補腎壯筋湯抑制炎癥介導骨關節(jié)炎軟骨基質降解的作用機制研究
發(fā)布時間:2022-02-20 17:58
目的探討補腎壯筋湯抑制炎癥介導骨關節(jié)炎軟骨基質降解的作用機制研究方法1.選取2月齡SPF級雄性SD大鼠共45只,采用隨機數(shù)字法將所選取的大鼠均分為三組,即空白組(15只)和造模組(30只),空白組行假手術(生理鹽水灌胃),造模組采用改良Hulth法建立動物模型,隨機數(shù)字表法分為模型組(15只,生理鹽水灌胃)和補腎壯筋湯組(15只,補腎壯筋湯灌胃),灌胃1次/日,連續(xù)灌胃12周。HE染色觀察關節(jié)軟骨組織形態(tài)、結構的變化,通過甲苯胺藍染色法檢測關節(jié)軟骨中軟骨細胞數(shù)量以及蛋白多糖等相應改變,采用ELISA法檢測關節(jié)滑膜組織中IL-1β、TNF-α、MMP-13的表達量。2.機械-II型膠原酶消化法,消化SPF級四周齡SD大鼠,分離出軟骨細胞,LPS誘導大鼠軟骨細胞體建立炎癥細胞模型。體外培養(yǎng)的軟骨細胞,分為空白組、模型組(10ng/ml LPS)、抑制劑組(10 ng/ml U0126干預30 min后加入10 ng/ml LPS)、氨基葡萄糖組(10 ng/ml LPS+1.35μg/ml氨基葡萄糖)、補腎壯筋湯組(10 ng/mlLPS+200μg/ml補腎壯筋湯),干預8 h。II型膠...
【文章來源】:福建中醫(yī)藥大學福建省
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
實驗一 補腎壯筋湯對骨關節(jié)炎軟骨基質降解的影響
研宄目的
1 實驗材料
1.1 實驗藥物
1.2 實驗試劑、耗材
1.3 實驗儀器
2 實驗動物
3 實驗方法與步驟
3.1 實驗動物造模、分組與給藥
3.2 實驗動物取材
3.3 指標檢測
3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
4 實驗結果
4.1 HE染色觀察膝關節(jié)軟骨組織形態(tài)
4.2 甲苯胺藍染色觀察關節(jié)軟骨蛋白多糖變化
4.3 ELISA檢測滑膜組織IL-1 β、TNF-α、MMP-13表達
5. 討論
5.1 改良Hulth法建立骨關節(jié)炎動物模型
5.2 軟骨退變與軟骨基質穩(wěn)態(tài)失衡的關系
5.3 滑膜炎癥與軟骨基質穩(wěn)態(tài)失衡的關系
5.4 補腎壯筋湯調控軟骨基質穩(wěn)態(tài)失衡抑制軟骨退變的作用機制
6. 小結
實驗二 補腎壯筋湯對軟骨基質降解蛋白MMPs與ADAMTS表達的影響
研宄目的
1 實驗材料
1.1 實驗藥物
1.2 實驗動物
2 實驗方法與步驟
2.1 實驗試劑的配制
2.2 大鼠軟骨細胞的分離培養(yǎng)與鑒定
2.3 補腎壯筋湯干預炎癥性軟骨細胞模型濃度的確立
2.4 實驗分組及干預方法的確立
2.5 補腎壯筋湯對炎癥性軟骨細胞模型影響的檢測
2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
3 實驗結果
3.1 軟骨細胞鑒定
3.2 補腎壯筋湯干預LPS誘導炎癥性軟骨細胞模型濃度的確定
3.3 補腎壯筋湯干預后各組軟骨細胞相關蛋白表達
3.4 補腎壯筋湯干預后各組軟骨細胞相關基因表達
4 討論
4.1 軟骨細胞的分離培養(yǎng)與鑒定
