目的通過(guò)姜黃素（Curcumin）對(duì)體外培養(yǎng)的人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞（Human keloid fibroblasts,HKF）的異常增殖、細(xì)胞凋亡及各周期的影響,初步分析其可能的作用機(jī)制。方法（1）體外培養(yǎng)人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞,選取同一代生長(zhǎng)狀態(tài)良好處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞,經(jīng)不同濃度（0、5、10、20μmol/1）的姜黃素處理后,以MTT法檢測(cè)其增殖抑制情況。（2）通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)（Flow cytometry,FCM）檢測(cè)經(jīng)姜黃素處理的人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞,隨著藥物濃度的增加各細(xì)胞周期的分布情況及凋亡情況。（3）通過(guò)免疫印跡法（Western blot）檢測(cè)將人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞經(jīng)不同濃度姜黃素處理后,人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞p27的表達(dá)情況。結(jié)果（1）人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞經(jīng)不同濃度姜黃素處理后,MTT結(jié)果顯示,姜黃素對(duì)人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖有抑制作用（P<0.01）,且其細(xì)胞增殖抑制率與姜黃素濃度呈正相關(guān)。（2）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡結(jié)果顯示,人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞總凋亡率隨著姜黃素濃度的增加而增加（P<0.01）,且呈濃度依賴(lài)性。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期結(jié)果顯示,... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖１姜黃素對(duì)ＨＫＦ的增值抑制作用??表１?ＭＴＴ細(xì)賴(lài)舖對(duì)人瘩藤維細(xì)胞（ＨＫＦ?）的作用（ｎ?＝?６?，?Ｘ±Ｓ?）??

增殖抑制實(shí)驗(yàn)中看到姜黃素可有效抑制人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的增殖，??但是關(guān)于其是否能有效誘導(dǎo)人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞凋亡，我們后期采用??了流式細(xì)胞術(shù)（ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ／ＰＩ雙染法）進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)觀察。由圖２及??表２我們可以看出，經(jīng)不同濃度（５、１０、２０＿〇１／Ｌ）姜黃素處理的ＨＫＦ??與對(duì)照組（ＯＭｏｌ／Ｌ）相比細(xì)胞凋亡率均明顯增高，各組之間差異顯著??（胤?０１）。??１?…．．．．．?一．．．．．．．—，?＊ｒ??－?１１．２３?２１?｜?３１．７４?２１?３５．２２１?２１?４６．３６??Ａ?＾?２＂?３?ｓ＇?ｃ?ｔ?０??＿．ｊ考?ａ，???圖２流式細(xì)胞術(shù)觀察姜黃素處理后ＨＫＦ凋亡情況??Ａ．?〇Ｍ－ｍｏｌ／Ｌ；?Ｂ．?５Ｍ＊ｍｏｌ／Ｌ；?Ｃ．?ｌ〇Ｍ＊ｍｏｌ／Ｌ；?Ｄ．?２０＾ｍｏｌ／Ｌ??表２姜黃素處理后ＨＫＦ的總凋亡率（ｎ＝３?，?ＸｔＳ?）??姜黃素濃度（ｐｍ〇ｌ／Ｌ?）?總凋亡率（％?）??０?１３．４３±０．７５??５?３６．９７±１．９２＊＊??１０?４２．８５±２．７８＊＊??２０?５２．３７±１．６７＊＊??注：各組間細(xì)胞總凋亡率比較Ｐ＜ＣＩ．〇ｌ??１２??

３．?３細(xì)胞周期分布試驗(yàn)結(jié)果??細(xì)胞周期是各種細(xì)胞生命活動(dòng)的重要基本程序之一，而且腫瘤發(fā)生、發(fā)??展與細(xì)胞周期失控有著密不可分的關(guān)系。細(xì)胞周期包括ＤＮＡ合成前期??（Ｇ０－Ｇ１）、ＤＮＡ合成期（Ｇｌ－Ｓ）、ＤＮＡ合成后期（Ｇ２－Ｍ）。細(xì)胞要完成一??次完整的增殖要經(jīng)過(guò)Ｇｌ?—Ｓ?—?Ｇ２?—Ｍ四個(gè)時(shí)期，有研究認(rèn)為，Ｇ１／Ｓ期調(diào)??控點(diǎn)和Ｇ２／Ｍ期調(diào)控點(diǎn)最為重要。這兩個(gè)階段相對(duì)而言比較容易受到環(huán)境??條件的影響，因此這些調(diào)控點(diǎn)上的失控就很容易導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。流式??細(xì)胞儀檢測(cè)姜黃素對(duì)人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞，細(xì)胞周期的結(jié)果顯示，不??同濃度的姜黃素對(duì)人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞，細(xì)胞周期的影響不同。隨著??姜黃素藥物濃度（〇、５、１０、２０ｗｎｏｌ／Ｌ）的增加，Ｇ１細(xì)胞所占的百分比??越來(lái)越大，Ｇ１期是細(xì)胞有絲分裂間期運(yùn)行的前期，是藥物作用的敏感點(diǎn)。??采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示，各濃度的姜黃素作用于人瘢痕疙瘩成纖??維細(xì)胞后，均導(dǎo)致Ｇ０／Ｇ１期細(xì)胞堆積，阻滯Ｇ１期細(xì)胞向Ｓ期的發(fā)展，細(xì)胞??的凋亡率升高。如下圖３及表３。??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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