本論文由四部分組成:第一部分為炎癥及其相關(guān)體外模型的研究進(jìn)展概述;第二部分為滇南艾中兩類愈創(chuàng)木烷型倍半萜內(nèi)酯類化合物的抗炎活性研究;第三部分為實(shí)驗(yàn)部分;第四部分為討論與展望。本論文主要利用LPS誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7模型,對(duì)從滇南艾（Artemisia austro-yunnanensis Ling et Y.R.Ling）中分離得到的13個(gè)倍半萜類化合物進(jìn)行了體外抗炎活性研究。滇南艾為菊科蒿屬植物。前期研究顯示,蒿屬植物中倍半萜類物質(zhì)豐富,且活性廣泛。本論文中所測試的13個(gè)化合物,除1個(gè)化合物在較小劑量下對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7具有毒性外,其余12個(gè)化合物均可不同程度的抑制LPS誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7模型中iNOS與COX-2的表達(dá),從而抑制NO,ROS,TNF-α,PGE2,IL-6,IL-1β,IL-10的產(chǎn)生;進(jìn)一步的Westren Blot實(shí)驗(yàn)顯示,這些化合物可抑制NF-κB p65的磷酸化,阻斷核因子p65的轉(zhuǎn)位入核。此外,本論文運(yùn)用PCA分析方法,對(duì)所測化合物與炎癥因子的關(guān)系進(jìn)行了初步分析。 

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞
第一章 緒論
    1.1 炎癥
    1.2 抗炎藥物
    1.3 細(xì)胞模型在抗炎藥物研究中的應(yīng)用
        1.3.1 巨噬細(xì)胞RAW264.7模型在抗炎藥物研究中的應(yīng)用
        1.3.2 巨噬細(xì)胞BMDM模型在抗炎藥物研究中的應(yīng)用
        1.3.3 中性粒細(xì)胞模型在抗炎藥物研究中的應(yīng)用
        1.3.4 成纖維上皮細(xì)胞L929模型在抗炎藥物研究中的應(yīng)用
        1.3.5 THP-1細(xì)胞模型在抗炎藥物研究中的應(yīng)用
        1.3.6 NR8383細(xì)胞模型在抗炎藥物研究中的應(yīng)用
        1.3.7 NIH/3T3細(xì)胞模型在抗炎藥物研究中的應(yīng)用
        1.3.8 斑馬魚模型在抗炎藥物研究中的應(yīng)用
    1.4 NO與炎癥
    1.5 經(jīng)典的NF-κB炎癥信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑
    1.6 研究目的與意義
    1.7 研究技術(shù)路線
第二章 滇南艾中倍半萜類化合物的抗炎活性研究
    2.1 引言
    2.1 1,10-裂環(huán)愈創(chuàng)木烷型倍半萜的抗炎活性研究
        2.1.1 1,10-裂環(huán)愈創(chuàng)木烷型倍半萜對(duì)RAW264.7細(xì)胞活力的影響
        2.1.2 1,10-裂環(huán)愈創(chuàng)木烷型倍半萜對(duì)NO的影響
        2.1.3 1,10-裂環(huán)愈創(chuàng)木烷型倍半萜對(duì)炎癥因子的影響
        2.1.4 蛋白定量標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
        2.1.5 1,10-裂環(huán)愈創(chuàng)木烷型倍半萜對(duì)COX-2、iNOS的影響
        2.1.6 1,10-裂環(huán)愈創(chuàng)木烷型倍半萜對(duì)NF-κB活化的影響
        2.1.7 主成分分析
    2.2 倍半萜內(nèi)酯類化合物的抗炎活性研究
        2.2.1 倍半萜內(nèi)酯類化合物對(duì)RAW264.7細(xì)胞活力的影響
        2.2.2 倍半萜內(nèi)酯類化合物對(duì)NO的影響
        2.2.3 倍半萜內(nèi)酯類化合物對(duì)活性氧(ROS)的影響
        2.2.4 倍半萜內(nèi)酯類化合物炎癥因子的影響
        2.2.5 倍半萜內(nèi)酯類化合物對(duì)COX2、iNOS的影響
        2.2.6 倍半萜內(nèi)酯類化合物對(duì)NF-κB活化的影響
        2.2.7 主成分分析
第三章 材料與方法
    3.1 材料與儀器
        3.1.1 主要儀器
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要試劑配制
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.0 小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7的培養(yǎng)
        3.3.1 細(xì)胞凍存
        3.3.2 細(xì)胞凍存
        3.3.3 細(xì)胞復(fù)蘇
        3.3.4 細(xì)胞記數(shù)
        3.3.5 化合物對(duì)細(xì)胞活力的影響——MTT法
        3.3.6 NO的檢測
        3.3.7 抑制NO生成活性實(shí)驗(yàn)
        3.3.8 ROS的檢測
        3.3.9 TNF-α的檢測
        3.3.10 IL-1β的檢測
        3.3.11 IL-6的檢測
        3.3.12 IL-10的檢測
        3.3.13 PGE2的檢測
        3.3.14 COX-2、iNOS以及NF-κB的檢測
        3.3.15 數(shù)據(jù)分析
第四章 討論與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄：碩士期間發(fā)表和待發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3705399