清金化痰湯通過(guò)P38MAPK/NF-κB信號(hào)通路改善大鼠急性氣道炎癥的作用和機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2021-12-15 17:44
【目的】觀察清金化痰湯治療急性氣道炎癥模型大鼠氣道炎癥性損傷和黏液高分泌的作用。通過(guò)觀察不同時(shí)點(diǎn)急性氣道炎癥和粘液高分泌狀態(tài)的變化,ELISA法檢測(cè)急性氣道炎癥相關(guān)細(xì)胞因子及黏液分泌標(biāo)志物黏蛋白的表達(dá)情況,運(yùn)用免疫組化、Western blot檢測(cè)急性炎癥通路相關(guān)蛋白及黏蛋白的表達(dá),分析清金化痰湯抑制急性氣道炎癥及黏液高分泌的可能信號(hào)機(jī)制,揭示了P38MAPK/NF-κB信號(hào)通路在調(diào)控大鼠急性氣道炎癥及抑制其黏液高分泌狀態(tài)中的重要作用。這將進(jìn)一步闡明清金化痰湯在治療急性氣道炎癥性疾病中的應(yīng)用價(jià)值及其作用機(jī)理,為清金化痰湯的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),進(jìn)而深入論證將“清肺化痰”法作為急性氣道炎癥性疾病主要治療方法的可行性和重要性,為傳統(tǒng)中醫(yī)藥走向世界奠定基礎(chǔ)!痉椒ā1.健康雄性SD大鼠96只,隨機(jī)分為6組:空白組(A組)、模型組(B組)、清金化痰湯高劑量組(C組)、清金化痰湯中劑量組(D組)、清金化痰湯低劑量組(E組)、地塞米松組(F組),每組16只。除空白組外,其余各組均用LPS氣道滴入建立急性氣道炎癥大鼠模型,空白組則滴入等量生理鹽水。2.由黃芩、梔子、桔梗、麥門(mén)冬、浙貝母、橘紅等十一味...
【文章來(lái)源】: 成都中醫(yī)藥大學(xué)四川省
【文章頁(yè)數(shù)】:119 頁(yè)
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
引言
第一部分 材料與方法
1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.實(shí)驗(yàn)藥物
3.主要試劑、儀器及溶液配制
3.1 主要試劑
3.2 主要儀器
3.3 溶液配制
3.4 其它耗材
4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
5.急性氣道炎癥模型的建立
5.1 造模方法
5.2 模型成功標(biāo)準(zhǔn)
6.藥物制備
7.給藥方法
8.標(biāo)本采集與處理
9.一般情況觀察方法
10.BALF白細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類
10.1 實(shí)驗(yàn)試劑
10.2 實(shí)驗(yàn)材料
10.3 白細(xì)胞計(jì)數(shù)方法
10.4 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)
10.4.1 步驟
11.病理學(xué)檢測(cè)
11.1 實(shí)驗(yàn)試劑
11.2 實(shí)驗(yàn)儀器
11.3 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br> 11.4 步驟
11.5 炎癥評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)
12.ELISA法
12.1 實(shí)驗(yàn)原理
12.2 實(shí)驗(yàn)試劑
12.3 實(shí)驗(yàn)儀器
12.4 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br> 12.5 試劑盒組成
12.6 步驟
13.免疫組化S-P法
13.1 實(shí)驗(yàn)原理
13.2 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br> 13.3 實(shí)驗(yàn)試劑
13.4 實(shí)驗(yàn)儀器
13.5 實(shí)驗(yàn)步驟
14.Western blot
14.1 實(shí)驗(yàn)原理
14.2 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br> 14.3 實(shí)驗(yàn)試劑
14.4 實(shí)驗(yàn)儀器
14.5 實(shí)驗(yàn)步驟
14.5.1 樣本總蛋白的提取
14.5.2 樣品總蛋白濃度測(cè)定(BCA法)
14.5.3 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳
14.5.4 轉(zhuǎn)印
14.5.5 封閉
14.5.6 顯影,定影
15.統(tǒng)計(jì)方法
16.技術(shù)路線
第二部分 結(jié)果
1.一般情況觀察
1.1 一般情況
1.2 體重
1.3 死亡情況
2.清金化痰湯對(duì)BALF中白細(xì)胞總數(shù)和細(xì)胞分類的影響
