發(fā)布時(shí)間：2022-12-18 01:50

　　衰老是生物體多種生理功能逐漸退化,機(jī)體應(yīng)對(duì)外界應(yīng)激的抵抗力逐漸下降,衰老相關(guān)疾病逐步增加,最終生物體走向死亡的過程。干預(yù)衰老可以改善衰老相關(guān)功能性退化,增加衰老機(jī)體環(huán)境應(yīng)激抵抗能力,延長(zhǎng)健康壽命。植物多糖,因其化學(xué)結(jié)構(gòu)多樣性,多靶點(diǎn)低細(xì)胞毒性,靶向調(diào)節(jié)多條細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,使其成為潛在抗衰老的化學(xué)藥物儲(chǔ)備池。本論文擬從中國(guó)傳統(tǒng)藥食同源植物三七[Panax notoginseng（Burk）F.H.Chen]根的不同部位（主根、支根和須根）提取粗多糖,進(jìn)行分離純化,分析其理化性質(zhì)及結(jié)構(gòu),以模式動(dòng)物秀麗線蟲為抗衰老活性多糖篩選平臺(tái),篩選具有延長(zhǎng)健康壽命的三七多糖組分,并探討其延長(zhǎng)壽命的分子機(jī)制,旨在為三七的綜合利用提供新的途徑,同時(shí)為發(fā)掘衰老干預(yù)藥物提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.熱水浸提乙醇沉淀獲得三七主根粗多糖（MRP）、三七支根粗多糖（BRP）和三七須根粗多糖（FRP）均為黃色粉末,其得率分別為:15.60%、10.40%和6.10%。總糖含量分別為73.31%、74.24%和74.52%,蛋白質(zhì)含量分別為1.03%、1.22%和1.52%,糖醛酸含量分別為7.65%、5.43%... 

