發(fā)布時間：2021-12-17 03:49

　　目的探討吉馬酮調(diào)控miR-9a-5p/第10染色體同源丟失性磷酸酶-張力蛋白基因（PTEN）軸對脂多糖（LPS）致心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷和細(xì)胞凋亡的影響。方法實(shí)驗分為空白組（正常培養(yǎng)的心肌細(xì)胞）,模型組(10 mg·L^-1的LPS處理心肌細(xì)胞6 h),低、中、高3個劑量實(shí)驗組(50,100和200μmol·L^-1吉馬酮處理模型組細(xì)胞),A組（轉(zhuǎn)染miRNA模擬物陰性對照后,進(jìn)行LPS處理）,B組（轉(zhuǎn)染miR-9a-5p模擬物后,進(jìn)行LPS處理）,C組(轉(zhuǎn)染miRNA抑制物陰性對照后,進(jìn)行LPS和200μmol·L^-1吉馬酮處理),D組(轉(zhuǎn)染miR-9a-5p抑制物后,進(jìn)行LPS和200μmol·L^-1吉馬酮處理)。用試劑盒檢測細(xì)胞內(nèi)丙二醛（MDA）含量,用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡,用實(shí)時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)和蛋白質(zhì)印記法分別檢測miR-9a-5p和PTEN mRNA水平和蛋白表達(dá)。用雙熒光素酶報告基因?qū)嶒灪蚖estern Blotting驗證miR-9a-5p和PTEN的靶向調(diào)控關(guān)系。結(jié)果空白組、模型組... 

【文章來源】：中國臨床藥理學(xué)雜志. 2020,36(12)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 實(shí)驗方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 細(xì)胞分組與給藥方法[4]
        2.3 用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡[5]
        2.4 用試劑盒檢測細(xì)胞內(nèi)MDA含量及SOD和GSH-Px活性[6]
        2.5 用Western Blotting法檢測Bcl-2、Bax和PTEN蛋白表達(dá)情況[6]
        2.6 用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)法檢測miR-9a-5p和PTEN mRNA的表達(dá)水平[5]
        2.7 雙熒光素酶報告基因?qū)嶒瀃5]
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié) 果
    1 吉馬酮對LPS致心肌細(xì)胞氧化損傷和凋亡的影響
    2 吉馬酮對LPS致心肌細(xì)胞中miR-9a-5p、Bcl-2、Bax和PTEN表達(dá)的影響
    3 miR-9a-5p靶向調(diào)控PTEN的表達(dá)
    4 miR-9a-5p聯(lián)合吉馬酮對LPS致心肌細(xì)胞氧化損傷和凋亡的影響
討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]PTEN對缺氧復(fù)氧心肌H9c2細(xì)胞凋亡、氧化損傷及免疫炎癥因子水平的影響[J]. 燕林貞,燕欽棟,張順祥,丁小青,李康.  中國病理生理雜志. 2018(11)
[2]MicroRNA-133b-5p通過靶向調(diào)控Fas基因影響H9c2心肌細(xì)胞凋亡[J]. 程潔,何淑芳,韓正怡,朱海娟,張野.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2016(02)
[3]黃芪皂苷IV對LPS誘導(dǎo)大鼠心肌損傷的保護(hù)作用及機(jī)制[J]. 覃華,張琰,杜小燕,韓艷,王茹.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2013(08)
[4]川芎嗪對LPS致心肌細(xì)胞損傷的影響及機(jī)制研究[J]. 劉丹,尹東,曾姝,何明.  中國藥理學(xué)通報. 2012(11)
[5]參附注射液對大鼠心肌缺血再灌注損傷PTEN和PI3K表達(dá)的影響[J]. 紀(jì)勇,陳國強(qiáng),黃斌,吳松,沈凱,虞桂平,王曉臣,陳亦江.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2011(10)



本文編號：3539354