3.清金化痰湯對(duì)急性氣道炎癥大鼠氣管和肺組織病理改變的影響
3.1 氣管和肺組織病理改變
3.2 清金化痰湯對(duì)炎癥積分水平的影響
4.清金化痰湯對(duì)BALF中相關(guān)細(xì)胞因子水平的影響
4.1 清金化痰湯對(duì)IL-1β水平的影響
4.2 清金化痰湯對(duì)IL-8水平的影響
4.3 清金化痰湯對(duì)TNF-水平的影響
5.清金化痰湯對(duì)BALF中黏蛋白MUC5AC水平的影響
6.S-P法檢測(cè)清金化痰湯對(duì)肺組織中P38MAPK、MUC5AC的影響
6.1 清金化痰湯對(duì)P38MAPK的影響
6.2 清金化痰湯對(duì)MUC5AC的影響
7.WesternBlot檢測(cè)清金化痰湯對(duì)肺組織P38MAPK、IκBα、P65的影響
7.1 清金化痰湯對(duì)肺組織中P38MAPK的影響
7.2 清金化痰湯對(duì)肺組織IκBα表達(dá)的影響
7.3 清金化痰湯對(duì)肺組織NF-κBP65表達(dá)的影響
8.相關(guān)性分析
第三部分 討論
1.中醫(yī)對(duì)急性氣道炎癥性疾病的認(rèn)識(shí)
1.1 中醫(yī)古籍對(duì)急性氣道炎癥性疾病病名的記載
1.2 中醫(yī)對(duì)急性氣道炎癥性疾病病因病機(jī)的認(rèn)識(shí)
1.2.1 肺氣失宣
1.2.2 肺失肅降,肺氣上逆
1.2.3 痰濁壅肺,氣機(jī)郁滯
1.3 急性氣道炎癥性疾病的相關(guān)中醫(yī)證候分型
1.4 急性氣道炎癥性疾病的中醫(yī)藥相關(guān)治療
1.5 中醫(yī)對(duì)急性氣道炎癥性疾病的治療思路
2.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)急性氣道炎癥性疾病的認(rèn)識(shí)
2.1 氣道的結(jié)構(gòu)和生理特點(diǎn)
2.2 氣道的防御功能
2.3 病因和病理特點(diǎn)
2.4 發(fā)病機(jī)制
2.4.1 中性粒細(xì)胞
2.4.2 巨噬細(xì)胞
2.4.3 上皮細(xì)胞
2.4.4 黏附分子
2.4.5 細(xì)胞因子
2.5 診斷與治療
3.氣道炎癥與黏液分泌
4.氣道炎癥與信號(hào)通路
4.1 P38MAPK信號(hào)通路
4.2 NF-κB信號(hào)通路
4.3 JAK-STAT信號(hào)通路
5.急性氣道炎癥模型的建立
6.清金化痰湯治療后能明顯抑制急性氣道炎癥反應(yīng)
7.清金化痰湯下調(diào)肺組織P38MAPK/NF-κB信號(hào)通路,以抑制氣道炎癥反應(yīng)
8.清金化痰湯下調(diào)肺組織P38MAPK/NF-κB信號(hào)通路,以抑制氣道黏液高分泌
第四部分 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
文獻(xiàn)綜述 氣道炎癥性疾病發(fā)病機(jī)制的研究概況
參考文獻(xiàn)
在讀期間公開(kāi)發(fā)表的學(xué)術(shù)論文、專著及科研成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]清金化痰湯治療AECOPD痰熱壅肺證患者的臨床觀察 [J]. 張圣浛,鄧志剛,張素華. 中國(guó)藥房. 2016(35)
[2]清金化痰湯聯(lián)合阿奇霉素治療小兒支原體感染30例臨床觀察 [J]. 馬素清. 臨床醫(yī)學(xué)研究與實(shí)踐. 2016(03)
[3]抗生素序貫清金化痰湯聯(lián)合治療重癥肺炎患者的療效評(píng)價(jià) [J]. 劉克琴,沈建平,倪海濱,黃小菲,秦鳳霞. 中醫(yī)臨床研究. 2015(04)
[4]302例慢性阻塞性肺疾病急性加重期中醫(yī)證候分型 [J]. 王勝,葉海勇,陳悅,季紅燕,朱春冬,任薇,李春穎,周群. 北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(01)
[5]加味清金化痰湯聯(lián)合西藥治療肺炎30例觀察 [J]. 陳范戈. 實(shí)用中醫(yī)藥雜志. 2014(11)
[6]清金化痰湯治療痰熱郁肺型咳嗽109例中藥藥敏試驗(yàn)研究 [J]. 張清奇,張金飛,張建勇. 浙江中醫(yī)雜志. 2014(10)
[7]六味補(bǔ)氣膠囊對(duì)COPD肺氣虛證模型STAT4,STAT6蛋白表達(dá)影響 [J]. 王成陽(yáng),李澤庚,劉向國(guó),彭青和,武松,張凱,呂磊. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2013(21)
[8]Inhibition of pacemaker activity in interstitial cells of Cajal by LPS via NF-κB and MAP kinase [J]. Dong Chuan Zuo,Seok Choi,Pawan Kumar Shahi,Man Yoo Kim,Chan Guk Park,Young Dae Kim,Jun Lee,In Yeoup Chang,Insuk So,Jae Yeoul Jun. World Journal of Gastroenterology. 2013(08)
