目的:體外研究草蓯蓉多糖（BRPS）對叔丁基過氧化氫（TBHP）引起血管內(nèi)皮細胞凋亡的保護機制。方法:通過TBHP損傷內(nèi)皮細胞的方法構建血管內(nèi)皮細胞凋亡模型,用四甲基偶氮唑鹽比色（MTT）法觀察BRPS對血管內(nèi)皮細胞的毒性作用;比色法觀察細胞內(nèi)丙二醛（MDA）、還原型谷胱甘肽（GSH）的含量以及超氧化物歧化酶（SOD）的活性;采用DCFH-DA熒光染色法觀察血管內(nèi)皮細胞產(chǎn)生的活性氧（ROS）變化;采用Hoechst和TUNEL熒光染色觀察TBHP引起的內(nèi)皮細胞凋亡;采用JC-1熒光染色方法來觀察內(nèi)皮細胞線粒體跨膜電位的改變;利用Western blot檢測細胞tBid、Bax、Bcl-2、Cleaved caspase3、Cleaved caspase8、Cleaved caspase9、Procaspase3、Procaspase8、Procaspase9和細胞色素c（Cyto c）蛋白的表達情況。結果:與TBHP損傷組比較,BRPS能明顯升高細胞存活率（P<0.05）;明顯降低內(nèi)皮細胞內(nèi)MDA水平（P<0.05）,提高內(nèi)皮細胞內(nèi)GSH水平與SOD活性（P<0.05... 

【文章來源】：延邊大學吉林省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．同一時間不同濃度的ＴＢＨＰ對ＨＵＶＥＣｓ細胞的影響??

圖１．同一時間不同濃度的ＴＢＨＰ對ＨＵＶＥＣｓ細胞的影響??３．?１．２同一濃度不同時間的ＴＢＨＰ對ＨＵＶＥＣｓ細胞的影響??如圖２所示，當ＴＢＨＰ濃度相同時，隨著ＴＢＨＰ損傷時間的加長，ＨＵＶＥＣｓ??細胞存活率逐漸降低，并且呈時間依賴性趨勢。當ＴＢＨＰ損傷時間為０．５、２、４、８、??１６??

３．?３熒光顯微鏡觀察??３．?３．?１?ＨＵＶＥＣｓ?細胞?Ｈｏｃｈｅｓｔ３３３４２?染色結果??如圖３所示，正常組細胞染色均勻，數(shù)量較多并呈微弱藍色熒光。ＴＢＨＰ損傷??組可見細胞核發(fā)生碎裂、固縮、核內(nèi)呈顆粒狀明亮藍色熒光，細胞數(shù)量明顯減少，??細胞凋亡明顯增加。ＢＲＰＳ組隨著藥物濃度的升高，細胞數(shù)量逐漸恢復，核內(nèi)明亮??熒光逐漸減弱，凋亡呈降低趨勢。??１９??

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]草蓯蓉多糖對肝細胞氧化損傷的保護作用[D]. 王玉嬌.延邊大學 2014
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本文編號：3596047