【文章頁數(shù)】：125 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 多糖研究進(jìn)展
        1.1 多糖的提取
        1.2 多糖的純化
        1.3 多糖純度和分子質(zhì)量的測(cè)定
        1.4 多糖含量的測(cè)定
        1.5 多糖結(jié)構(gòu)解析
        1.6 多糖的抗衰老研究概況
    2 三七研究進(jìn)展
        2.1 三七資源
        2.2 三七化學(xué)成分
        2.3 三七藥理活性
        2.4 三七多糖
    3 衰老干預(yù)手段
    4 模式動(dòng)物秀麗線蟲在抗衰老藥物篩選中的應(yīng)用
    5 研究目的意義
    6 技術(shù)路線
第二章 三七粗多糖制備與生物活性篩選
    1 試驗(yàn)材料與儀器
        1.1 試驗(yàn)材料和動(dòng)物
        1.2 試驗(yàn)試劑
        1.3 試驗(yàn)儀器
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 三七粗多糖提取
        2.2 淀粉鑒定
        2.3 三七粗多糖得率測(cè)定
        2.4 三七粗多糖含量測(cè)定
        2.5 糖醛酸含量測(cè)定
        2.6 蛋白含量測(cè)定
        2.7 生物活性篩選
        2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 三七粗多糖的理化特性
        3.2 生物活性篩選
    4 討論
        4.1 三七粗多糖提取和得率
        4.2 三七粗多糖的生物活性
第三章 三七主根粗多糖的純化、結(jié)構(gòu)解析和生物活性篩選
    1 試驗(yàn)材料與儀器
        1.1 試驗(yàn)材料和動(dòng)物
        1.2 試驗(yàn)耗材與試劑
        1.3 試驗(yàn)儀器
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 MRP的分離純化
        2.2 MRP5和MRP5A的純度及分子量測(cè)定
        2.3 MRP5和MRP5A的化學(xué)組成測(cè)定
        2.4 MRP5和MRP5A的單糖組成測(cè)定
        2.5 MRP5和MRP5A的 FT-IR分析
        2.6 MRP5 甲基化分析
        2.7 MRP5的NMR分析
        2.8 MRP5和MRP5A的生物活性篩選
        2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 MRP的純化
        3.2 MRP5和MRP5A的理化特性
        3.3 MRP5 的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
        3.4 MRP5和MRP5A的生物活性比較
    4 討論
        4.1 體外抗氧化活性與三七多糖結(jié)構(gòu)關(guān)系
        4.2 三七多糖組分處理線蟲的合適濃度
        4.3 三七多糖組分對(duì)線蟲氧化應(yīng)激抵抗力的影響
第四章 三七純化多糖對(duì)秀麗線蟲健康壽命的影響
    1 試驗(yàn)材料與儀器
        1.1 試驗(yàn)材料與動(dòng)物
        1.2 試驗(yàn)耗材及試劑
        1.3 試驗(yàn)儀器
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 MRP5 體外ABTS自由基清除能力的測(cè)定
        2.2 MRP5 體內(nèi)生物活性測(cè)定
        2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 MRP5 的體外ABTS自由基清除能力
        3.2 MRP5 對(duì)氧化應(yīng)激下線蟲抵抗力的影響
        3.3 MRP5 對(duì)線蟲體內(nèi)ROS生成的影響
        3.4 MRP5 對(duì)氧化應(yīng)激下hsp-16.2 表達(dá)的影響
        3.5 MRP5 對(duì)線蟲蛋白羰基化和MDA含量的影響
        3.6 MRP5 對(duì)線蟲表型特征的影響
        3.7 MRP5對(duì)polyQ40 聚集的影響
        3.8 MRP5 對(duì)線蟲壽命的影響
        3.9 MRP5對(duì)daf-16p::GFP進(jìn)入細(xì)胞核的影響
        3.10 MRP5 對(duì)線蟲抗氧化酶活性的影響
        3.11 MRP5對(duì)daf-16 突變體壽命及氧化應(yīng)激抵抗力的影響
    4 討論
        4.1 MRP5 對(duì)氧化應(yīng)激存活率及ROS含量的影響
        4.2 MRP5對(duì)DAF-16 轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)入細(xì)胞核的影響
        4.3 MRP5 對(duì)線蟲健康壽命的影響
第五章 三七純化多糖延長(zhǎng)線蟲壽命的作用機(jī)制研究
    1 試驗(yàn)材料與儀器
        1.1 試驗(yàn)材料與動(dòng)物
        1.2 試驗(yàn)耗材與試劑
        1.3 試驗(yàn)儀器
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 線蟲壽命試驗(yàn)
        2.2 MRP5對(duì)hsp-16.2 表達(dá)的影響
        2.3 MRP5對(duì)nhr-57 表達(dá)的影響
        2.4 MRP5對(duì)fat-6::GFP和 fat-7::GFP表達(dá)的影響
        2.5 RNA-seq高通量測(cè)序
        2.6 fat-6和fat-7的qRT-PCR
    3 結(jié)果與分析
        3.1 MRP5對(duì)eat-2 突變體壽命的影響
        3.2 MRP5 對(duì)線蟲熱應(yīng)激響應(yīng)因子HSF-1 的影響
        3.3 MRP5 對(duì)線蟲低氧誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子HIF-1 的影響
        3.4 轉(zhuǎn)錄組分析
        3.5 MRP5對(duì)fat-6和fat-7 基因表達(dá)的影響
    4 討論
        4.1 MRP5 對(duì)線蟲衰老相關(guān)信號(hào)通路的影響
        4.2 MRP5對(duì)Δ9 去飽和酶基因表達(dá)的影響
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附圖及附表
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]三七多糖的微波輔助提取工藝[J]. 李佳笑,胡宇琳,喬春雷,李璐,楊曉華,張華峰.  食品科學(xué)技術(shù)學(xué)報(bào). 2018(02)
[2]三七多糖對(duì)糖尿病腎病大鼠炎癥反應(yīng)及脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 李易,葉曦.  中國(guó)中醫(yī)藥科技. 2018(01)
[3]三七多糖抗氧化活性研究[J]. 黃上峰,陸飛燕,黃元河,潘喬丹,張賢桂,黃鎖義.  微量元素與健康研究. 2018(01)
[4]三七葉多糖的提取分離及結(jié)構(gòu)信息[J]. 鐘思恩,黃光球,陳金仙,薄勝濤,張華林.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2016(21)
[5]假酸漿多糖的酶法提取及純化工藝的研究[J]. 齊欣欣,王遂.  哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(02)
[6]三七多糖通過SREBF-1及ACCa改善2型糖尿病大鼠肝臟脂肪代謝的研究[J]. 胡鳳霞,朱雙.  遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(10)
[7]三七多糖調(diào)控蛋白激酶C-η及蛋白激酶C-ζ表達(dá)改善2型糖尿病大鼠腎功能的研究[J]. 田魯,王港,羅鵬程,陳偉.  新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2015(06)
[8]三七化學(xué)成分的研究歷程和概況[J]. 夏鵬國(guó),張順倉(cāng),梁宗鎖,齊志鴻.  中草藥. 2014(17)
[9]Polysaccharides from Angelica sinensis alleviate neuronal cell injury caused by oxidative stress[J]. Tao Lei,Haifeng Li,Zhen Fang,Junbin Lin,Shanshan Wang,Lingyun Xiao,Fan Yang,Xin Liu,Junjian Zhang,Zebo Huang,Weijing Liao.  Neural Regeneration Research. 2014(03)
[10]三七花多糖的分離純化及結(jié)構(gòu)初步研究[J]. 宮德瀛,黃建,王紅,肖朝萍.  天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2013(12)

博士論文
[1]淫羊藿總黃酮、淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ延長(zhǎng)健康壽限及其作用機(jī)制的研究[D]. 蔡外嬌.復(fù)旦大學(xué) 2012

碩士論文
[1]三七多糖的分離純化及免疫活性的研究[D]. 王健.浙江大學(xué) 2001



本文編號(hào)：3721085