目的:對吉林省馬勃資源進(jìn)行調(diào)研,明確馬勃藥效物質(zhì)基礎(chǔ),為馬勃質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升與馬勃資源開發(fā)利用提供依據(jù)。方法:本課題對吉林省馬勃資源進(jìn)行調(diào)研,采用基原、性狀、顯微、理化等方法對采集到的馬勃標(biāo)本進(jìn)行鑒定。通過單孢子培養(yǎng)法和組織分離法分離純化馬勃菌株,利用液體深層發(fā)酵技術(shù)對馬勃菌株進(jìn)行發(fā)酵,獲得馬勃發(fā)酵產(chǎn)物。利用有機(jī)溶劑提取,LC、TLC、HPLC等色譜手段對栓皮馬勃子實(shí)體與菌絲中化學(xué)成分分別進(jìn)行分離。UV、¹HNMR、¹³CNMR、ESI-MS等方法對分離的化學(xué)成分進(jìn)行鑒定。HPLC雙波長法對吉林省馬勃類藥材中的主要成分麥角甾醇和麥角甾酮進(jìn)行含量測定。設(shè)計(jì)藥理實(shí)驗(yàn)研究了尖頂?shù)匦谴继嵛飳PS誘導(dǎo)的小鼠急性肺損傷的治療作用,麥角甾醇對鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠腎損傷的治療作用。結(jié)果:本課題采集馬勃標(biāo)本500余份,已鑒定馬勃覆蓋4科7屬25種。分離純化馬勃菌株10株。從栓皮馬勃子實(shí)體和菌絲中分離鑒定6種化合物。并對16種馬勃類藥材中麥角甾醇和麥角甾酮的含量進(jìn)行測定。藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明尖頂?shù)匦谴继嵛锟梢燥@著降低LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷小鼠血清中TNF-α、I... 

【文章來源】：長春中醫(yī)藥大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：104 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英文縮略語
前言
文獻(xiàn)綜述
    1 馬勃的基原考證
    2 馬勃生境分布
        2.1 馬勃的生境
        2.2 馬勃的分布
    3 馬勃的生長發(fā)育條件
    4 馬勃化學(xué)成分
        4.1 甾體化合物
        4.2 生物堿
        4.3 其他
    5 馬勃的藥理作用和臨床應(yīng)用
    6 展望
第一章 吉林省馬勃資源的采集、鑒定與發(fā)酵培養(yǎng)
    1 馬勃資源研究概況
    2 儀器與材料
        2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)材料
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 野外采集
        3.2 觀察標(biāo)本
            3.2.1 性狀鑒別
        3.3 顯微鑒別
            3.3.1 光學(xué)顯微鏡下觀察
            3.3.2 電子顯微鏡下觀察
        3.4 薄層鑒別
    4 采集到吉林省的馬勃類真菌匯總
    5 馬勃類真菌菌株分離與發(fā)酵培養(yǎng)
        5.1 儀器與材料
            5.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
            5.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2 馬勃類真菌菌株分離
            5.2.1 固體培養(yǎng)基配制
            5.2.2 接種與培養(yǎng)
        5.3 馬勃類真菌液體發(fā)酵培養(yǎng)
            5.3.1 液體培養(yǎng)基配制
            5.3.2 接種與培養(yǎng)
        5.4 栓皮馬勃發(fā)酵物制備
            5.4.1 儀器與材料
            5.4.2 培養(yǎng)基配制
            5.4.3 菌種培養(yǎng)
            5.4.4 發(fā)酵培養(yǎng)
    6 結(jié)果與討論
第二章 栓皮馬勃化學(xué)成分分離純化及結(jié)構(gòu)解析
    1 栓皮馬勃子實(shí)體化學(xué)成分提取分離
        1.1 儀器與材料
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
            1.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 提取分離
            1.2.1 栓皮馬勃子實(shí)體提取分離流程圖
            1.2.2 提取
            1.2.3 硅膠柱層析
            1.2.4 薄層檢識
    2 栓皮馬勃菌絲化學(xué)成分提取分離
        2.1 儀器與材料
            2.1.1 材料
            2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2 提取分離
            2.2.1 栓皮馬勃菌絲提取分離流程圖
            2.2.2 提取
            2.2.3 硅膠柱層析
            2.2.4 栓皮馬勃菌絲醇提物重結(jié)晶
            2.2.5 薄層檢識
    3 HPLC分析
        3.1 儀器與材料
        3.2 方法與結(jié)果
    4 化合物結(jié)構(gòu)解析
    5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    6 討論
第三章 吉林省馬勃類藥材中麥角甾醇和麥角甾酮含量測定
    1 儀器與材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)材料
    2 測定方法
        2.1 色譜條件
        2.2 對照品溶液的制備
        2.3 供試品溶液的制備
    3 方法學(xué)考察
        3.1 線性關(guān)系考察
            3.1.1 麥角甾酮線性關(guān)系考察
            3.1.2 麥角甾醇線性關(guān)系考察
        3.2 精密度試驗(yàn)
            3.2.1 麥角甾酮精密度試驗(yàn)
            3.2.2 麥角甾醇精密度試驗(yàn)
        3.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)
        3.4 重復(fù)性試驗(yàn)
        3.5 加樣回收試驗(yàn)
    4 樣品中麥角甾酮、麥角甾醇含量測定
    5 討論
第四章 藥效學(xué)研究
    1 尖頂?shù)匦菍PS誘導(dǎo)的小鼠急性肺損傷的治療作用
        1.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)動物及分組
        1.3 實(shí)驗(yàn)方法
            1.3.1 ALI模型的建立
            1.3.2 血清的提取
            1.3.3 小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性與丙二醛(MDA)含量的測定
            1.3.4 小鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1α細(xì)胞因子含量的測定
            1.3.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
        1.4 結(jié)果
            1.4.1 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
            1.4.2 尖頂?shù)匦翘崛∥飳ρ褐屑?xì)胞因子IL-6的影響
            1.4.3 尖頂?shù)匦翘崛∥飳ρ褐屑?xì)胞因子IL-1α的影響
            1.4.4 尖頂?shù)匦翘崛∥飳ρ褐屑?xì)胞因子TNF-α的影響
            1.4.5 尖頂?shù)匦翘崛∥飳π∈篌w內(nèi)SOD活性及MDA含量的影響
        1.5 討論
            1.5.1 細(xì)胞因子與抗炎作用
            1.5.2 炎癥因子與急性肺損傷
            1.5.3 尖頂?shù)匦翘崛∥锱c肺損傷的治療
    2 麥角甾醇對鏈脲霉素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的治療作用
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
            2.1.1 主要的試劑和試劑盒
            2.1.2 動物
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 實(shí)驗(yàn)方案
            2.2.2 樣品制備
            2.2.3 口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)
            2.2.4 胰島素含量
            2.2.5 生化分析
            2.2.6 腎臟的組織學(xué)分析
            2.2.7 WesternBlot
            2.2.8 統(tǒng)計(jì)分析
        2.3 結(jié)果
            2.3.1 血糖和血清胰島素水平的改變
            2.3.2 各組的血清甘油三酯(TG)和總膽固醇(TC)的水平
            2.3.3 糖尿病組合對照組小鼠的尿酸和肌酐濃度
            2.3.4 麥角甾醇對腎臟病理變化的影響
            2.3.5 麥角甾醇對PI3K/Akt/NF-κB信號傳導(dǎo)通路和相關(guān)信號傳導(dǎo)通路的影響
        2.4 討論
總結(jié)與討論
致謝
參考文獻(xiàn)
附圖
    附圖1 部分馬勃類真菌性狀與生境圖片
    附圖2 部分馬勃擔(dān)孢子光鏡圖片
    附圖3 部分馬勃類真菌擔(dān)孢子電鏡圖片
    附圖4 部分分離菌種液體培養(yǎng)圖片
    附圖5 分離化合物圖譜
    附圖6 菌類標(biāo)本采集記錄(示例)
碩士期間論文發(fā)表情況


