蟬花多糖JCH-1理化性質(zhì)及其對(duì)RAW264.7細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2023-01-09 14:17
蟬花廣泛分布于我國(guó)江浙地區(qū)及西南一帶,在民間已有數(shù)千年的食用及藥用歷史。其生物活性廣泛且資源豐富,因此合理開(kāi)發(fā)利用蟬花資源具有十分深遠(yuǎn)的意義。多糖是蟬花的主要活性成分,雖然已有關(guān)于蟬花多糖理化性質(zhì)及免疫調(diào)節(jié)活性研究的報(bào)道,但是仍不夠系統(tǒng)和深入。因此,本文以從蟬花粗多糖中分離純化得到的均一組分多糖JCH-1為研究對(duì)象,探究其基本理化性質(zhì)。同時(shí),以小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7為靶細(xì)胞,系統(tǒng)評(píng)估其免疫調(diào)節(jié)活性,并闡明其作用機(jī)制,以期為蟬花藥用資源及其相關(guān)健康產(chǎn)品的綜合開(kāi)發(fā)與利用奠定基礎(chǔ)。目的:1.測(cè)定JCH-1單糖組成及總糖、蛋白質(zhì)、硫酸基與糖醛酸的含量,探究其基本理化性質(zhì)。2.考察JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞形態(tài)、增殖能力、吞噬能力及免疫活性物質(zhì)(NO、TNF-α及IL-6)釋放量的影響,評(píng)估JCH-1免疫調(diào)節(jié)活性。3.考察JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞TLR4-MAPK-NF-KB信號(hào)通路的影響,探究JCH-1免疫調(diào)節(jié)機(jī)制。方法:1.JCH-1基本理化性研究采用糖腈酸酯衍生化法測(cè)定JCH-1的單糖組成;分別采用苯酚-濃硫酸法、考馬斯亮藍(lán)法、硫酸-咔唑法及氯化鋇-明膠法測(cè)定JCH-1...
【文章頁(yè)數(shù)】:89 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 蟬花研究概況
1.1 蟬花來(lái)源及考證
1.2 蟬花化學(xué)成分研究
2 中藥多糖免疫調(diào)節(jié)功能研究進(jìn)展
2.1 中藥多糖對(duì)免疫器官的作用
2.2 中藥多糖對(duì)免疫細(xì)胞的作用
2.3 中藥多糖對(duì)免疫物質(zhì)的作用
3 中藥多糖對(duì)巨噬細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)分子機(jī)制研究進(jìn)展
3.1 TLR2/4介導(dǎo)的信號(hào)通路
3.2 甘露糖受體介導(dǎo)的信號(hào)通路
3.3 Dectin-1介導(dǎo)的信號(hào)通路
3.4 其他受體介導(dǎo)的信號(hào)通路
4 小結(jié)
第二章 蟬花多糖JCH-1基本理化性質(zhì)研究
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 原料
1.2 主要試劑
1.3 主要儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 JCH-1總糖含量測(cè)定
2.2 JCH-1蛋白質(zhì)含量測(cè)定
2.3 JCH-1糖醛酸含量測(cè)定
2.4 JCH-1硫酸基含量測(cè)定
2.5 JCH-1傅里葉紅外光譜分析
2.6 JCH-1紫外光譜掃描
2.7 JCH-1單糖組成分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 總糖含量
3.2 蛋白質(zhì)含量
3.3 糖醛酸含量
3.4 硫酸基含量
3.5 紅外光譜掃描
3.6 紫外光譜掃描
3.7 單糖組成
4 小結(jié)與討論
第三章 蟬花多糖JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用研究
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
1.2 實(shí)驗(yàn)原料
1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)
2.2 實(shí)驗(yàn)分組與給藥
2.3 檢測(cè)指標(biāo)及方法
2.4 JCH-1樣品內(nèi)源性脂多糖干擾排除
2.5 數(shù)據(jù)分析與處理
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞增殖的影響
3.2 JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞形態(tài)的影響
3.3 JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞吞噬能力的影響
3.4 JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞NO分泌能力的影響
