人參及枸杞作為傳統(tǒng)中藥材,對人體具有調整血壓、恢復心臟功能、增強免疫等作用。為了綜合利用開發(fā)人參及枸杞產(chǎn)品,提高其藥用價值,我們以人皮膚成纖維細胞及人B淋巴母細胞作為模型,研究人參及枸杞有效組分對人體健康的影響。本研究的目的為:1)人參有效組分Gx是否對人皮膚細胞具有保護作用;2)人參有效組分Gx是否能夠改善免疫細胞功能;3)對初步分離的枸杞各組分進行免疫活性的初篩。結果顯示:1)Gx能夠緩解由ROS引起的人皮膚成纖維細胞的氧化應激損傷。首先顯微觀察到,Gx可以改善ROS損傷處理的人皮膚成纖維細胞形態(tài);其次SRB方法測定發(fā)現(xiàn),Gx提高損傷細胞的增殖率;使用免疫熒光方法進一步探索Gx保護細胞形態(tài)的機理,發(fā)現(xiàn)Gx恢復損傷細胞的骨架相關蛋白Tubulin、跨膜蛋白Integrin和胞外基質蛋白Fibronectin的有序排列,并且Western blotting檢測結果顯示Gx調控損傷細胞內MMP-1蛋白的含量。2)Gx能夠保護由重離子輻照引起的人B淋巴母細胞的損傷。首先觀察到損傷的細胞形態(tài)得到恢復。流式細胞術方法檢測到Gx可以降低損傷細胞的凋亡,并且降低細胞內ROS的水平。此外,ELISA... 

【文章來源】：蘭州大學甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
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第一章 前言
    1.1 皮膚損傷保護的研究進展
        1.1.1 皮膚損傷的模型
        1.1.2 皮膚細胞損傷的可能途徑
            1.1.2.1 微管蛋白
            1.1.2.2 整聯(lián)蛋白
            1.1.2.3 纖連蛋白
            1.1.2.4 MMP-1 蛋白
        1.1.3 天然產(chǎn)物在皮膚保護中的應用
    1.2 輻射損傷免疫功能的研究進展
        1.2.1 輻射誘導免疫損傷的可能途徑
            1.2.1.1 TNF-α
            1.2.1.2 IL-1α
        1.2.2 人參在免疫損傷保護方面的應用現(xiàn)狀
    1.3 枸杞的免疫活性
    1.4 研究目的和意義
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 試劑與儀器
        2.1.2 主要溶液配置
    2.2 實驗方法
        2.2.1 臺盼藍計數(shù)
        2.2.2 磺基羅丹明B（SRB）檢測細胞毒性
        2.2.3 酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）測定IL-1α、TNFα
        2.2.4 流式細胞術測定細胞凋亡
        2.2.5 流式細胞術測定細胞內ROS
        2.2.6 蛋白免疫印記（Western Blotting）
        2.2.7 免疫熒光
        2.2.8 H_2O_2處理和重離子輻照條件
第三章 結果與分析
    3.1 人參有效組分Gx保護氧化損傷的人皮膚成纖維細胞
        3.1.1 人參有效組分Gx改善損傷細胞的形態(tài)
        3.1.2 人參有效組分Gx提高損傷細胞的增殖率
        3.1.3 人參有效組分Gx恢復微管蛋白的表達排列
        3.1.4 人參有效組分Gx恢復整聯(lián)蛋白的表達排列
        3.1.5 人參有效組分Gx恢復纖連蛋白的表達排列
        3.1.6 人參有效組分Gx恢復MMP-1 蛋白的分泌
    3.2 人參有效組分Gx保護重離子輻照損傷的人B淋巴母細胞
        3.2.1 人參有效組分Gx改善細胞形態(tài)
        3.2.2 人參有效組分Gx促進細胞增殖
        3.2.3 人參有效組分Gx抑制細胞凋亡
        3.2.4 人參有效組分Gx抑制ROS的產(chǎn)生
        3.2.5 人參有效組分Gx調控炎癥因子的分泌
    3.3 枸杞有效組分保護氧化損傷的人B淋巴母細胞
        3.3.1 枸杞皮渣提取物的免疫活性初篩
        3.3.2 枸杞酒提取物的免疫活性初篩
        3.3.3 地骨皮提取物的免疫活性初篩
        3.3.4 枸杞有效組分對氧化損傷細胞的保護作用
        3.3.5 枸杞有效組份調控炎癥因子的分泌
第四章 討論
第五章 結論
參考文獻
在學期間的研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]人參皂苷Rb1與紅景天苷對抗皮膚光老化作用[J]. 曾秀蘭.  北方藥學. 2016(12)
[2]重離子(12C6+)治療惡性黑色素瘤的臨床研究現(xiàn)狀[J]. 秦進,張超,李莎.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2017(01)
[3]枸杞多糖對H2O2誘導人晶狀體上皮細胞氧化應激損傷的保護作用[J]. 俞茜,季青山,孫思勤.  眼科新進展. 2016(06)
[4]枸杞多糖對亞健康小鼠免疫功能及抗疲勞作用的影響[J]. 郝文麗,陳志寶,趙蕊,薄樂.  中國生物制品學雜志. 2015(07)
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[8]人參皂苷對實驗性自身免疫性甲狀腺炎大鼠Th1/Th2相關細胞因子的影響[J]. 黃琦,馮曉紅,張寅曉,趙閆麗,苗青,林筱潔.  中醫(yī)雜志. 2013(24)
[9]人參皂甙Rg3對肺癌荷瘤小鼠免疫功能影響的研究[J]. 王家曉,張玉梅.  廣西醫(yī)學. 2013(01)
[10]人參皂甙Rg3對H22荷瘤小鼠免疫微環(huán)境的影響[J]. 趙剛,葛信國.  實用中醫(yī)內科雜志. 2012(17)

博士論文
[1]照射后造血干細胞促進輻射損傷小鼠造血及免疫功能修復的實驗室研究[D]. 趙紅霞.中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院 2011
[2]人參皂甙Rg3對荷瘤及環(huán)磷酰胺化療小鼠黏膜免疫的調節(jié)機制的研究[D]. 吳皓.中國中醫(yī)科學院 2006

碩士論文
[1]對人體細胞有紫外線防護和損傷修復功能的天然產(chǎn)物的篩選和細胞學研究[D]. 陳曉明.四川農(nóng)業(yè)大學 2003



本文編號：3587514