目的:比較黃連中小檗堿、藥根堿、表小檗堿、巴馬汀和黃連堿抑制幽門螺桿菌（HHelicobacter pylori,H.pylori）及抑制脲酶的作用,并嘗試以洋刀豆脲酶（Jack bean urease,JBU）為模式酶,探討黃連堿及表小檗堿抑制幽門螺桿菌脲酶（Helicobacter pylori urease,HPU）的潛在作用機(jī)理,以期為黃連治療H.pylori感染相關(guān)性疾病提供基礎(chǔ)的研究資料。方法:1.黃連五種生物堿抑制H.pylori作用研究采用瓊脂稀釋法,分別以克拉霉素和甲硝唑為陽性藥,測定黃連中五種生物堿抑制H.pylor的最小抑菌濃度。2.黃連五種生物堿抑制脲酶作用研究采用靛酚藍(lán)顯色法,以乙酰氧肟酸為陽性對照,測定黃連中五種生物堿抑制JBU及HPU的半數(shù)抑制濃度（IC50）。3.黃連堿、表小檗堿抑制脲酶機(jī)理研究分別以HPU和JBU為研究載體,運(yùn)用分子對接試驗、生物堿-硫醇試劑-脲酶相互作用試驗、脲酶Ni2+競爭性抑制劑保護(hù)試驗及脲酶再活化試驗,探討黃連堿及表小檗堿抑制脲酶的動力學(xué)及抑制位點(diǎn)。結(jié)果:1.抗H.pylori作用研究黃連中五種生物堿抑制H.pylori的最小抑... 

【文章來源】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?／／．沙／ｏｒ／侵染及損傷胃粘膜示意圖［３２］??Ｆｉｇｕｒｅ?１?Ｉｎｆｅｃ?

??其致病性主要如下（圖３）?％］：－？、定植作用。脲酶催化尿素水解產(chǎn)生ＮＨ３、Ｃ０２??及ＨＣ０３?（圖２），其中氨可中和酸，為／／．?在強(qiáng)酸性的胃里生存提供了一??個近中性的環(huán)境［８＇而Ｃ０２及ＨＣ０３具有清除胃中Ｈ的主要?dú)⒕?yīng)物??ＯＮＯＣＴ的作用網(wǎng)１。二、毒力作用。沙／ｏｎ？脲酶能對胃粘膜產(chǎn)生毒力作用。其??表現(xiàn)如下：（１）脲酶可作用于機(jī)體的免疫系統(tǒng)從而間接損傷胃上皮組織；（２）脲??酶具有加重局部炎癥反應(yīng)的反細(xì)胞化學(xué)趨化因子作用［２２］；?（３）脲酶水解尿素產(chǎn)生??的氨以及硝酸鹽、亞硝酸鹽、亞硝胺等可直接損害組織并產(chǎn)生致癌作用［８８］；?（４）脲??酶介導(dǎo)空泡的形成［８９１。??綜上，由／／．?感染引起的一系列消化道疾病與ＨＰＵ的存在密切相關(guān)，??脲酶抑制劑的研究與開發(fā)對臨床治療／／．?ｐ＿ｙ／〇ｒ／感染具有重要的意義。課題組前??期研宄發(fā)現(xiàn)，黃連水提物能有效抑制／／．／ｐｙ／ｏｒ／的關(guān)鍵致病因子ＨＰＵ，作用明顯??優(yōu)于小檗堿因此，抑制脲酶活性可能是黃連抗?jié)h的一個重要機(jī)制。??但是，以脲酶為切入點(diǎn)，研究黃連中特征性成分抑制脲酶的作用及抑制機(jī)理，從??而闡明黃連抑制／／．仍，／ｏｒ／的作用機(jī)理研究，目前暫無文獻(xiàn)報道。??Ｘ?＋?ｈ２〇?ｈ２ｎ－ｃｏｏｈ?＋?ｎｈ２?Ｈ２°?＞?Ｈ２Ｃ〇３?＋?２ＮＨ３??ＮＨ

酶和巴氏桿菌脲酶）的單體結(jié)構(gòu)由不同的亞基構(gòu)成，一般由一個ａ亞基、一個ｐ??亞基和一個Ｙ亞基組成三聚體結(jié)構(gòu)，即（沖丫）３１９２］。特別的是，幽門螺桿菌脲酶是??由ａ亞基、Ｐ亞基組成的四面體結(jié)構(gòu)，呈現(xiàn)（（ａｐ）３）４形式（圖４父盡管存在上述??差異

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3614199