車(chē)前子殼多糖的結(jié)構(gòu)解析與生物活性研究
發(fā)布時(shí)間:2022-02-19 06:40
車(chē)前子殼為車(chē)前科(Plantaginaceae)車(chē)前屬(Plantago L.)植物的干燥成熟種皮。本課題從大粒車(chē)前子殼中提取分離純化得到了一種純多糖組分,并對(duì)其進(jìn)行了一級(jí)結(jié)構(gòu)、熱降解性質(zhì)、抗氧化及抗炎活性的研究。結(jié)果如下:首先,通過(guò)有機(jī)溶劑脫脂、熱堿浸提、Sevag法去蛋白、雙氧水脫色、乙醇醇沉等一系列分離提取步驟獲得大粒車(chē)前子殼粗多糖,再借助DEAE纖維素柱層析和Sephacryl S-400葡聚糖凝膠色譜柱純化得到精制多糖PMH。高效凝膠滲透色譜法測(cè)定其純度為98.9%,再利用靜態(tài)光散射法測(cè)定其分子量為1.4×106 Da。熱降解分析顯示,PMH熱降解溫度范圍為224.0-315.1oC。在這個(gè)過(guò)程中,有31.1%的PMH被降解,且PMH表觀活化能相對(duì)較高,為173.1 kJ/mol,顯示了其良好的熱穩(wěn)定性。其次,通過(guò)單糖組成、紅外光譜、甲基化、GC-MS、核磁共振對(duì)PMH的一級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行深入研究,結(jié)果表明:PMH是一個(gè)高分支度的雜多糖,以1,4-β-D-GalpA為主鏈,在O-3位連接有兩個(gè)分支鏈,分別為α-D-Galp-(3→1)-α-D-Galp-(3→...
【文章來(lái)源】:上海交通大學(xué)上海市211工程院校985工程院校教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:84 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
主要符號(hào)及縮略詞表
第一章 緒論
1.1 車(chē)前植物概述
1.2 車(chē)前子化學(xué)成分研究概況
1.2.1 黃酮類(lèi)
1.2.2 苯乙醇苷類(lèi)
1.2.3 脂類(lèi)
1.2.4 氨基酸
1.2.5 其他
1.3 車(chē)前子多糖研究現(xiàn)狀
1.3.1 車(chē)前子多糖的提取分離
1.3.2 車(chē)前子多糖的純化
1.3.3 車(chē)前子多糖的結(jié)構(gòu)
1.3.4 車(chē)前子多糖的功能活性
1.4 本課題立題依據(jù)及主要研究?jī)?nèi)容
1.4.1 立題依據(jù)
1.4.2 主要研究?jī)?nèi)容
第二章 車(chē)前子殼多糖的制備及熱重分析
2.1 前言
2.2 材料、試劑和儀器
2.2.1 材料
2.2.2 試劑
2.2.3 儀器
2.3 實(shí)驗(yàn)方法
2.3.1 車(chē)前子殼多糖的提取
2.3.2 車(chē)前子殼多糖的純化
2.3.3 糖含量的測(cè)定
2.3.4 蛋白含量的測(cè)定
2.3.5 車(chē)前子殼多糖的純度測(cè)定
2.3.6 車(chē)前子殼多糖的分子量測(cè)定
2.3.7 車(chē)前子殼多糖的熱力學(xué)參數(shù)表征
2.4 結(jié)果與討論
2.4.1 提取分離及純化
2.4.2 多糖純度鑒定
2.4.3 分子量測(cè)定
2.4.4 熱降解過(guò)程
2.4.5 表觀活化能的計(jì)算
2.5 本章小結(jié)
第三章 車(chē)前子殼多糖的結(jié)構(gòu)解析
3.1 前言
3.2 試劑和儀器
3.2.1 試劑
3.2.2 儀器
3.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.3.1 單糖組成測(cè)定
3.3.2 甲基化氣質(zhì)聯(lián)用
3.3.3 紅外光譜分析
3.3.4 核磁共振波譜
3.4 結(jié)果與討論
3.4.1 單糖組成測(cè)定
3.4.2 紅外光譜分析
3.4.3 甲基化-氣質(zhì)聯(lián)用分析
3.4.4 核磁共振波譜分析
3.5 本章小結(jié)
第四章 車(chē)前子殼多糖的生物活性研究
4.1 前言
4.2 試劑和儀器
4.2.1 試劑
4.2.2 儀器
4.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.3.1 氧自由基清除實(shí)驗(yàn)
4.3.2 DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)
4.3.3 羥自由基清除實(shí)驗(yàn)
4.3.4 細(xì)胞培養(yǎng)
4.3.5 細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)
4.3.6 ELISA實(shí)驗(yàn)
4.3.7 RT-PCR實(shí)驗(yàn)
4.3.8 Western Blot
4.3.9 免疫熒光實(shí)驗(yàn)