3.5 JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞分泌TNF-α及IL-6能力影響
3.6 JCH-1內(nèi)源性脂多糖干擾排除
4 小結(jié)與討論
第四章 蟬花多糖JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)分子機(jī)制研究
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
1.2 實(shí)驗(yàn)原料
1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑
1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)
2.2 實(shí)驗(yàn)分組與給藥
2.3 檢測(cè)指標(biāo)及方法
2.4 數(shù)據(jù)分析與處理
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 JCH-1促進(jìn)RAW264.7細(xì)胞iNOS、TNF-α及IL-6 mRNA的表達(dá)
3.2 TLR4介導(dǎo)JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用
3.3 NF-κB信號(hào)通路介導(dǎo)JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用
3.4 MAPK信號(hào)通路介導(dǎo)JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用
3.5 TLR4介導(dǎo)JCH-1激活NF-κB與MAPK信號(hào)通路的過(guò)程
3.6 MAPK信號(hào)通路介導(dǎo)JCH-1激活NF-κB的過(guò)程
3.7 NF-κB通路抑制劑對(duì)JCH-1激活MAPK信號(hào)通路無(wú)影響
4 小結(jié)與討論
結(jié)語(yǔ)
參考文獻(xiàn)
附錄Ⅰ
附錄Ⅱ
附錄Ⅲ
在校期間發(fā)表論文情況及參與課題
致謝
附件
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]2型糖尿病合并感染老年患者機(jī)體免疫功能變化[J]. 趙昕,姜宏宇,姜雪,邊麗. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2018(15)
[2]活性多糖的生物活性及構(gòu)效關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 劉淑貞,周文果,葉偉建,陳江平,巫朝華,陳東清,黃建聯(lián). 食品研究與開(kāi)發(fā). 2017(18)
[3]尿苷對(duì)肝臟脂肪代謝的影響研究進(jìn)展[J]. 張珂,鄧澤元,吳信. 生命科學(xué). 2016(09)
[4]白細(xì)胞介素6與自身免疫性疾病關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 程海燕,陳先國(guó),徐元宏. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2016(09)
[5]金蟬花多糖的含量組成分析及其對(duì)LPS誘導(dǎo)的THP-1細(xì)胞NF-κB活性的研究[J]. 楊全偉,肖柳,黃雄超,張耕,余南才,譚靜玲. 中國(guó)現(xiàn)代中藥. 2016(09)
[6]基于“氣虛生毒”學(xué)說(shuō)論糖尿病的防治[J]. 馮興中. 中醫(yī)雜志. 2016(12)
[7]脂多糖通過(guò)MAPK信號(hào)通路誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞核因子κB抑制蛋白釋放[J]. 吳乙偲,鄭世翔,陳星華,丁國(guó)華. 醫(yī)學(xué)研究雜志. 2016 (02)
[8]金蟬花多糖的抗氧化活性及結(jié)構(gòu)分析[J]. 封燕,貢小輝,韋德群,劉英坤,趙明,于小鳳,OPEYEMI Joshua Olatunji,焦心怡,歐陽(yáng)臻. 食品科學(xué). 2016(13)
[9]枸杞多糖及其硫酸酯體外免疫及抗腫瘤活性[J]. 王君敏,薛敬禮,葛蓓蕾,莊玉偉,杜春燕,薛昆. 鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015(06)
[10]蟲(chóng)草素抗腫瘤活性研究進(jìn)展[J]. 王征,武雪,劉建利,唐志書(shū). 中國(guó)藥學(xué)雜志. 2015(16)
博士論文
[1]黑靈芝多糖的免疫調(diào)節(jié)活性及其作用機(jī)制[D]. 余強(qiáng).南昌大學(xué) 2014
