目的:研究清腦益元湯對大鼠腦缺血損傷后BDNF、MKK7表達的影響,探討清腦益元湯保護腦缺血損傷的可能作用機制。方法:將192只雄性SD大鼠,體重250±30g,按隨機數(shù)字表法分為4組:空白組（n=12只）、假手術組（n=60只）、模型組（n=60只）、清腦益元湯組（n=60只）。假手術組、模型組及清腦益元組按缺血損傷后1d、3d、7d、14d、28d五個取材時間點分為5個亞組（n=12只）。并分別作如下處理:空白組正常飼養(yǎng),灌胃等體積蒸餾水;假手術組僅插線0.8cm,術后正常飼養(yǎng),灌胃等體積蒸餾水;模型組行MCAO術,制成大鼠急性腦缺血損傷模型,術后灌胃等體積蒸餾水至各取材時間點;清腦益元湯組灌胃等體積清腦益元湯7d后行MCAO術,制成大鼠急性腦缺血損傷模型,術后灌胃等體積清腦益元湯至各取材時間點。模型大鼠參考Longa的5分制法對大鼠進行神經功能缺損評分,并按各時間點進行標本采集。取材后,免疫組織化學法檢測大鼠缺血側皮質區(qū)BDNF免疫陽性細胞數(shù);RT-qPCR檢測大鼠缺血側皮質區(qū)BDNFmRNA表達水平;蛋白質印跡（Western blotting）法檢測大鼠腦缺血側皮質區(qū)MKK7... 

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
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引言
1 實驗材料
    1.1 實驗動物及飼養(yǎng)條件
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 實驗動物飼養(yǎng)條件
    1.2 實驗動物和給藥方法
        1.2.1 實驗動物
    1.3 實驗主要試劑、儀器及器材
        1.3.1 主要試劑
        1.3.2 主要液體及配制方法
        1.3.3 主要儀器
2 實驗方法
    2.1 實驗動物分組及給藥
    2.2 模型制備
        2.2.1 線栓準備
        2.2.2 手術操作
    2.3 模型制備成功的評定標準
    2.4 腦組織病理標本制作
    2.5 指標檢測
        2.5.1 免疫組化法檢測缺血側皮質區(qū)BDNF免疫陽性細胞
        2.5.2 大鼠腦缺血側皮質區(qū)BDNFmRNA的表達(Quantitative Real-timePCR)
        2.5.3 大鼠腦缺血側皮質區(qū)MKK7的表達(Western blotting)
    2.6 統(tǒng)計處理
3 實驗結果
    3.1 實驗動物觀察
    3.2 動物造模結果
    3.3 神經功能缺損評分結果
    3.4 免疫組化檢測大鼠腦缺血側皮質區(qū)BDNF陽性細胞表達的實驗結果
    3.5 RT-qPCR檢測大鼠腦組織缺血側皮質區(qū)BDNFmRNA的實驗結果
    3.6 大鼠腦缺血側皮質區(qū)MKK7蛋白表達(蛋白印跡法檢測)
4 討論
    4.1 中醫(yī)對中風病因病機的探究
        4.1.1 歷代醫(yī)籍記載詳述中風病不同病名
        4.1.2 歷代醫(yī)家不斷探究中風病之復雜病機
        4.1.3 古今醫(yī)家不斷探究中風病之關鍵病位
    4.2 西醫(yī)對卒中病理機制的研究
        4.2.1 腦缺血損傷的相關機制與信號通路
        4.2.2 BDNF與腦缺血損傷的關系
        4.2.3 MKK7與腦缺血損傷的關系
    4.3 清腦益元湯防治缺血性中風的思路
        4.3.1 腎虛痰瘀、腦絡失養(yǎng)將誘發(fā)缺血性中風
        4.3.2 痰瘀互結、毒邪傷髓則導致缺血性中風
        4.3.3 清熱祛瘀,補腎益元可治療缺血性中風
        4.3.4 清腦益元湯組方思路及用藥原理
    4.4 實驗結果分析
        4.4.1 實驗方法的選擇
        4.4.2 清腦益元湯對BDNF與 MKK7 的影響
5 問題與展望
結論
參考文獻
附錄
主要縮略詞表
綜述 自噬與缺血性腦損傷的關系及中醫(yī)藥干預的研究概述
    參考文獻
致謝
個人簡歷及攻讀學位期間獲得的科研成果


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]辛芍組方中燈盞細辛、赤芍單方對腦缺血再灌注損傷大鼠的作用及機制[J]. 陸定艷,李靖,董莉,劉宗炎,王愛民,劉亭,林昌虎.  貴州醫(yī)科大學學報. 2018(10)
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[9]黃角顆粒通過刺激PI3K/AKT/mTOR信號通路減輕腦缺血再灌注大鼠的腦損傷[J]. 潘宋斌,萬琳,邵衛(wèi),唐坤,姚漢云.  細胞與分子免疫學雜志. 2017(12)
[10]黃芪甲苷通過AKT-mTOR信號通路促進腦缺血的自噬改善腦缺血再灌注損傷[J]. 史楠,張燕,李晉峰,金磊,趙玫,張婷,劉康永,劉建仁.  中國臨床神經科學. 2017(06)



本文編號：3700470