[9]衛(wèi)生部全國(guó)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)2011年痰標(biāo)本來(lái)源細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè) [J]. 李湘燕,呂媛. 中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2012(12)
[10]清肺化痰湯配合西藥對(duì)慢性阻塞性肺疾病氧化/抗氧化失衡的影響 [J]. 陳斯寧,韋思尊,譚玉萍,楊益寶,馮原,潘麗鳳. 四川中醫(yī). 2012(07)
本文編號(hào):3536868
【文章來(lái)源】: 成都中醫(yī)藥大學(xué)四川省
【文章頁(yè)數(shù)】:119 頁(yè)
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
引言
第一部分 材料與方法
1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.實(shí)驗(yàn)藥物
3.主要試劑、儀器及溶液配制
3.1 主要試劑
3.2 主要儀器
3.3 溶液配制
3.4 其它耗材
4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
5.急性氣道炎癥模型的建立
5.1 造模方法
5.2 模型成功標(biāo)準(zhǔn)
6.藥物制備
7.給藥方法
8.標(biāo)本采集與處理
9.一般情況觀察方法
10.BALF白細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類
10.1 實(shí)驗(yàn)試劑
10.2 實(shí)驗(yàn)材料
10.3 白細(xì)胞計(jì)數(shù)方法
10.4 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)
10.4.1 步驟
11.病理學(xué)檢測(cè)
11.1 實(shí)驗(yàn)試劑
11.2 實(shí)驗(yàn)儀器
11.3 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br> 11.4 步驟
11.5 炎癥評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)
12.ELISA法
12.1 實(shí)驗(yàn)原理
12.2 實(shí)驗(yàn)試劑
12.3 實(shí)驗(yàn)儀器
12.4 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br> 12.5 試劑盒組成
12.6 步驟
13.免疫組化S-P法
13.1 實(shí)驗(yàn)原理
13.2 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br> 13.3 實(shí)驗(yàn)試劑
13.4 實(shí)驗(yàn)儀器
13.5 實(shí)驗(yàn)步驟
14.Western blot
14.1 實(shí)驗(yàn)原理
14.2 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br> 14.3 實(shí)驗(yàn)試劑
14.4 實(shí)驗(yàn)儀器
14.5 實(shí)驗(yàn)步驟
14.5.1 樣本總蛋白的提取
14.5.2 樣品總蛋白濃度測(cè)定(BCA法)
14.5.3 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳
14.5.4 轉(zhuǎn)印
14.5.5 封閉
14.5.6 顯影,定影
15.統(tǒng)計(jì)方法
16.技術(shù)路線
第二部分 結(jié)果
1.一般情況觀察
1.1 一般情況
1.2 體重
1.3 死亡情況
2.清金化痰湯對(duì)BALF中白細(xì)胞總數(shù)和細(xì)胞分類的影響
3.清金化痰湯對(duì)急性氣道炎癥大鼠氣管和肺組織病理改變的影響
3.1 氣管和肺組織病理改變
3.2 清金化痰湯對(duì)炎癥積分水平的影響
4.清金化痰湯對(duì)BALF中相關(guān)細(xì)胞因子水平的影響
4.1 清金化痰湯對(duì)IL-1β水平的影響
4.2 清金化痰湯對(duì)IL-8水平的影響
4.3 清金化痰湯對(duì)TNF-水平的影響
5.清金化痰湯對(duì)BALF中黏蛋白MUC5AC水平的影響
6.S-P法檢測(cè)清金化痰湯對(duì)肺組織中P38MAPK、MUC5AC的影響
6.1 清金化痰湯對(duì)P38MAPK的影響
6.2 清金化痰湯對(duì)MUC5AC的影響
7.WesternBlot檢測(cè)清金化痰湯對(duì)肺組織P38MAPK、IκBα、P65的影響
7.1 清金化痰湯對(duì)肺組織中P38MAPK的影響
7.2 清金化痰湯對(duì)肺組織IκBα表達(dá)的影響