[2]銀耳多糖和黨參多糖及其硫酸化產(chǎn)物的抗病毒和增強(qiáng)免疫活性的研究[D]. 趙曉娜.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[3]硫酸化枸杞多糖和硫酸化當(dāng)歸多糖抗病毒和增強(qiáng)免疫活性的研究[D]. 王君敏.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
碩士論文
[1]基于甘露糖受體的黑靈芝多糖免疫調(diào)節(jié)作用及機(jī)制研究[D]. 帥小雪.南昌大學(xué) 2015
[2]巖藻多糖硫酸酯的抗腫瘤活性篩選和初步機(jī)理研究[D]. 楊柳.山東大學(xué) 2012
[3]白術(shù)多糖及其硫酸化衍生物的抗病毒和增強(qiáng)免疫活性的比較[D]. 姜瑜.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]多糖的分子修飾與抗凝血活性[D]. 賀珍俊.內(nèi)蒙古大學(xué) 2004
本文編號(hào):3729332
【文章頁(yè)數(shù)】:89 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 蟬花研究概況
1.1 蟬花來(lái)源及考證
1.2 蟬花化學(xué)成分研究
2 中藥多糖免疫調(diào)節(jié)功能研究進(jìn)展
2.1 中藥多糖對(duì)免疫器官的作用
2.2 中藥多糖對(duì)免疫細(xì)胞的作用
2.3 中藥多糖對(duì)免疫物質(zhì)的作用
3 中藥多糖對(duì)巨噬細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)分子機(jī)制研究進(jìn)展
3.1 TLR2/4介導(dǎo)的信號(hào)通路
3.2 甘露糖受體介導(dǎo)的信號(hào)通路
3.3 Dectin-1介導(dǎo)的信號(hào)通路
3.4 其他受體介導(dǎo)的信號(hào)通路
4 小結(jié)
第二章 蟬花多糖JCH-1基本理化性質(zhì)研究
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 原料
1.2 主要試劑
1.3 主要儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 JCH-1總糖含量測(cè)定
2.2 JCH-1蛋白質(zhì)含量測(cè)定
2.3 JCH-1糖醛酸含量測(cè)定
2.4 JCH-1硫酸基含量測(cè)定
2.5 JCH-1傅里葉紅外光譜分析
2.6 JCH-1紫外光譜掃描
2.7 JCH-1單糖組成分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 總糖含量
3.2 蛋白質(zhì)含量
3.3 糖醛酸含量
3.4 硫酸基含量
3.5 紅外光譜掃描
3.6 紫外光譜掃描
3.7 單糖組成
4 小結(jié)與討論
第三章 蟬花多糖JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用研究
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
1.2 實(shí)驗(yàn)原料
1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)
2.2 實(shí)驗(yàn)分組與給藥
2.3 檢測(cè)指標(biāo)及方法
2.4 JCH-1樣品內(nèi)源性脂多糖干擾排除
2.5 數(shù)據(jù)分析與處理
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞增殖的影響
3.2 JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞形態(tài)的影響
3.3 JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞吞噬能力的影響
3.4 JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞NO分泌能力的影響
3.5 JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞分泌TNF-α及IL-6能力影響
3.6 JCH-1內(nèi)源性脂多糖干擾排除
4 小結(jié)與討論
第四章 蟬花多糖JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)分子機(jī)制研究
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
1.2 實(shí)驗(yàn)原料
1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑
1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)
2.2 實(shí)驗(yàn)分組與給藥
2.3 檢測(cè)指標(biāo)及方法
2.4 數(shù)據(jù)分析與處理
