損傷的干預(yù)作用及對皮膚角蛋白17(CK-17)、轉(zhuǎn)谷酰胺酶(TGase)的基因和蛋白表達(dá)水平影響,探討甘草乳膏對UVB輻射BALB/C小鼠皮膚屏障損傷的防御作用及對皮膚角蛋白17(CK-17)、轉(zhuǎn)谷酰胺酶(TGase)基因和蛋白表達(dá)水平的影響,探討甘草乳膏對UVB輻射BALB/C小鼠皮膚屏障的保護(hù)作用及可能機(jī)制,為驗(yàn)證甘草乳膏防護(hù)陽毒外襲的有效性及將甘草開發(fā)成防護(hù)紫外線外用制劑奠定理論基礎(chǔ)。方法:將BALB/C小鼠隨機(jī)分為4組:空白對照組(K)、模型組(M)、基質(zhì)乳膏組(J)、及甘草乳膏組(H),實(shí)驗(yàn)前將背毛剃凈并在剃毛處皮膚給予相應(yīng)處理(J組涂抹基質(zhì)乳膏,H組涂抹5%甘草乳膏,K組及M組不給藥)20分鐘后除空白對照組,其余各組分別給予500mJ/cm2的UVB輻射,1次/日,連續(xù)30天,肉眼觀察各組小鼠皮膚一般形態(tài)改變,并拍照及文字描述雙重記錄;之后,頸椎脫臼處死實(shí)驗(yàn)小鼠,手術(shù)切取照射部位皮膚組織分為三部分:(1)HE染色法觀察皮膚組織形態(tài)學(xué)改變,(2)用qRT-PCR法檢測小鼠皮膚組織中的角蛋白17(CK-17)、轉(zhuǎn)谷酰...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
符號說明
前言
立題依據(jù)
技術(shù)路線
實(shí)驗(yàn)一 甘草對BALB/C小鼠皮膚的UVB輻射損傷保護(hù)作用
    1. 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 基質(zhì)乳膏、甘草乳膏制備:
        2.2 動物分組及模型的建立
        2.3 組織病理學(xué)變化
    3. 結(jié)果
        3.1 實(shí)驗(yàn)組織一般形態(tài)學(xué)觀察
        3.2 組織形態(tài)學(xué)觀察
    4. 小結(jié)
    5. 附圖
實(shí)驗(yàn)二 甘草對UVB誘導(dǎo)小鼠皮膚CK-17和TG的mRNA水平影響
    1. 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 實(shí)驗(yàn)用藥
        1.3 主要試劑和儀器
        1.4 實(shí)驗(yàn)分組及處理
        1.5 用TaKaRa RNAiso Reagent提取細(xì)胞總RNA
        1.6 RNA純度鑒定
        1.7 cDNA合成
        1.8 逆轉(zhuǎn)錄PCR
    2. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3. 結(jié)果
    4. 小結(jié)
實(shí)驗(yàn)三 Western-bolt檢測CK-17及TGase蛋白表達(dá)
    1. 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 動物處理
        2.2 總蛋白提取
        2.3 SDS-PAGE凝膠電泳液的配置
        2.4 制膠
        2.5 上樣及電泳
        2.6 轉(zhuǎn)膜
        2.7 麗春紅的染色
        2.8 封閉
        2.9 孵育一抗
        2.10 二抗孵育
        2.11 ECL檢測
    3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4. 結(jié)果
    5. 小結(jié)
討論
    1. 實(shí)驗(yàn)討論
    2. 本課題的創(chuàng)新之處
    3. 不足與展望
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3740508