目的研究冬凌甲草素對(duì)成骨細(xì)胞分化和破骨細(xì)胞形成的作用及分子機(jī)制。方法從SD大鼠股骨和脛骨中分離出骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和骨髓單核細(xì)胞,培養(yǎng)于含10%胎牛血清的α-MEM培養(yǎng)基,細(xì)胞80%～90%匯合后采用不同濃度的冬凌甲草素（0、1、2、3、4μM）進(jìn)行分組干預(yù),CCK-8法及活死染色檢測(cè)不同濃度的冬凌甲草素對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞及骨髓單核細(xì)胞活力的影響;通過(guò)堿性磷酸酶（ALP）染色、茜素紅染色、ALP活性的測(cè)定以及TRAP染色檢測(cè)冬凌甲草素對(duì)成骨和破骨分化的影響;qRT-PCR檢測(cè)wnt1、β-catenin、Runx2、ALP、collage-1（col-1）、骨鈣蛋白（OCN）、TRAP、c-Fos、NFATc1和CTSK的表達(dá);Western-blot及免疫熒光檢測(cè)wnt1、β-catenin、ALP、col-1、OCN、Runx2、核因子κB受體活化因子配體（RANKL）、骨保護(hù)素（OPG）、GSK-3β、p-GSK-3β的表達(dá)。結(jié)果 （1）與對(duì)照組比較,冬凌甲草素（2μM）具有促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化和提高ALP活性的作用;（2）冬凌甲草素可以促進(jìn)wnt1、β-catenin、Ru... 

【文章來(lái)源】：中華肥胖與代謝病電子雜志. 2020,6(02)

【文章頁(yè)數(shù)】：11 頁(yè)

【文章目錄】：
資料與方法
    一、一般資料
        1.試劑和抗體
        2.細(xì)胞提取
    二、方法
        1.細(xì)胞培養(yǎng)
        2.細(xì)胞毒性試驗(yàn)
        3.活/死染色
        4.成骨細(xì)胞分化
            (1)ALP染色
            (2）茜素紅染色
            (3）堿性磷酸酶活力
            (5)TRAP染色
        6.免疫熒光分析
        7.qRT-PCR檢測(cè)
        8.Western-blot檢測(cè)
    三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    一、高濃度的ORI抑制了骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖
    二、ORI促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化
    三、ORI通過(guò)Wnt/β-catenin信號(hào)通路促進(jìn)成骨細(xì)胞分化并下調(diào)RANKL/OPG的比值
    四、ORI直接抑制RANKL誘導(dǎo)的骨髓單核細(xì)胞的增殖和破骨細(xì)胞分化
    五、ORI間接抑制了RANKL誘導(dǎo)的骨髓單核的破骨細(xì)胞分化
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Oridonin induces apoptosis via PI3K/Akt pathway in cervical carcinoma HeLa cell line[J]. Hong-zhen HU~2,Yue-bo YANG~3,Xiang-dong XU~4,Hong-wei SHEN~5,Yi-min SHU~6,Zi REN~7,Xiao-mao LI~3,Hui-ming SHEN~3,Hai-tao ZENG~(3,8)~2 Department of Gynecology and Obstetrics,Yijishan Hospital,Wannan Medical College,Wuhu 241001,China;~3 Department of Gynecologyand Obstetrics,the Third Affiliated Hospital,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China;~4 Department of Surgery,the First AffiliatedHospital,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China;~2 Department of Gynecology and Obstetrics,the First Affiliated Hospital,SunYat-sen University,Guangzhou 510080.China;~6 Department of Obstetrics and Gynecology,IVF Program,Stanford University MedicalCenter,Palo Alto,CA 94304,USA;~7 Department of Gynecology and Obstetrics,Guangdong Provincial People’s Hospital,Guangzhou510080.China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2007(11)



本文編號(hào)：3635271