4.2 LPS介導軟骨細胞表達軟骨基質降解蛋白的作用途徑
4.3 炎癥因子介導軟骨基質降解的作用途徑
4.4 基于骨關節(jié)炎中醫(yī)病理特點的補腎壯筋湯組方依據(jù)
4.5 補腎壯筋湯調節(jié)炎癥介導軟骨基質降解蛋白表達抑制骨關節(jié)炎筋骨失養(yǎng)的作用機制
5. 小結
結論
不足與展望
參考文獻
致謝
文獻綜述
參考文獻
作者簡介
【參考文獻】:
期刊論文
[1]miR-141及MMP-16對骨性關節(jié)炎疼痛及軟骨損傷的影響[J]. 胡玲,馬垚,胡冰,余文雄,左毅. 現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志. 2018(04)
[2]補腎壯筋湯治療膝骨性關節(jié)炎療效的系統(tǒng)評價[J]. 黃綏心,林潔,李西海. 康復學報. 2017(03)
[3]Ⅱ型膠原酶消化分離法和組織塊直接培養(yǎng)法體外培養(yǎng)人軟骨細胞的效果[J]. 蔣紅,楊明輝,蔡燕,賈艾敏,邱亞,趙明才. 醫(yī)療裝備. 2017(07)
[4]補腎壯筋湯治療肝腎虧虛型膝骨關節(jié)炎的臨床研究[J]. 林木南,張亮,武文,王武煉,朱定鈺,黃綏心,李西海. 風濕病與關節(jié)炎. 2017(02)
[5]跳骨片水提物對體外大鼠關節(jié)軟骨細胞活性的影響[J]. 鄭文偉,馬玉環(huán),林平冬,陳后煌,邵翔,陳達,李西海,葉蕻芝. 風濕病與關節(jié)炎. 2017(01)
[6]miRNA與骨關節(jié)炎軟骨基質降解的研究進展[J]. 冀全博,徐亞夢,王巖. 中國修復重建外科雜志. 2016(11)
[7]榮骨定痛膏對骨性關節(jié)炎大鼠IL-1β、NO及氧自由基代謝的影響[J]. 陳小平,王志旺,劉彩民,妥海燕,王瑞瓊. 西部中醫(yī)藥. 2016(07)
[8]骨關節(jié)炎發(fā)病機理的研究進展[J]. 張新玉,魏麗. 河北醫(yī)學. 2016(04)
[9]加味四妙散對骨性關節(jié)炎大鼠膝關節(jié)IL-1β的影響[J]. 王昭,張波,劉繼華. 世界最新醫(yī)學信息文摘. 2016(05)
[10]骨形成蛋白-7在骨性關節(jié)炎中的研究進展[J]. 潘小麗,楊亦彬,田梅. 貴州醫(yī)藥. 2015(10)
本文編號:3635550
【文章來源】:福建中醫(yī)藥大學福建省
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
實驗一 補腎壯筋湯對骨關節(jié)炎軟骨基質降解的影響
研宄目的
1 實驗材料
1.1 實驗藥物
1.2 實驗試劑、耗材
1.3 實驗儀器
2 實驗動物
3 實驗方法與步驟
3.1 實驗動物造模、分組與給藥
3.2 實驗動物取材
3.3 指標檢測
3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
4 實驗結果
4.1 HE染色觀察膝關節(jié)軟骨組織形態(tài)
4.2 甲苯胺藍染色觀察關節(jié)軟骨蛋白多糖變化
4.3 ELISA檢測滑膜組織IL-1 β、TNF-α、MMP-13表達
5. 討論
5.1 改良Hulth法建立骨關節(jié)炎動物模型
5.2 軟骨退變與軟骨基質穩(wěn)態(tài)失衡的關系
5.3 滑膜炎癥與軟骨基質穩(wěn)態(tài)失衡的關系
