目的:1.研究越鞠甘麥大棗湯對皮質(zhì)酮誘導的小鼠海馬神經(jīng)元細胞系（HT22）細胞損傷的神經(jīng)保護作用。2.研究越鞠甘麥大棗湯對谷氨酸誘導的HT22細胞損傷的神經(jīng)保護作用。3.研究越鞠甘麥大棗湯對脂多糖（LPS）誘導的小膠質(zhì)細胞（BV2）炎癥模型的保護作用。方法:HT22細胞系、BV2細胞系無菌培養(yǎng),制備越鞠甘麥大棗湯水提液和含藥血清,實驗包括3個部分:1.以高濃度皮質(zhì)酮（CORT）建立細胞損傷模型,實驗分為5組:正常組（不含皮質(zhì)酮的正常細胞組）、模型組（皮質(zhì)酮損傷的細胞組）、越鞠甘麥大棗湯含藥血清組（1%、5%、10%）,四甲基偶氮唑鹽法（MTT）檢測實驗各組細胞存活率,酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）檢測實驗各組乳酸脫氫酶（LDH）漏出量,蛋白免疫印跡法（Westernblot）檢測各組細胞AKT、p-AKT蛋白的表達。2.以高濃度谷氨酸建立細胞損傷模型,實驗分為7組:正常組、模型組、越鞠甘麥大棗湯含藥血清組（1%、5%、10%）、越鞠甘麥大棗湯水煎劑組、尼莫地平組。MTT法檢測實驗各組細胞存活率;ELISA法檢測乳酸脫氫酶（LDH）釋放率及細胞內(nèi)活性氧自由基（ROS）的水平;Wester... 

【文章來源】：南京中醫(yī)藥大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１不同濃度的ＣＯＲＴ對ＨＴ２２細胞成活率的影響

＾?＾?＾?＾??ＣＯＲＴ?Ｍｍ〇ｌ／Ｌ??圖２．１不同濃度的ＣＯＲＴ對ＨＴ２２細胞成活率的影響。與正常組相比，采用單因素方差分析結(jié)果顯示，不同濃度的ＣＯＲＴ??組成活率顯著降低，＊＊＊＊Ｐ＜〇．〇〇〇１。??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＣＯＲＴ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｓｕｒｖｉｖａｌ?ｒａｔｅ?ｏｆ?ＨＴ２２?ｃｅｌｌｓ．?Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｎｏｒｍａｌ?ｇｒｏｕｐ，?ｔｈｅ??ｏｎｅ－ｗａｙ?ＡＮＯＶＡ?ｓｈｏｗｅｄ?ｔｈａｔ?ｔｈｅ?ｓｕｒｖｉｖａｌ?ｒａｔｅ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＣＯＲＴ?ｗａｓ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ?ｒｅｄｕｃｅｄ．?＊＊＊＊?Ｐ＜０．０００１．??２．?３．?２越鞠甘麥大棗湯含藥血清對ＣＯＲＴ誘導損傷的ＨＴ２２細胞存活率的影響??按照“２．２．４”項下分組方法共培養(yǎng)各組細胞２４ｈ后，采用ＭＴＴ法檢測實驗各組ＨＴ２２細??胞的活性，并計算各組成活率，結(jié)果如圖２．２所示。與正常組相比，ＣＯＲＴ誘導損傷的模??型組細胞成活率顯著下降（Ｐ０．０００１）；與模型組相比，不同濃度的越鞠甘麥大棗湯含藥??血清組細胞存活率顯著上升（Ｐ＜〇．〇〇〇ｌ），且呈濃度依賴性。??＊＊＊＊??１?？０１?＃＃＃＃??？ｆ?審?Ｘ?＿??Ｊ?０?５?■??＊０）??°??０．０?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??，，＃，，??ＣＯＲＴ（７０〇Ｍｍｏｌ／Ｌ）??圖２．２不同濃度的越鞠甘麥大棗湯對細胞成活率的影響。與正常組相比

?２．?３．?３越鞠甘麥大棗湯含藥血清對ＣＯＲＴ損傷的ＨＴ２２細胞ＬＤＨ漏出量的影響??分別測定各組細胞上清中和細胞內(nèi)ＬＤＨ的值，結(jié)果如圖２．３所示；按照“２．２．６”項下公??式計算各組細胞ＬＤＨ漏出量，結(jié)果如圖２．４所示。與正常組相比，ＣＯＲＴ模型組ＬＤＨ漏??出量顯著增加（Ｐ＜〇．〇】）；與模型組相比，越鞠甘麥大棗湯含藥血清組ＬＤＨ漏出量顯著減??少（尸＜０．０００１）。??Ａ??６－Ｊ?＿＾??＃＃＃＃?Ｂ??．４。１??ｔ＾－?＾?Ｉ?，?？??ｃｂ?干丁丁??〇?．?三３０－?？＿?邋丄羼?下?”??〇�。�?１，．１?１?，?２５?’?＞?？??圖２．３上清中和細胞內(nèi)ＬＤＨ值。Ａ：實驗各組細胞上清中ＬＤＨ含量，與正常組相比，模型組細胞上清中ＬＤＨ含量顯著??上升，＊＊Ｐ＜０．０１；與模型組相比，不同濃度越鞠Ｉｔ麥大棗湯含藥血清組細胞上清中ＬＤＨ含量顯著下降，＃＃＃＃／＞＜０．０００１；??Ｂ：實驗各組細胞內(nèi)ＬＤＨ含量

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]越鞠甘麥大棗湯對皮質(zhì)酮誘導損傷的HT22細胞的神經(jīng)保護作用[J]. 葛渴敏,薛文達,王薇.  時珍國醫(yī)國藥. 2018(10)
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[7]越鞠甘麥大棗湯對抑郁子代小鼠海馬Akt及m-TOR分子表達的影響[J]. 吳如燕,陸彩,陶偉偉,夏寶妹,薛文達,任荔,吳顥昕,陳剛.  中國藥理學通報. 2016(07)
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[10]越鞠甘麥大棗湯對產(chǎn)后抑郁小鼠海馬AKT/mTOR信號通路的影響[J]. 夏寶妹,陳暢,張海樓,薛文達,吳如燕,任荔,陶偉偉,陳剛.  中國藥理學通報. 2016(01)

博士論文
[1]產(chǎn)后抑郁子代行為的分子機制及越鞠甘麥大棗湯快速干預的實驗研究[D]. 吳如燕.南京中醫(yī)藥大學 2016
[2]越鞠甘麥大棗湯對產(chǎn)后抑郁模型小鼠的快速抗抑郁作用及機制研究[D]. 夏寶妹.南京中醫(yī)藥大學 2016



本文編號：3620749