4.3.10 數(shù)據(jù)分析
4.4 結(jié)果與討論
4.4.1 PMH和Psyllium抗氧化活性比較
4.4.2 PMH對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7的細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)
4.4.3 PMH對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7分泌細(xì)胞因子水平的影響
4.4.4 PMH對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的影響
4.4.5 PMH對(duì)NF-κB信號(hào)通路的影響
4.4.6 PMH對(duì)MAPKs信號(hào)通路的影響
4.5 本章小結(jié)
第五章 結(jié)束語(yǔ)
5.1 主要工作與創(chuàng)新點(diǎn)
5.2 后續(xù)研究工作
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間已發(fā)表或錄用的論文及專(zhuān)利
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]車(chē)前子多糖抗炎作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 馮娜,劉芳,郭會(huì)彩,曹阿芳,王素敏. 天津醫(yī)藥. 2012(06)
[2]MTT法檢測(cè)RAW264.7細(xì)胞活力及可能因素分析[J]. 白生賓,陳紅香,鐘近潔,馮樹(shù)梅,李甜,羅學(xué)港. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2011(23)
[3]車(chē)前子多糖對(duì)大鼠肝線粒體自由基防御功能的影響[J]. 袁從英,張然,車(chē)文文,張寧,馮娜,王素敏. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2011(04)
[4]熱分析技術(shù)在高分子及復(fù)合材料檢測(cè)中的應(yīng)用[J]. 丁建軍,梅一飛,白永智. 中國(guó)建材科技. 2010(S2)
[5]車(chē)前子多糖抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用的研究[J]. 袁從英,熊晨,郭會(huì)彩,張然,王素敏. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2009(10)
[6]車(chē)前多糖對(duì)小鼠免疫功能的影響[J]. 謝小梅,付志紅,吳娟,戴丹丹,謝明勇. 免疫學(xué)雜志. 2009(02)
[7]影響MTT比色試驗(yàn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[J]. 楊芳,路國(guó)華,劉利兵,劉芳娥,曲萍. 第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2009(03)
[8]車(chē)前子多糖對(duì)骨髓來(lái)源樹(shù)突狀細(xì)胞表型和吞噬功能的影響[J]. 唐永富,黃丹菲,殷軍藝,周超,謝小梅,謝明勇. 食品科學(xué). 2007(10)
[9]車(chē)前子多糖對(duì)便秘模型小鼠通便作用的研究[J]. 吳光杰,田穎剛,謝明勇,李昌. 食品科學(xué). 2007(10)
[10]微波技術(shù)用于車(chē)前子多糖的提取[J]. 付志紅,謝明勇,聶少平. 食品科學(xué). 2005(03)
博士論文
[1]唑類(lèi)含能硝酸鹽的熱分解動(dòng)力學(xué)及在固體推進(jìn)劑中的應(yīng)用研究[D]. 杜旭杰.北京理工大學(xué) 2014
[2]廣藿香酮及廣藿香醇的抗炎、抗真菌活性及藥物代謝研究[D]. 黎玉翠.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2013
[3]大粒車(chē)前子多糖生物活性、結(jié)構(gòu)和構(gòu)象特征研究及多糖分離純化新方法初探[D]. 殷軍藝.南昌大學(xué) 2012
[4]植物活性多糖對(duì)小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用[D]. 黃丹菲.南昌大學(xué) 2009
[5]車(chē)前子多糖、黃酮和苯乙醇苷類(lèi)的純化、結(jié)構(gòu)解析及其活性功能研究[D]. 萬(wàn)茵.南昌大學(xué) 2007
[6]車(chē)前子多糖的研究[D]. 王東.遼寧中醫(yī)學(xué)院 2002
碩士論文
[1]利用細(xì)胞炎癥模型研究牛蒡低聚果糖的抗炎作用及相關(guān)機(jī)制[D]. 劉晶.山東大學(xué) 2013
