目的:對吉林省馬勃資源進行調研,明確馬勃藥效物質基礎,為馬勃質量標準提升與馬勃資源開發(fā)利用提供依據。方法:本課題對吉林省馬勃資源進行調研,采用基原、性狀、顯微、理化等方法對采集到的馬勃標本進行鑒定。通過單孢子培養(yǎng)法和組織分離法分離純化馬勃菌株,利用液體深層發(fā)酵技術對馬勃菌株進行發(fā)酵,獲得馬勃發(fā)酵產物。利用有機溶劑提取,LC、TLC、HPLC等色譜手段對栓皮馬勃子實體與菌絲中化學成分分別進行分離。UV、¹HNMR、¹³CNMR、ESI-MS等方法對分離的化學成分進行鑒定。HPLC雙波長法對吉林省馬勃類藥材中的主要成分麥角甾醇和麥角甾酮進行含量測定。設計藥理實驗研究了尖頂地星醇提物對LPS誘導的小鼠急性肺損傷的治療作用,麥角甾醇對鏈脲佐菌素誘導的糖尿病小鼠腎損傷的治療作用。結果:本課題采集馬勃標本500余份,已鑒定馬勃覆蓋4科7屬25種。分離純化馬勃菌株10株。從栓皮馬勃子實體和菌絲中分離鑒定6種化合物。并對16種馬勃類藥材中麥角甾醇和麥角甾酮的含量進行測定。藥理實驗結果表明尖頂地星醇提物可以顯著降低LPS誘導的急性肺損傷小鼠血清中TNF-α、I... 

【文章來源】：長春中醫(yī)藥大學吉林省

【文章頁數】：104 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英文縮略語
前言
文獻綜述
    1 馬勃的基原考證
    2 馬勃生境分布
        2.1 馬勃的生境
        2.2 馬勃的分布
    3 馬勃的生長發(fā)育條件
    4 馬勃化學成分
        4.1 甾體化合物
        4.2 生物堿
        4.3 其他
    5 馬勃的藥理作用和臨床應用
    6 展望
第一章 吉林省馬勃資源的采集、鑒定與發(fā)酵培養(yǎng)
    1 馬勃資源研究概況
    2 儀器與材料
        2.1 實驗儀器
        2.2 實驗材料
    3 實驗方法
        3.1 野外采集
        3.2 觀察標本
            3.2.1 性狀鑒別
        3.3 顯微鑒別
            3.3.1 光學顯微鏡下觀察
            3.3.2 電子顯微鏡下觀察
        3.4 薄層鑒別
    4 采集到吉林省的馬勃類真菌匯總
    5 馬勃類真菌菌株分離與發(fā)酵培養(yǎng)
        5.1 儀器與材料
            5.1.1 實驗儀器
            5.1.2 實驗材料
        5.2 馬勃類真菌菌株分離
            5.2.1 固體培養(yǎng)基配制
            5.2.2 接種與培養(yǎng)
        5.3 馬勃類真菌液體發(fā)酵培養(yǎng)
            5.3.1 液體培養(yǎng)基配制
            5.3.2 接種與培養(yǎng)
        5.4 栓皮馬勃發(fā)酵物制備
            5.4.1 儀器與材料
            5.4.2 培養(yǎng)基配制
            5.4.3 菌種培養(yǎng)
            5.4.4 發(fā)酵培養(yǎng)
    6 結果與討論
第二章 栓皮馬勃化學成分分離純化及結構解析
    1 栓皮馬勃子實體化學成分提取分離
        1.1 儀器與材料
            1.1.1 實驗儀器
            1.1.2 實驗材料
        1.2 提取分離
            1.2.1 栓皮馬勃子實體提取分離流程圖
            1.2.2 提取
            1.2.3 硅膠柱層析
            1.2.4 薄層檢識
    2 栓皮馬勃菌絲化學成分提取分離
        2.1 儀器與材料
            2.1.1 材料
            2.1.2 實驗儀器
        2.2 提取分離
            2.2.1 栓皮馬勃菌絲提取分離流程圖
            2.2.2 提取
            2.2.3 硅膠柱層析
            2.2.4 栓皮馬勃菌絲醇提物重結晶
            2.2.5 薄層檢識
    3 HPLC分析
        3.1 儀器與材料
        3.2 方法與結果
    4 化合物結構解析
    5 實驗結果
    6 討論
第三章 吉林省馬勃類藥材中麥角甾醇和麥角甾酮含量測定
    1 儀器與材料
        1.1 實驗儀器
        1.2 實驗材料
    2 測定方法
        2.1 色譜條件
        2.2 對照品溶液的制備
        2.3 供試品溶液的制備
    3 方法學考察
        3.1 線性關系考察
            3.1.1 麥角甾酮線性關系考察
            3.1.2 麥角甾醇線性關系考察
        3.2 精密度試驗
            3.2.1 麥角甾酮精密度試驗
            3.2.2 麥角甾醇精密度試驗
        3.3 穩(wěn)定性試驗
        3.4 重復性試驗
        3.5 加樣回收試驗
    4 樣品中麥角甾酮、麥角甾醇含量測定
    5 討論
第四章 藥效學研究
    1 尖頂地星對LPS誘導的小鼠急性肺損傷的治療作用
        1.1 實驗試劑與儀器
        1.2 實驗動物及分組
        1.3 實驗方法
            1.3.1 ALI模型的建立
            1.3.2 血清的提取
            1.3.3 小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性與丙二醛(MDA)含量的測定
            1.3.4 小鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1α細胞因子含量的測定
            1.3.5 統(tǒng)計學處理
        1.4 結果
            1.4.1 實驗數據
            1.4.2 尖頂地星提取物對血液中細胞因子IL-6的影響
            1.4.3 尖頂地星提取物對血液中細胞因子IL-1α的影響
            1.4.4 尖頂地星提取物對血液中細胞因子TNF-α的影響
            1.4.5 尖頂地星提取物對小鼠體內SOD活性及MDA含量的影響
        1.5 討論
            1.5.1 細胞因子與抗炎作用
            1.5.2 炎癥因子與急性肺損傷
            1.5.3 尖頂地星提取物與肺損傷的治療
    2 麥角甾醇對鏈脲霉素誘導的糖尿病小鼠的治療作用
        2.1 實驗材料
            2.1.1 主要的試劑和試劑盒
            2.1.2 動物
        2.2 實驗方法
            2.2.1 實驗方案
            2.2.2 樣品制備
            2.2.3 口服葡萄糖耐量試驗(OGTT)
            2.2.4 胰島素含量
            2.2.5 生化分析
            2.2.6 腎臟的組織學分析
            2.2.7 WesternBlot
            2.2.8 統(tǒng)計分析
        2.3 結果
            2.3.1 血糖和血清胰島素水平的改變
            2.3.2 各組的血清甘油三酯(TG)和總膽固醇(TC)的水平
            2.3.3 糖尿病組合對照組小鼠的尿酸和肌酐濃度
            2.3.4 麥角甾醇對腎臟病理變化的影響
            2.3.5 麥角甾醇對PI3K/Akt/NF-κB信號傳導通路和相關信號傳導通路的影響
        2.4 討論
總結與討論
致謝
參考文獻
附圖
    附圖1 部分馬勃類真菌性狀與生境圖片
    附圖2 部分馬勃擔孢子光鏡圖片
    附圖3 部分馬勃類真菌擔孢子電鏡圖片
    附圖4 部分分離菌種液體培養(yǎng)圖片
    附圖5 分離化合物圖譜
    附圖6 菌類標本采集記錄(示例)
碩士期間論文發(fā)表情況


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3586414