5.4 補腎壯筋湯調控軟骨基質穩(wěn)態(tài)失衡抑制軟骨退變的作用機制
6. 小結
實驗二 補腎壯筋湯對軟骨基質降解蛋白MMPs與ADAMTS表達的影響
研宄目的
1 實驗材料
1.1 實驗藥物
1.2 實驗動物
2 實驗方法與步驟
2.1 實驗試劑的配制
2.2 大鼠軟骨細胞的分離培養(yǎng)與鑒定
2.3 補腎壯筋湯干預炎癥性軟骨細胞模型濃度的確立
2.4 實驗分組及干預方法的確立
2.5 補腎壯筋湯對炎癥性軟骨細胞模型影響的檢測
2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
3 實驗結果
3.1 軟骨細胞鑒定
3.2 補腎壯筋湯干預LPS誘導炎癥性軟骨細胞模型濃度的確定
3.3 補腎壯筋湯干預后各組軟骨細胞相關蛋白表達
3.4 補腎壯筋湯干預后各組軟骨細胞相關基因表達
4 討論
4.1 軟骨細胞的分離培養(yǎng)與鑒定
4.2 LPS介導軟骨細胞表達軟骨基質降解蛋白的作用途徑
4.3 炎癥因子介導軟骨基質降解的作用途徑
4.4 基于骨關節(jié)炎中醫(yī)病理特點的補腎壯筋湯組方依據(jù)
4.5 補腎壯筋湯調節(jié)炎癥介導軟骨基質降解蛋白表達抑制骨關節(jié)炎筋骨失養(yǎng)的作用機制
5. 小結
結論
不足與展望
參考文獻
致謝
文獻綜述
參考文獻
作者簡介
【參考文獻】:
期刊論文
[1]miR-141及MMP-16對骨性關節(jié)炎疼痛及軟骨損傷的影響[J]. 胡玲,馬垚,胡冰,余文雄,左毅. 現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志. 2018(04)
[2]補腎壯筋湯治療膝骨性關節(jié)炎療效的系統(tǒng)評價[J]. 黃綏心,林潔,李西海. 康復學報. 2017(03)
[3]Ⅱ型膠原酶消化分離法和組織塊直接培養(yǎng)法體外培養(yǎng)人軟骨細胞的效果[J]. 蔣紅,楊明輝,蔡燕,賈艾敏,邱亞,趙明才. 醫(yī)療裝備. 2017(07)
[4]補腎壯筋湯治療肝腎虧虛型膝骨關節(jié)炎的臨床研究[J]. 林木南,張亮,武文,王武煉,朱定鈺,黃綏心,李西海. 風濕病與關節(jié)炎. 2017(02)
[5]跳骨片水提物對體外大鼠關節(jié)軟骨細胞活性的影響[J]. 鄭文偉,馬玉環(huán),林平冬,陳后煌,邵翔,陳達,李西海,葉蕻芝. 風濕病與關節(jié)炎. 2017(01)
[6]miRNA與骨關節(jié)炎軟骨基質降解的研究進展[J]. 冀全博,徐亞夢,王巖. 中國修復重建外科雜志. 2016(11)
[7]榮骨定痛膏對骨性關節(jié)炎大鼠IL-1β、NO及氧自由基代謝的影響[J]. 陳小平,王志旺,劉彩民,妥海燕,王瑞瓊. 西部中醫(yī)藥. 2016(07)
[8]骨關節(jié)炎發(fā)病機理的研究進展[J]. 張新玉,魏麗. 河北醫(yī)學. 2016(04)
[9]加味四妙散對骨性關節(jié)炎大鼠膝關節(jié)IL-1β的影響[J]. 王昭,張波,劉繼華. 世界最新醫(yī)學信息文摘. 2016(05)
[10]骨形成蛋白-7在骨性關節(jié)炎中的研究進展[J]. 潘小麗,楊亦彬,田梅. 貴州醫(yī)藥. 2015(10)
本文編號:3635550
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