[2]L-茶氨酸對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞分泌細(xì)胞因子及肉仔雞生產(chǎn)、免疫與抗氧化性能的影響[D]. 文慧.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]車(chē)前子多糖的分離純化及其功能性質(zhì)研究[D]. 周超.南昌大學(xué) 2007
[4]車(chē)前子膠調(diào)血脂及降血糖作用的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 栗艷彬.遼寧中醫(yī)學(xué)院 2004
本文編號(hào):3632419
【文章來(lái)源】:上海交通大學(xué)上海市211工程院校985工程院校教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:84 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
主要符號(hào)及縮略詞表
第一章 緒論
1.1 車(chē)前植物概述
1.2 車(chē)前子化學(xué)成分研究概況
1.2.1 黃酮類(lèi)
1.2.2 苯乙醇苷類(lèi)
1.2.3 脂類(lèi)
1.2.4 氨基酸
1.2.5 其他
1.3 車(chē)前子多糖研究現(xiàn)狀
1.3.1 車(chē)前子多糖的提取分離
1.3.2 車(chē)前子多糖的純化
1.3.3 車(chē)前子多糖的結(jié)構(gòu)
1.3.4 車(chē)前子多糖的功能活性
1.4 本課題立題依據(jù)及主要研究?jī)?nèi)容
1.4.1 立題依據(jù)
1.4.2 主要研究?jī)?nèi)容
第二章 車(chē)前子殼多糖的制備及熱重分析
2.1 前言
2.2 材料、試劑和儀器
2.2.1 材料
2.2.2 試劑
2.2.3 儀器
2.3 實(shí)驗(yàn)方法
2.3.1 車(chē)前子殼多糖的提取
2.3.2 車(chē)前子殼多糖的純化
2.3.3 糖含量的測(cè)定
2.3.4 蛋白含量的測(cè)定
2.3.5 車(chē)前子殼多糖的純度測(cè)定
2.3.6 車(chē)前子殼多糖的分子量測(cè)定
2.3.7 車(chē)前子殼多糖的熱力學(xué)參數(shù)表征
2.4 結(jié)果與討論
2.4.1 提取分離及純化
2.4.2 多糖純度鑒定
2.4.3 分子量測(cè)定
2.4.4 熱降解過(guò)程
2.4.5 表觀活化能的計(jì)算
2.5 本章小結(jié)
第三章 車(chē)前子殼多糖的結(jié)構(gòu)解析
3.1 前言
3.2 試劑和儀器
3.2.1 試劑
3.2.2 儀器
3.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.3.1 單糖組成測(cè)定
3.3.2 甲基化氣質(zhì)聯(lián)用
3.3.3 紅外光譜分析
3.3.4 核磁共振波譜
3.4 結(jié)果與討論
3.4.1 單糖組成測(cè)定
3.4.2 紅外光譜分析
3.4.3 甲基化-氣質(zhì)聯(lián)用分析
3.4.4 核磁共振波譜分析
3.5 本章小結(jié)
第四章 車(chē)前子殼多糖的生物活性研究
4.1 前言
4.2 試劑和儀器
4.2.1 試劑
4.2.2 儀器
4.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.3.1 氧自由基清除實(shí)驗(yàn)
4.3.2 DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)
4.3.3 羥自由基清除實(shí)驗(yàn)
4.3.4 細(xì)胞培養(yǎng)
4.3.5 細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)
4.3.6 ELISA實(shí)驗(yàn)
4.3.7 RT-PCR實(shí)驗(yàn)
4.3.8 Western Blot
4.3.9 免疫熒光實(shí)驗(yàn)
4.3.10 數(shù)據(jù)分析
4.4 結(jié)果與討論
4.4.1 PMH和Psyllium抗氧化活性比較
4.4.2 PMH對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7的細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)
4.4.3 PMH對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7分泌細(xì)胞因子水平的影響
4.4.4 PMH對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的影響
4.4.5 PMH對(duì)NF-κB信號(hào)通路的影響
4.4.6 PMH對(duì)MAPKs信號(hào)通路的影響