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]黃硬皮馬勃子實(shí)體提取物抑菌活性[J]. 周會明,張焱珍,柴紅梅,張小雷,劉璇,孔令艦,和嬌嬌.  食用菌學(xué)報(bào). 2016(02)
[2]Comparison of effects of obesity and non-alcoholic fatty liver disease on incidence of type 2 diabetes mellitus[J]. Wei-Dong Li,Kun-Fa Fu,Gui-Mei Li,Yan-Shu Lian,Ai-Min Ren,Yun-Jue Chen,Jin-Rong Xia.  World Journal of Gastroenterology. 2015(32)
[3]Is there a relationship between vitamin D with insulin resistance and diabetes mellitus?[J]. Kamal AS Al-Shoumer,Thamer M Al-Essa.  World Journal of Diabetes. 2015(08)
[4]毛竹筍化學(xué)成分研究（Ⅰ）[J]. 杜文鵬,徐彭,劉波,徐向紅,賴學(xué)文,李斌.  中草藥. 2015(03)
[5]苓桂術(shù)甘湯對心肌缺血再灌注損傷SOD、MDA含量的影響[J]. 康天濟(jì),韓宇博,田苗,郭維毅,周彬彬,于麗楠,田明.  中醫(yī)藥信息. 2014(03)
[6]肥胖小鼠急性肺損傷模型的生物學(xué)特點(diǎn)[J]. 楊進(jìn),陸友金.  臨床肺科雜志. 2013(07)
[7]馬勃化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J]. 郭晶,江蔚新,范明松.  現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2013(03)
[8]糖皮質(zhì)激素的副作用及并發(fā)癥治療[J]. 馬茂森.  中國城鄉(xiāng)企業(yè)衛(wèi)生. 2011(03)
[9]內(nèi)毒素致急性肺損傷發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 陸立仁,張良清.  醫(yī)學(xué)綜述. 2010(02)
[10]人參川芎嗪注射液對局灶性腦缺血大鼠血清SOD活性、MDA含量及腦組織氨基酸含量的影響[J]. 韓輝,吳麗敏,汪瀚,汪美霞,張娟,涂晉文,韓明向.  成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2009(01)

博士論文
[1]中藥豬苓的化學(xué)成分及其藥理學(xué)研究[D]. 趙英永.西北大學(xué) 2010
[2]Imipramine對內(nèi)毒素誘導(dǎo)的小鼠急性肺損傷的抗炎癥、抗凋亡作用的研究[D]. 楊進(jìn).復(fù)旦大學(xué) 2010

碩士論文
[1]達(dá)原飲對脂多糖誘導(dǎo)的小鼠急性肺損傷的治療作用[D]. 任慧玲.蘇州大學(xué) 2016
[2]脫皮馬勃次生代謝產(chǎn)物和抗腫瘤活性研究[D]. 王雪芹.山東大學(xué) 2007
[3]脫皮馬勃化學(xué)成分及抗腫瘤活性研究[D]. 崔磊.山東大學(xué) 2006



本文編號：3586414