目的:探討芒柄花黃素對人胃癌細胞株MGC-803增殖、凋亡的影響及可能機制。方法:用含不同濃度（0、20、40、80μmol/L）芒柄花黃素的培養(yǎng)基分別培養(yǎng)人胃癌細胞株MGC-803后,MTT法觀察不同濃度芒柄花黃素對MGC-803細胞增殖的影響。Hoechst 33258染色法觀察不同濃度的芒柄花黃素對細胞核形態(tài)的影響。流式細胞計數(shù)法觀察細胞凋亡情況。熒光定量PCR實驗檢測細胞BAX、BCL-2 m RNA表達情況。Western blotting檢測不同藥物濃度作用下細胞的p-AKT、AKT、BAX和BCL-2蛋白表達情況。結果:MTT法結果顯示,0、20、40、80μmol/L芒柄花黃素分別作用MGC-803細胞24、48、72 h后,細胞的增殖抑制率越來越高,表現(xiàn)出劑量與時間依賴性（P<0.05）。Hoechst 33258熒光染色、流式細胞計數(shù)結果顯示,隨著藥物濃度增加,細胞凋亡率逐漸升高。Real-time PCR結果顯示,隨著芒柄花黃素濃度升高,MGC-803細胞的BAX m RNA相對表達量逐漸升高,BCL-2 m RNA相對表達量逐漸降低（P<0.01）。... 

【文章來源】：中國現(xiàn)代普通外科進展. 2020,23(08)

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MTT法檢測芒柄花黃素對MGC-803細胞增殖抑制率的影響

芒柄花黃素培養(yǎng)MGC-803細胞48h后，隨藥物濃度增加，MGC-803細胞BCL-2mRNA相對表達水平逐漸降低，BAX mRNA相對表達水平逐漸增加，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。見圖4。2.5 不同藥物濃度對MGC-803細胞中p-AKT、AKT、BAX和BCL-2蛋白表達情況的影響

細胞凋亡通路主要包括內質網通路和線粒體通路，而線粒體通路在細胞凋亡的調控中占主導地位[14]。線粒體凋亡途徑主要由BCL-2家族成員所調控，BAX基因發(fā)揮促凋亡作用，而BCL-2基因作用正相反，因此BCL-2 mRNA、BCL-2蛋白表達水平下降，BAX mRNA、BAX蛋白表達水平上升可誘導細胞凋亡，這與本研究MTT和Hoechst 33258染色結果一致，提示胃癌MGC-803增殖抑制率上升與BAX表達上升、BCL-2表達下降有關。AKT信號通路在胃癌的侵襲、轉移中具有重要的作用[15]。AKT是PI3K下游的關鍵蛋白，主要由PH結構域、催化結構域和調節(jié)結構域構成，其中當PH結構域發(fā)生突變或缺失后會使AKT活性降低甚至喪失。活化的AKT是一個關鍵的致瘤因素，它能促進腫瘤細胞的存活和增殖[16]。本研究結果表明，PAKT mRNA、PAKT蛋白隨芒柄花黃素濃度上升而表達量呈現(xiàn)下降趨勢，故我們推測胃癌MGC-803細胞的凋亡可能與AKT信號通路激活有關。

【參考文獻】：
期刊論文
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[4]Up-regulation of PIK3CA promotes metastasis in gastric carcinoma[J]. Ji-Fang Liu,Xin-Ke Zhou,Jin-Hui Chen,Gao Yi,He-Ge Chen,Ming-Chen Ba,Sheng-Qu Lin,Yan-Chao Qi,Institute of Cancer Research,Affiliated Tumor Hospital of Guangzhou Medical College,Guangzhou 510095,Guangdong Province,China,Key Laboratory of Marine Bio-resources Sustainable Utilization,CAS,Guangzhou 510301,Guangdong Province,China,Laboratory of Applied Marine Biology,Southern China Sea Institute of Oceanology,Chinese Academy of Science,Guangzhou 510301,Guangdong Province,China,Department of Pharmacology and Experimental Therapeutics,University of Maryland,685 West Baltimore street,Baltimore,MD 21228,United States,Department of Abdominal Surgery(Section Ⅱ),Affiliated Tumor Hospital of Guangzhou Medical College,Guangzhou 510095,Guangdong Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2010(39)



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