4.5 本章小結(jié)
第五章 結(jié)束語(yǔ)
5.1 主要工作與創(chuàng)新點(diǎn)
5.2 后續(xù)研究工作
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間已發(fā)表或錄用的論文及專(zhuān)利
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]車(chē)前子多糖抗炎作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 馮娜,劉芳,郭會(huì)彩,曹阿芳,王素敏. 天津醫(yī)藥. 2012(06)
[2]MTT法檢測(cè)RAW264.7細(xì)胞活力及可能因素分析[J]. 白生賓,陳紅香,鐘近潔,馮樹(shù)梅,李甜,羅學(xué)港. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2011(23)
[3]車(chē)前子多糖對(duì)大鼠肝線粒體自由基防御功能的影響[J]. 袁從英,張然,車(chē)文文,張寧,馮娜,王素敏. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2011(04)
[4]熱分析技術(shù)在高分子及復(fù)合材料檢測(cè)中的應(yīng)用[J]. 丁建軍,梅一飛,白永智. 中國(guó)建材科技. 2010(S2)
[5]車(chē)前子多糖抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用的研究[J]. 袁從英,熊晨,郭會(huì)彩,張然,王素敏. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2009(10)
[6]車(chē)前多糖對(duì)小鼠免疫功能的影響[J]. 謝小梅,付志紅,吳娟,戴丹丹,謝明勇. 免疫學(xué)雜志. 2009(02)
[7]影響MTT比色試驗(yàn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[J]. 楊芳,路國(guó)華,劉利兵,劉芳娥,曲萍. 第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2009(03)
[8]車(chē)前子多糖對(duì)骨髓來(lái)源樹(shù)突狀細(xì)胞表型和吞噬功能的影響[J]. 唐永富,黃丹菲,殷軍藝,周超,謝小梅,謝明勇. 食品科學(xué). 2007(10)
[9]車(chē)前子多糖對(duì)便秘模型小鼠通便作用的研究[J]. 吳光杰,田穎剛,謝明勇,李昌. 食品科學(xué). 2007(10)
[10]微波技術(shù)用于車(chē)前子多糖的提取[J]. 付志紅,謝明勇,聶少平. 食品科學(xué). 2005(03)
博士論文
[1]唑類(lèi)含能硝酸鹽的熱分解動(dòng)力學(xué)及在固體推進(jìn)劑中的應(yīng)用研究[D]. 杜旭杰.北京理工大學(xué) 2014
[2]廣藿香酮及廣藿香醇的抗炎、抗真菌活性及藥物代謝研究[D]. 黎玉翠.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2013
[3]大粒車(chē)前子多糖生物活性、結(jié)構(gòu)和構(gòu)象特征研究及多糖分離純化新方法初探[D]. 殷軍藝.南昌大學(xué) 2012
[4]植物活性多糖對(duì)小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用[D]. 黃丹菲.南昌大學(xué) 2009
[5]車(chē)前子多糖、黃酮和苯乙醇苷類(lèi)的純化、結(jié)構(gòu)解析及其活性功能研究[D]. 萬(wàn)茵.南昌大學(xué) 2007
[6]車(chē)前子多糖的研究[D]. 王東.遼寧中醫(yī)學(xué)院 2002
碩士論文
[1]利用細(xì)胞炎癥模型研究牛蒡低聚果糖的抗炎作用及相關(guān)機(jī)制[D]. 劉晶.山東大學(xué) 2013
[2]L-茶氨酸對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞分泌細(xì)胞因子及肉仔雞生產(chǎn)、免疫與抗氧化性能的影響[D]. 文慧.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]車(chē)前子多糖的分離純化及其功能性質(zhì)研究[D]. 周超.南昌大學(xué) 2007
[4]車(chē)前子膠調(diào)血脂及降血糖作用的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 栗艷彬.遼寧中醫(yī)學(xué)院 2004
本文編號(hào):3632419
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