7.3 清金化痰湯對(duì)肺組織NF-κBP65表達(dá)的影響
8.相關(guān)性分析
第三部分 討論
1.中醫(yī)對(duì)急性氣道炎癥性疾病的認(rèn)識(shí)
1.1 中醫(yī)古籍對(duì)急性氣道炎癥性疾病病名的記載
1.2 中醫(yī)對(duì)急性氣道炎癥性疾病病因病機(jī)的認(rèn)識(shí)
1.2.1 肺氣失宣
1.2.2 肺失肅降,肺氣上逆
1.2.3 痰濁壅肺,氣機(jī)郁滯
1.3 急性氣道炎癥性疾病的相關(guān)中醫(yī)證候分型
1.4 急性氣道炎癥性疾病的中醫(yī)藥相關(guān)治療
1.5 中醫(yī)對(duì)急性氣道炎癥性疾病的治療思路
2.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)急性氣道炎癥性疾病的認(rèn)識(shí)
2.1 氣道的結(jié)構(gòu)和生理特點(diǎn)
2.2 氣道的防御功能
2.3 病因和病理特點(diǎn)
2.4 發(fā)病機(jī)制
2.4.1 中性粒細(xì)胞
2.4.2 巨噬細(xì)胞
2.4.3 上皮細(xì)胞
2.4.4 黏附分子
2.4.5 細(xì)胞因子
2.5 診斷與治療
3.氣道炎癥與黏液分泌
4.氣道炎癥與信號(hào)通路
4.1 P38MAPK信號(hào)通路
4.2 NF-κB信號(hào)通路
4.3 JAK-STAT信號(hào)通路
5.急性氣道炎癥模型的建立
6.清金化痰湯治療后能明顯抑制急性氣道炎癥反應(yīng)
7.清金化痰湯下調(diào)肺組織P38MAPK/NF-κB信號(hào)通路,以抑制氣道炎癥反應(yīng)
8.清金化痰湯下調(diào)肺組織P38MAPK/NF-κB信號(hào)通路,以抑制氣道黏液高分泌
第四部分 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
文獻(xiàn)綜述 氣道炎癥性疾病發(fā)病機(jī)制的研究概況
參考文獻(xiàn)
在讀期間公開(kāi)發(fā)表的學(xué)術(shù)論文、專著及科研成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]清金化痰湯治療AECOPD痰熱壅肺證患者的臨床觀察 [J]. 張圣浛,鄧志剛,張素華. 中國(guó)藥房. 2016(35)
[2]清金化痰湯聯(lián)合阿奇霉素治療小兒支原體感染30例臨床觀察 [J]. 馬素清. 臨床醫(yī)學(xué)研究與實(shí)踐. 2016(03)
[3]抗生素序貫清金化痰湯聯(lián)合治療重癥肺炎患者的療效評(píng)價(jià) [J]. 劉克琴,沈建平,倪海濱,黃小菲,秦鳳霞. 中醫(yī)臨床研究. 2015(04)
[4]302例慢性阻塞性肺疾病急性加重期中醫(yī)證候分型 [J]. 王勝,葉海勇,陳悅,季紅燕,朱春冬,任薇,李春穎,周群. 北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(01)
[5]加味清金化痰湯聯(lián)合西藥治療肺炎30例觀察 [J]. 陳范戈. 實(shí)用中醫(yī)藥雜志. 2014(11)
[6]清金化痰湯治療痰熱郁肺型咳嗽109例中藥藥敏試驗(yàn)研究 [J]. 張清奇,張金飛,張建勇. 浙江中醫(yī)雜志. 2014(10)
[7]六味補(bǔ)氣膠囊對(duì)COPD肺氣虛證模型STAT4,STAT6蛋白表達(dá)影響 [J]. 王成陽(yáng),李澤庚,劉向國(guó),彭青和,武松,張凱,呂磊. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2013(21)
[8]Inhibition of pacemaker activity in interstitial cells of Cajal by LPS via NF-κB and MAP kinase [J]. Dong Chuan Zuo,Seok Choi,Pawan Kumar Shahi,Man Yoo Kim,Chan Guk Park,Young Dae Kim,Jun Lee,In Yeoup Chang,Insuk So,Jae Yeoul Jun. World Journal of Gastroenterology. 2013(08)
[9]衛(wèi)生部全國(guó)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)2011年痰標(biāo)本來(lái)源細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè) [J]. 李湘燕,呂媛. 中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2012(12)
[10]清肺化痰湯配合西藥對(duì)慢性阻塞性肺疾病氧化/抗氧化失衡的影響 [J]. 陳斯寧,韋思尊,譚玉萍,楊益寶,馮原,潘麗鳳. 四川中醫(yī). 2012(07)
本文編號(hào):3536868
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