魚藤素是一種天然的魚藤酮類化合物,其抗瘤譜廣泛,對肺癌、乳腺癌、宮頸癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、頭頸癌等多種腫瘤具有良好的抗腫瘤效應。目前魚藤素的應用受限于其帕金森樣神經(jīng)毒性,然而目前針對魚藤素神經(jīng)毒性的研究較少,因此,對魚藤素的神經(jīng)毒性進行研究,尋找合適的降低魚藤素神經(jīng)毒性的方法尤為迫切。L-肌肽是一種內(nèi)源性二肽,其抗氧化作用和抑制α-突觸核蛋白（α-synuclein,α-SYN）聚集的作用能有效保護神經(jīng)元細胞,對延緩帕金森�。≒arkinson’s disease,PD）進程具有重要意義。近年來多項體內(nèi)外研究報道L-肌肽具有抗腫瘤作用,因此,聯(lián)合應用L-肌肽和魚藤素,可能起到協(xié)同抗腫瘤作用以及降低魚藤素神經(jīng)毒性的作用。本文的研究內(nèi)容如下:（1）CCK-8法測定魚藤素對SH-SY5Y細胞的增殖的抑制作用;采用流式細胞術(shù)檢測處理后各組細胞內(nèi)的凋亡率和活性氧（Reactive oxygen species,ROS）水平,驗證魚藤素是否通過氧化應激誘導細胞凋亡:采用分光光度法測定caspase-3活化程度,進一步驗證魚藤素對SH-SY5Y細胞凋亡的誘導作用。（2）檢測不同濃度L-肌肽對SH-S... 

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 魚藤素研究概述
        1.1.1 魚藤素的抗腫瘤活性概述
        1.1.2 魚藤素的毒性及其解決方案研究進展
    1.2 L-肌肽的藥理活性概述
        1.2.1 L—肌肽的抗腫瘤活性概述
        1.2.2 L-肌肽和帕金森病
        1.2.3 肌肽對腫瘤放化療損傷的保護作用
    1.3 主要研究內(nèi)容和研究意義
第二章 魚藤素對SH-SY5Y細胞的增殖抑制和凋亡誘導作用研究
    2.1 前言
    2.2 材料和儀器
        2.2.1 主要試劑
        2.2.2 主要儀器
        2.2.3 細胞株
    2.3 實驗方法
        2.3.1 藥液配制
        2.3.2 細胞復蘇及培養(yǎng)方法
        2.3.3 CCK-8實驗
        2.3.4 AO/EB實驗
        2.3.5 Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率
        2.3.6 DCFH-DA染色流式細胞術(shù)檢測細胞ROS水平
        2.3.7 分光光度法檢測caspase-3活化水平
        2.3.8 統(tǒng)計學分析
    2.4 結(jié)果
        2.4.1 CCK-8實驗
        2.4.2 AO/EB實驗
        2.4.3 Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率
        2.4.4 DCFH-DA染色流式細胞術(shù)檢測細胞ROS水平
        2.4.5 分光光度法檢測caspase-3活化水平
    2.5 討論
第三章 L-肌肽對魚藤素誘導的神經(jīng)毒性的保護作用
    3.1 前言
    3.2 材料和儀器
        3.2.1 主要試劑
        3.2.2 主要儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 藥液配制
        3.3.2 CCK-8實驗
        3.3.3 AO/EB實驗
        3.3.4 Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率
        3.3.5 DCFH-DA染色流式細胞術(shù)檢測細胞ROS水平
        3.3.6 統(tǒng)計學分析
    3.4 結(jié)果
        3.4.1 CCK-8實驗
        3.4.2 AO/EB實驗
        3.4.3 Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率
        3.4.4 DCFH-DA染色流式細胞術(shù)檢測細胞ROS水平
    3.5 討論
第四章 魚藤素和L-肌肽對α -SYN和parkin表達的影響
    4.1 前言
    4.2 材料和儀器
        4.2.1 主要試劑
        4.2.2 主要儀器
    4.3 實驗方法
        4.3.1 Western-blot實驗
        4.3.2 Q-PCR實驗
        4.3.3 統(tǒng)計學分析
    4.4 結(jié)果
        4.4.1 Western-blot實驗
        4.4.2 Q-PCR實驗
    4.5 討論
第五章 魚藤素和L-肌肽聯(lián)合應用的抗腫瘤效應
    5.1 前言
    5.2 材料和儀器
        5.2.1 主要試劑
        5.2.2 主要儀器
        5.2.3 細胞株
    5.3 實驗方法
        5.3.1 魚藤素單藥對H1299細胞增殖的影響
        5.3.2 L-肌肽單藥對H1299細胞增殖的影響
        5.3.3 固定比例聯(lián)合應用魚藤素和L-肌肽對H1299細胞增殖的影響
        5.3.4 魚藤素和30 mmol/L L-肌肽以非固定比例聯(lián)合應用對H1299細胞增殖的影響
        5.3.5 統(tǒng)計學分析
    5.4 實驗結(jié)果
        5.4.1 魚藤素單藥對H1299細胞增殖的影響
        5.4.2 L-肌肽單藥對H1299細胞增殖的影響
        5.4.3 固定比例聯(lián)合應用魚藤素和L-肌肽對H1299細胞增殖的影響
        5.4.4 魚藤素和30 mmol/L L-肌肽以非固定比例聯(lián)合應用對H1299細胞增殖的影響
    5.5 討論
全文小結(jié)與展望
參考文獻
攻讀學位期間成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3712028