心肌缺血再灌注損傷會(huì)加速心肌死亡,嚴(yán)重威脅人類健康。丹參是心血管疾病常用中藥,其活性成分主要分為脂溶性丹參酮類(隱丹參酮（Cryptotanshinone,CT）和水溶性的丹參酚酸類(丹參素（Danshensu,DSS）和原兒茶酸（Protocatechuic acid,PCA）,對(duì)心血管系統(tǒng)均有一定的保護(hù)作用,但兩者作用機(jī)制、途經(jīng)有所不同。本課題組通過建立心肌缺血再灌注模型及Western Blot研究隱丹參酮和丹參酚酸類化合物（Salvianolic acids,SAs）聯(lián)用的心肌保護(hù)作用,探討化合物聯(lián)用對(duì)eNOS/GRK2的調(diào)節(jié)作用。方法:體外建立大鼠心肌細(xì)胞缺氧-復(fù)氧（Hypoxia-reoxygenation,HR）模型。以單硝酸異山梨酯（10μM）為陽性對(duì)照藥,檢測(cè)CT（1、3和10μM）、DSS和PCA（3、10和30μM）、CT與DSS、CT與PCA聯(lián)用的細(xì)胞保護(hù)作用。并測(cè)定培養(yǎng)液中的LDH、MDA和SOD的含量。體內(nèi)建立大鼠心肌缺血再灌注損傷（Ischemia-reperfusion injury,IRI）模型。將大鼠隨機(jī)分為:正常組、假手術(shù)組、模型組、陽性（單硝酸異... 

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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摘要
Abstract
英文縮略詞表
第一部分 心肌損傷的心血管系統(tǒng)平衡的調(diào)節(jié)機(jī)制及心血管疾病生物標(biāo)志物的研究進(jìn)展
    1 心肌損傷時(shí)心血管系統(tǒng)平衡的調(diào)節(jié)機(jī)制
        1.1 線粒體融合與裂變
        1.2 代謝物
        1.3 其他分子靶點(diǎn)
    2 心血管生物標(biāo)志物研究進(jìn)展
        2.1 臨床常用心血管標(biāo)志物
            2.1.1 心肌肌鈣蛋白
            2.1.2 肌酸激酶MB
            2.1.3 高敏C反應(yīng)蛋白
            2.1.4 B型利鈉肽和氨基末端腦鈉肽前體
            2.1.5 肌紅蛋白
            2.1.6 缺血修飾白蛋白
            2.1.7 生長刺激表達(dá)基因2蛋白
        2.2 其他心血管生物標(biāo)志物
            2.2.1 非編碼RNA
            2.2.2 半乳糖凝集素-3
            2.2.3 碳水化合物抗原-125
            2.2.4 其他
        2.3 生物標(biāo)志物聯(lián)用
    3 本課題的目的及意義
第二部分CT與SAs對(duì)離體HR損傷心肌細(xì)胞活力的影響
    1. 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)樣品及試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 試劑配制
            2.1.1 PBS緩沖鹽
            2.1.2 0.1%原型膠原酶Ⅱ
            2.1.3 樣品溶液
        2.2 原代心肌細(xì)胞的提取、純化及培養(yǎng)
        2.3 實(shí)驗(yàn)分組
        2.4 CT與SAs對(duì)原代心肌細(xì)胞活力的影響
        2.5 CT與SAs對(duì)離體HR損傷心肌細(xì)胞活力的影響
            2.5.1 細(xì)胞HR損傷模型的建立
            2.5.2 CT與SAs對(duì)離體HR損傷心肌細(xì)胞活力的影響
        2.6 心肌細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH、SOD和MDA含量的檢測(cè)
        2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 原代心肌細(xì)胞形態(tài)和存活率
        3.2 CT與SAs對(duì)原代心肌細(xì)胞活力的影響
        3.3 CT與SAs對(duì)離體HR損傷心肌細(xì)胞活力的影響
        3.4 心肌細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH、MDA和SOD的含量
    4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
    5 實(shí)驗(yàn)討論
        5.1 細(xì)胞及陽性對(duì)照藥的選擇
        5.2 正式實(shí)驗(yàn)藥物及其劑量的確定
        5.3 藥物聯(lián)用濃度的選擇依據(jù)及實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.4 CT與SAs聯(lián)用可能的機(jī)制
第三部分CT與SAs對(duì)e NOS/GRK2的調(diào)節(jié)作用
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)樣品及試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及蛋白樣本的制備
        2.2 Western Blot 檢測(cè)eNOS/GRK2 的表達(dá)量
        2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
    5 實(shí)驗(yàn)討論
        5.1 心肌細(xì)胞的選擇及劑量選擇依據(jù)
        5.2 藥物聯(lián)用對(duì)e NOS/GRK2的調(diào)節(jié)作用
第四部分CT與SAs對(duì)IR損傷大鼠心肌的保護(hù)作用
    1. 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)樣品及試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 樣品及試劑配制
        2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
        2.3 動(dòng)物IR損傷模型的建立
        2.4 CT與SAs對(duì)IR損傷大鼠的影響
            2.4.1 心肌梗死面積
            2.4.2 心肌生化指標(biāo)
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支對(duì)大鼠心電圖的影響
        3.2 CT與SAs對(duì)IR損傷大鼠心肌梗死率的影響
        3.3 CT與SAs對(duì)IR損傷大鼠生化指標(biāo)的影響
    4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
    5 實(shí)驗(yàn)討論
        5.1 IR損傷模型及陽性對(duì)照藥的選擇
        5.2 藥物劑量選擇及實(shí)驗(yàn)結(jié)果
第五部分CT與SAs對(duì)e NOS/GRK2的調(diào)節(jié)作用
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
    5 實(shí)驗(yàn)討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡歷
    科研情況
致謝



本文編號(hào)：3683202