目的:通過(guò)蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)手段找到適用于藥材全蝎含量測(cè)定的目標(biāo)蛋白質(zhì)及其特征肽段,用該特征肽段形成定量方法。方法:全蝎粉碎后經(jīng)PBS緩沖溶液超聲提取并過(guò)濾后,得到藥材的蛋白質(zhì)提取溶液。上述溶液經(jīng)胰蛋白酶酶解后通過(guò)高分辨質(zhì)譜進(jìn)行分析,確定待測(cè)的目標(biāo)蛋白質(zhì)（β-肌動(dòng)蛋白）和與之對(duì)應(yīng)的特征肽段（IIAPPER）,并進(jìn)行特征肽段及其同位素內(nèi)標(biāo)物(IIA*(¹³C₃,¹⁵N)PPER)的合成。用得到特征肽段做對(duì)照品,同位素內(nèi)標(biāo)物做內(nèi)標(biāo)進(jìn)行含量測(cè)定。色譜柱為Waters ACQUITY UPLC HSS T3（2.1 mm×100 mm,1.8μm）,流動(dòng)相為0.1%甲酸溶液（V/V）-水和乙腈,梯度洗脫。質(zhì)譜使用電噴霧離子源（ESI）正離子模式,采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）進(jìn)行信號(hào)采集。定量方法為內(nèi)標(biāo)法。結(jié)果:β-肌動(dòng)蛋白的特征肽段在0.1～40 nmol/L濃度范圍內(nèi)線性良好,相關(guān)系數(shù)（r²）在0.999以上。方法檢出限為0.04 mg/kg,定量限為0.13 mg/kg。加標(biāo)回收率在87%～93%,重復(fù)性的... 

【文章來(lái)源】：世界中醫(yī)藥. 2020,15(13)

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【部分圖文】：

對(duì)照品的MRM、TIC譜圖

供試品的MRM、TIC譜圖

方法空白的MRM、TIC譜圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]全蝎資源古今考證[J]. 王二歡,馬存德,常暉,楊祎辰,劉峰.  中國(guó)現(xiàn)代中藥. 2019(11)
[2]超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定牛源性酪蛋白方法中酶解條件的優(yōu)化及酶解性能的評(píng)價(jià)[J]. 孫姍姍,李婷婷,陳啟,羅嬌依,李剛,曹進(jìn).  理化檢驗(yàn)(化學(xué)分冊(cè)). 2019(10)
[3]超高效液相色譜-三重四級(jí)桿質(zhì)譜法用于阿膠糕類(lèi)食品中阿膠的鑒別及馬、牛、羊、豬皮源成分的檢測(cè)[J]. 張靜嫻,胡青,董洪霜,孫健,馮睿,于泓,張甦,毛秀紅,季申.  世界中醫(yī)藥. 2019(04)
[4]全蝎酶解液超濾物對(duì)三種細(xì)胞抗腫瘤活性比較研究[J]. 孫志藝,張茹,趙麗萍,王彥多,劉金虎,李梓欣,史磊.  山東化工. 2019(08)
[5]全蝎聯(lián)合石菖蒲對(duì)士的寧致癇小鼠行為及抗氧化機(jī)制的影響[J]. 安雅芳.  世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2019(17)
[6]蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在食品品質(zhì)檢測(cè)及鑒偽中的應(yīng)用[J]. 趙方圓,吳亞君,韓建勛,葛毅強(qiáng),陳穎.  中國(guó)食品學(xué)報(bào). 2012(11)
[7]不同方法加工全蝎的氨基酸含量及藥理作用對(duì)比研究[J]. 黃亮,張樂(lè)佳,郭茂軍,呂雪娟.  中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2009(16)
[8]不同炮制工藝的全蝎中氨基酸含量對(duì)比[J]. 王振霞,孔凡平.  中國(guó)藥業(yè). 2007(24)
[9]全蝎的化學(xué)成分及其鎮(zhèn)痛作用的研究進(jìn)展[J]. 譚銀合,郭建生.  湖南中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2001(05)

碩士論文
[1]節(jié)肢動(dòng)物地龍和全蝎抗菌化學(xué)成分研究[D]. 劉華清.河南科技大學(xué) 2018
[2]全蝎純化液對(duì)凝血酶誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)血管活性物質(zhì)的影響研究[D]. 周牡娜.湖南中醫(yī)藥大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3630465