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補腎壯筋湯抑制炎癥介導骨關節(jié)炎軟骨基質降解的作用機制研究

發(fā)布時間:2022-02-20 17:58
  目的探討補腎壯筋湯抑制炎癥介導骨關節(jié)炎軟骨基質降解的作用機制研究方法1.選取2月齡SPF級雄性SD大鼠共45只,采用隨機數(shù)字法將所選取的大鼠均分為三組,即空白組(15只)和造模組(30只),空白組行假手術(生理鹽水灌胃),造模組采用改良Hulth法建立動物模型,隨機數(shù)字表法分為模型組(15只,生理鹽水灌胃)和補腎壯筋湯組(15只,補腎壯筋湯灌胃),灌胃1次/日,連續(xù)灌胃12周。HE染色觀察關節(jié)軟骨組織形態(tài)、結構的變化,通過甲苯胺藍染色法檢測關節(jié)軟骨中軟骨細胞數(shù)量以及蛋白多糖等相應改變,采用ELISA法檢測關節(jié)滑膜組織中IL-1β、TNF-α、MMP-13的表達量。2.機械-II型膠原酶消化法,消化SPF級四周齡SD大鼠,分離出軟骨細胞,LPS誘導大鼠軟骨細胞體建立炎癥細胞模型。體外培養(yǎng)的軟骨細胞,分為空白組、模型組(10ng/ml LPS)、抑制劑組(10 ng/ml U0126干預30 min后加入10 ng/ml LPS)、氨基葡萄糖組(10 ng/ml LPS+1.35μg/ml氨基葡萄糖)、補腎壯筋湯組(10 ng/mlLPS+200μg/ml補腎壯筋湯),干預8 h。II型膠... 

【文章來源】:福建中醫(yī)藥大學福建省

【文章頁數(shù)】:61 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
實驗一 補腎壯筋湯對骨關節(jié)炎軟骨基質降解的影響
    研宄目的
    1 實驗材料
        1.1 實驗藥物
        1.2 實驗試劑、耗材
        1.3 實驗儀器
    2 實驗動物
    3 實驗方法與步驟
        3.1 實驗動物造模、分組與給藥
        3.2 實驗動物取材
        3.3 指標檢測
        3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
    4 實驗結果
        4.1 HE染色觀察膝關節(jié)軟骨組織形態(tài)
        4.2 甲苯胺藍染色觀察關節(jié)軟骨蛋白多糖變化
        4.3 ELISA檢測滑膜組織IL-1 β、TNF-α、MMP-13表達
    5. 討論
        5.1 改良Hulth法建立骨關節(jié)炎動物模型
        5.2 軟骨退變與軟骨基質穩(wěn)態(tài)失衡的關系
        5.3 滑膜炎癥與軟骨基質穩(wěn)態(tài)失衡的關系
        5.4 補腎壯筋湯調控軟骨基質穩(wěn)態(tài)失衡抑制軟骨退變的作用機制
    6. 小結
實驗二 補腎壯筋湯對軟骨基質降解蛋白MMPs與ADAMTS表達的影響
    研宄目的
    1 實驗材料
        1.1 實驗藥物
        1.2 實驗動物
    2 實驗方法與步驟
        2.1 實驗試劑的配制
        2.2 大鼠軟骨細胞的分離培養(yǎng)與鑒定
        2.3 補腎壯筋湯干預炎癥性軟骨細胞模型濃度的確立
        2.4 實驗分組及干預方法的確立
        2.5 補腎壯筋湯對炎癥性軟骨細胞模型影響的檢測
        2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
    3 實驗結果
        3.1 軟骨細胞鑒定
        3.2 補腎壯筋湯干預LPS誘導炎癥性軟骨細胞模型濃度的確定
        3.3 補腎壯筋湯干預后各組軟骨細胞相關蛋白表達
        3.4 補腎壯筋湯干預后各組軟骨細胞相關基因表達
    4 討論
        4.1 軟骨細胞的分離培養(yǎng)與鑒定
        4.2 LPS介導軟骨細胞表達軟骨基質降解蛋白的作用途徑
        4.3 炎癥因子介導軟骨基質降解的作用途徑
        4.4 基于骨關節(jié)炎中醫(yī)病理特點的補腎壯筋湯組方依據(jù)
        4.5 補腎壯筋湯調節(jié)炎癥介導軟骨基質降解蛋白表達抑制骨關節(jié)炎筋骨失養(yǎng)的作用機制
    5. 小結
結論
不足與展望
參考文獻
致謝
文獻綜述
    參考文獻
作者簡介


【參考文獻】:
期刊論文
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[3]Ⅱ型膠原酶消化分離法和組織塊直接培養(yǎng)法體外培養(yǎng)人軟骨細胞的效果[J]. 蔣紅,楊明輝,蔡燕,賈艾敏,邱亞,趙明才.  醫(yī)療裝備. 2017(07)
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[6]miRNA與骨關節(jié)炎軟骨基質降解的研究進展[J]. 冀全博,徐亞夢,王巖.  中國修復重建外科雜志. 2016(11)
[7]榮骨定痛膏對骨性關節(jié)炎大鼠IL-1β、NO及氧自由基代謝的影響[J]. 陳小平,王志旺,劉彩民,妥海燕,王瑞瓊.  西部中醫(yī)藥. 2016(07)
[8]骨關節(jié)炎發(fā)病機理的研究進展[J]. 張新玉,魏麗.  河北醫(yī)學. 2016(04)
[9]加味四妙散對骨性關節(jié)炎大鼠膝關節(jié)IL-1β的影響[J]. 王昭,張波,劉繼華.  世界最新醫(yī)學信息文摘. 2016(05)
[10]骨形成蛋白-7在骨性關節(jié)炎中的研究進展[J]. 潘小麗,楊亦彬,田梅.  貴州醫(yī)藥. 2015(10)



本文編號:3635550

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