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 JCH-1促進(jìn)RAW264.7細(xì)胞iNOS、TNF-α及IL-6 mRNA的表達(dá)
3.2 TLR4介導(dǎo)JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用
3.3 NF-κB信號(hào)通路介導(dǎo)JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用
3.4 MAPK信號(hào)通路介導(dǎo)JCH-1對(duì)RAW264.7細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用
3.5 TLR4介導(dǎo)JCH-1激活NF-κB與MAPK信號(hào)通路的過(guò)程
3.6 MAPK信號(hào)通路介導(dǎo)JCH-1激活NF-κB的過(guò)程
3.7 NF-κB通路抑制劑對(duì)JCH-1激活MAPK信號(hào)通路無(wú)影響
4 小結(jié)與討論
結(jié)語(yǔ)
參考文獻(xiàn)
附錄Ⅰ
附錄Ⅱ
附錄Ⅲ
在校期間發(fā)表論文情況及參與課題
致謝
附件
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]2型糖尿病合并感染老年患者機(jī)體免疫功能變化[J]. 趙昕,姜宏宇,姜雪,邊麗. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2018(15)
[2]活性多糖的生物活性及構(gòu)效關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 劉淑貞,周文果,葉偉建,陳江平,巫朝華,陳東清,黃建聯(lián). 食品研究與開(kāi)發(fā). 2017(18)
[3]尿苷對(duì)肝臟脂肪代謝的影響研究進(jìn)展[J]. 張珂,鄧澤元,吳信. 生命科學(xué). 2016(09)
[4]白細(xì)胞介素6與自身免疫性疾病關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 程海燕,陳先國(guó),徐元宏. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2016(09)
[5]金蟬花多糖的含量組成分析及其對(duì)LPS誘導(dǎo)的THP-1細(xì)胞NF-κB活性的研究[J]. 楊全偉,肖柳,黃雄超,張耕,余南才,譚靜玲. 中國(guó)現(xiàn)代中藥. 2016(09)
[6]基于“氣虛生毒”學(xué)說(shuō)論糖尿病的防治[J]. 馮興中. 中醫(yī)雜志. 2016(12)
[7]脂多糖通過(guò)MAPK信號(hào)通路誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞核因子κB抑制蛋白釋放[J]. 吳乙偲,鄭世翔,陳星華,丁國(guó)華. 醫(yī)學(xué)研究雜志. 2016 (02)
[8]金蟬花多糖的抗氧化活性及結(jié)構(gòu)分析[J]. 封燕,貢小輝,韋德群,劉英坤,趙明,于小鳳,OPEYEMI Joshua Olatunji,焦心怡,歐陽(yáng)臻. 食品科學(xué). 2016(13)
[9]枸杞多糖及其硫酸酯體外免疫及抗腫瘤活性[J]. 王君敏,薛敬禮,葛蓓蕾,莊玉偉,杜春燕,薛昆. 鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015(06)
[10]蟲(chóng)草素抗腫瘤活性研究進(jìn)展[J]. 王征,武雪,劉建利,唐志書(shū). 中國(guó)藥學(xué)雜志. 2015(16)
博士論文
[1]黑靈芝多糖的免疫調(diào)節(jié)活性及其作用機(jī)制[D]. 余強(qiáng).南昌大學(xué) 2014
[2]銀耳多糖和黨參多糖及其硫酸化產(chǎn)物的抗病毒和增強(qiáng)免疫活性的研究[D]. 趙曉娜.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[3]硫酸化枸杞多糖和硫酸化當(dāng)歸多糖抗病毒和增強(qiáng)免疫活性的研究[D]. 王君敏.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
碩士論文
[1]基于甘露糖受體的黑靈芝多糖免疫調(diào)節(jié)作用及機(jī)制研究[D]. 帥小雪.南昌大學(xué) 2015
[2]巖藻多糖硫酸酯的抗腫瘤活性篩選和初步機(jī)理研究[D]. 楊柳.山東大學(xué) 2012
[3]白術(shù)多糖及其硫酸化衍生物的抗病毒和增強(qiáng)免疫活性的比較[D]. 姜瑜.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]多糖的分子修飾與抗凝血活性[D]. 賀珍俊.內(nèi)蒙古大學(xué) 2004
本文編號(hào):3729332
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