已有研究表明,柑橘果實(shí)具有包括降糖在內(nèi)的多種生物活性。本研究利用HepG2細(xì)胞-葡萄糖消耗模型,對(duì)35個(gè)不同品種柑橘果實(shí)（油胞層、白皮層、囊衣、汁胞）的黃酮類物質(zhì)進(jìn)行促葡萄糖消耗活性評(píng)價(jià)。從具有較強(qiáng)促葡萄糖消耗活性的柑橘品種果實(shí)中分離純化得到多甲氧基黃酮（PMFs）組分,對(duì)其體外降糖活性進(jìn)行評(píng)價(jià),并通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)（RT-qPCR）分析相關(guān)基因表達(dá)差異,開展相關(guān)機(jī)理研究;進(jìn)一步利用自發(fā)型糖尿病KK-Ay小鼠模型對(duì)PMFs組分的血糖調(diào)節(jié)功能進(jìn)行了驗(yàn)證。主要研究結(jié)果如下:（1）不同柑橘品種黃酮類物質(zhì)的促葡萄糖消耗活性存在較大的差異,相同品種不同部位提取得到的黃酮類物質(zhì)的潛在降糖活性也各不相同,其中發(fā)揮促葡萄糖消耗活性的黃酮類物質(zhì)主要來(lái)源于油胞層和白皮層,而囊衣和汁胞提取物未能檢測(cè)到該活性。因此,發(fā)揮降糖作用的活性組分主要分布于柑橘果皮中。通過(guò)以上研究,篩選出了具有潛在降糖能力的柑橘品種:’甌柑’、’愛(ài)媛30’、’茶枝柑’、’天草’等。（2）以甌柑果皮為材料,分離純化得到富含PMFs的黃酮類物質(zhì),對(duì)其體外降糖作用進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)當(dāng)PMFs濃度為5μg/mL時(shí),HepG2細(xì)胞24h葡萄... 

【文章來(lái)源】：浙江大學(xué)浙江省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
1 前言
    1.1 柑橘概況
    1.2 多甲氧基黃酮類化合物
        1.2.1 多甲氧基黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)
        1.2.2 多甲氧基黃酮類化合物的生物活性
        1.2.3 多甲氧基黃酮類化合物的降血糖活性機(jī)制
    1.3 糖尿病
    1.4 天然產(chǎn)物的血糖調(diào)節(jié)作用
    1.5 研究目標(biāo)與研究?jī)?nèi)容
2 柑橘果實(shí)黃酮類物質(zhì)促葡萄糖消耗活性評(píng)價(jià)
    2.1 材料、試劑和儀器
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 試驗(yàn)試劑
        2.1.3 試驗(yàn)儀器
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 不同品種柑橘果實(shí)黃酮類物質(zhì)的提取物制備
        2.2.2 HepG2細(xì)胞系及細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.3 促葡萄糖消耗活性評(píng)價(jià)
        2.2.4 統(tǒng)計(jì)分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 柚類
        2.3.2 橙類
        2.3.3 寬皮柑橘類
        2.3.4 雜柑類
    2.4 討論
3 柑橘果實(shí)PMFs組分體外降糖活性及相關(guān)機(jī)制研究
    3.1 材料、試劑與儀器
        3.1.1 試驗(yàn)材料
        3.1.2 試驗(yàn)試劑
        3.1.3 試驗(yàn)儀器
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 柑橘果實(shí)PMFs組分的分離純化
        3.2.2 細(xì)胞系和細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.3 PMFs組分的促葡萄糖消耗活性檢測(cè)
        3.2.4 RNA提取與逆轉(zhuǎn)錄
        3.2.5 對(duì)WNT信號(hào)通路關(guān)鍵基因的RT-qPCR分析
        3.2.6 統(tǒng)計(jì)分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 柑橘果實(shí)PMFs組分促葡萄糖消耗活性評(píng)價(jià)
        3.3.2 基因的差異表達(dá)分析
    3.4 討論
4 柑橘果實(shí)PMFs組分對(duì)糖尿病小鼠的血糖調(diào)節(jié)活性研究
    4.1 材料、試劑與儀器
        4.1.1 試驗(yàn)材料
        4.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
        4.1.3 試驗(yàn)試劑
        4.1.4 試驗(yàn)儀器
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 試驗(yàn)動(dòng)物分組和給藥
        4.2.2 空腹血糖和口服葡萄糖耐受量測(cè)定
        4.2.3 樣品采集和處理
        4.2.4 血清生化指標(biāo)測(cè)定
        4.2.5 肝臟組織H&E染色
        4.2.6 肝臟組織油紅O染色
        4.2.7 統(tǒng)計(jì)分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 對(duì)小鼠體重變化和攝食量的影響
        4.3.2 對(duì)小鼠空腹血糖和口服葡萄糖耐受量的影響
        4.3.3 對(duì)小鼠臟器系數(shù)(體重百分比)的影響
        4.3.4 對(duì)小鼠血清參數(shù)的影響
        4.3.5 對(duì)小鼠肝臟組織形態(tài)的影響
    4.4 討論
5 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯對(duì)糖尿病大鼠心臟的保護(hù)作用及對(duì)TGF-β1/Smad3信號(hào)通路表達(dá)的影響[J]. 孫敬茹,陳克研,孫倩,韓梅.  中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(02)
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[3]天然黃酮類化合物治療2型糖尿病的機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 郭穎,辛念,戴榮繼.  天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2017(10)
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[8]中國(guó)特有柑桔屬植物基本類型不同組織類黃酮含量分析[J]. 楊樸麗.  中國(guó)果業(yè)信息. 2014(02)
[9]茶枝柑皮提取物中黃酮類成分的含量測(cè)定[J]. 甘偉發(fā),黃慶華,吉國(guó)輝,定力.  廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào). 2013(03)
[10]2型糖尿病患者正常值范圍內(nèi)的較高血谷丙轉(zhuǎn)氨酶與心血管危險(xiǎn)因素簇集的相關(guān)性研究[J]. 齊婷,劉彥君,許樟榮,曹明君,王玉珍,楊小平.  中國(guó)糖尿病雜志. 2012(01)

博士論文
[1]楊梅果實(shí)酚類物質(zhì)提取物降糖活性及其相關(guān)機(jī)理研究[D]. 張夏南.浙江大學(xué) 2016
[2]WNT通路基因和環(huán)境因素交互作用與2型糖尿病的關(guān)聯(lián)研究[D]. 李琳琳.鄭州大學(xué) 2015
[3]甌柑和胡柚果實(shí)黃酮類化合物組分鑒定、分離純化及生物活性研究[D]. 張九凱.浙江大學(xué) 2013

碩士論文
[1]酸橙與甜橙的遺傳起源及柑橘糖酸變化初探[D]. 何發(fā).華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]柑橘黃酮類化合物組分鑒定與抗氧化活性研究[D]. 錢井.浙江大學(xué) 2017
[3]柑橘精油抗氧化特性及對(duì)皮膚細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用研究[D]. 黃娜娜.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]寬皮柑橘速凍保鮮技術(shù)的研究[D]. 胡中海.西南大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3629273