目的:刺五加酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)為海松二烯二萜類,從刺五加的根皮部提取得來,目前的研究表明刺五加酸對(duì)于肝保護(hù)具有較好的作用效果,本研究采用Lieber-DeCarli液體高脂飼料飲食誘導(dǎo)小鼠非酒精性脂肪肝（NAFLD）,同時(shí)采用細(xì)胞誘導(dǎo)分化成脂肪細(xì)胞,探討刺五加酸（AA）對(duì)NAFLD的改善作用以及具體的調(diào)控機(jī)制。方法:通過每天給予Lieber-DeCarli（L-D）液體高脂飼料喂養(yǎng),持續(xù)喂養(yǎng)12周,用來誘導(dǎo)小鼠非酒精性脂肪肝模型造模成功。與此同時(shí),配制不同劑量的刺五加酸（20mg/kg或40mg/kg）用于小鼠灌胃,每周連續(xù)灌胃7次,周期為12周。取小鼠血清和肝臟存放于-80℃。測(cè)定血清及肝臟中的生化指標(biāo),如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）及甘油三酯（TG）水平的變化情況。我們采用H&E、油紅染色、Nilered、免疫組化等染色,觀察肝臟組織病理學(xué)變化。采用蛋白印跡法以及RT-PCR來檢測(cè)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）、Ⅰ型膠原蛋白（Collagen-Ⅰ）、法尼酯X受體（FXR）等的表達(dá)水平。取對(duì)數(shù)期的3T3-L1前脂肪細(xì)胞,給予誘導(dǎo)分化液刺激2天后,再給... 

【文章來源】：延邊大學(xué)吉林省211工程院校

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
第二章 刺五加酸改善高脂飼料飲食誘導(dǎo)的小鼠非酒精性脂肪肝
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 動(dòng)物飼養(yǎng)管理
        2.2.2 生化指標(biāo)的測(cè)定
        2.2.3 肝臟切片的制備
        2.2.4 H&E染色
        2.2.5 免疫組化實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 組織免疫熒光實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 組織尼羅紅染色實(shí)驗(yàn)
        2.2.8 組織油紅染色實(shí)驗(yàn)
        2.2.9 Western blot實(shí)驗(yàn)
        2.2.10 RT-PCR實(shí)驗(yàn)
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 刺五加酸對(duì)NAFLD小鼠體重、肝臟指標(biāo)、AST、ALT以及TG表達(dá)的影響
        2.4.2 刺五加酸對(duì)NAFLD小鼠中肝臟組織形態(tài)學(xué)的影響
        2.4.3 刺五加酸對(duì)NAFLD小鼠中SREBP1表達(dá)水平的影響
        2.4.4 刺五加酸對(duì)肝纖維化指標(biāo)相關(guān)指標(biāo)表達(dá)的影響
        2.4.5 刺五加酸對(duì)NAFLD小鼠中核受體LXRs以及FXR1表達(dá)的影響
        2.4.6 刺五加酸對(duì)NAFLD小鼠中脂代謝相關(guān)核受體PPARs表達(dá)的影響
        2.4.7 刺五加酸對(duì)NAFLD小鼠中LKB1-AMPK通路的影響
        2.4.8 刺五加酸對(duì)NAFLD中膽汁受體FXR1表達(dá)的影響
第三章 刺五加酸對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖分化及脂肪代謝的影響
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 3T3-L1前脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)與分化
        3.2.2 MTT實(shí)驗(yàn)
        3.2.3 Western-Blot方法檢測(cè)刺五加酸對(duì)3T3-L1細(xì)胞增殖分化及脂肪代謝的影響
        3.2.4 PCR檢測(cè)刺五加酸對(duì)3T3-L1細(xì)胞增殖分化及脂肪代謝的相關(guān)蛋白的mRNA水平的影響
        3.2.5 細(xì)胞油紅染色
    3.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 刺五加酸對(duì)于3T3-L1細(xì)胞生存率的影響
        3.4.2 刺五加酸對(duì)于3T3-L1細(xì)胞油紅染色的影響
        3.4.3 刺五加酸對(duì)于3T3-L1細(xì)胞內(nèi)脂肪合成相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
        3.4.4 刺五加酸對(duì)于3T3-L1細(xì)胞內(nèi)核受體LXRs以及FXR1表達(dá)的影響
        3.4.5 刺五加酸對(duì)于3T3-L1細(xì)胞內(nèi)LKB1-AMPK信號(hào)通路的作用
        3.4.6 刺五加酸對(duì)于3T3-L1細(xì)胞內(nèi)脂代謝相關(guān)核受體PPARs表達(dá)的影響
        3.4.7 刺五加酸對(duì)于3T3-L1細(xì)胞內(nèi)PI3K-AKT信號(hào)通路的影響
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3618411