目的探討逍遙散調(diào)節(jié)Toll樣受體4（TLR4）基因甲基化水平治療非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis,NASH）肝郁脾虛證大鼠的機(jī)制。方法將30只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組及逍遙散組。正常組大鼠給予正常飲食28周,后4周注射生理鹽水;模型組與逍遙散組大鼠飼喂高脂高糖飲食28周,并通過慢性應(yīng)激束縛及饑飽失常刺激制備肝郁脾虛證模型,后4周分別注射生理鹽水及逍遙散溶液。28周末收集3組大鼠尿液,取肝臟及海馬組織,制作病理切片、采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）、亞硫酸氫測(cè)序PCR（BSP）等方法檢測(cè)相應(yīng)指標(biāo)。結(jié)果與模型組相比,逍遙散組大鼠肝郁脾虛證癥狀明顯緩解,證候積分降低;肝細(xì)胞內(nèi)的脂肪空泡及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)程度顯著減少;肝組織TLR4 mRNA含量下降,TLR4基因甲基化水平升高（P<0.05）。結(jié)論逍遙散可能通過上調(diào)非酒精性脂肪性肝炎肝郁脾虛證大鼠模型中TLR4基因甲基化水平,下調(diào)其TLR4 mRNA的表達(dá),從而改善肝臟脂肪變性程度、炎癥反應(yīng)及肝郁脾虛癥狀,這可能是逍遙散治療非酒精性脂肪性肝炎肝郁脾虛證... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試劑與藥物
    1.2 儀器
    1.3 動(dòng)物與分組
    1.4 倫理審查
    1.5 模型制備與取材
    1.6 D-木糖排泄率的檢測(cè)
    1.7 去甲腎上腺素(Norepinephrine,NE)及5-羥色胺(Serotonin,5-HT)檢測(cè)
    1.8 觀察各組大鼠肝臟病理學(xué)改變
    1.9 TLR4 mRNA含量的表達(dá)
    1.10 DNA提取
    1.11 引物設(shè)計(jì)
    1.12 TLR4基因亞硫酸氫測(cè)序PCR(Bisulfite sequencing PCR,BSP)
    1.13 統(tǒng)計(jì)方法
2 結(jié)果
    2.1 一般行為學(xué)觀察
    2.2 各組大鼠海馬組織5-HT、NE含量和D-木糖排泄率比較
    2.3 肝臟HE及油紅O染色結(jié)果
    2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果
    2.5 TLR4基因甲基化分析
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3660325