目的:觀察蛇床子素對(duì)骨肉瘤細(xì)胞U-2OS增殖與侵襲的影響,并探討其可能的作用機(jī)制。方法:（1）將骨肉瘤U-2OS細(xì)胞分為蛇床子素不同濃度（0、25、50、100、200μmol/L）組,各組分別予以相應(yīng)濃度的蛇床子素干預(yù)。MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖;Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲情況,PCR檢測(cè)肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1（MALAT1）mRNA表達(dá)。（2）應(yīng)用慢病毒載體構(gòu)建MALAT1過(guò)表達(dá)的轉(zhuǎn)染U-2OS細(xì)胞。將轉(zhuǎn)染細(xì)胞分為對(duì)照組、蛇床子素組、MALAT1過(guò)表達(dá)組、MALAT1過(guò)表達(dá)+蛇床子素組。蛇床子素干預(yù)組分別給予100μmol/L蛇床子素。MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖;Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲情況;Western blot檢測(cè)磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá),包括磷酸化PI3K（p-PI3K）、AKT、磷酸化AKT（p-AKT）、基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP-2）和基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）。結(jié)果:（1）不同濃度的蛇床子素作用后,可抑制U-2OS細(xì)胞的增殖、侵襲以及MALAT1 mRNA表達(dá);與0μmol/L組相比,50μmol/L組和1... 

【文章來(lái)源】：上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,34(05)

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【部分圖文】：

不同濃度蛇床子素對(duì)U-2OS

Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,不同濃度的蛇床子素作用U-2OS細(xì)胞24 h后,可抑制U-2OS細(xì)胞侵襲,穿膜細(xì)胞數(shù)明顯減少,其中50 μmol/L組和100 μmol/L組的穿膜細(xì)胞數(shù)分別為(151.19±6.49)個(gè)和(129.75±8.65)個(gè),與0 μmol/L組[(214.86±10.31)個(gè)]相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)圖2 。2.3 蛇床子素對(duì)U-2OS細(xì)胞MALAT1 mRNA表達(dá)的影響

MTT檢測(cè)顯示,100 μmol/L蛇床子素作用LV-vector轉(zhuǎn)染細(xì)胞48 h后,蛇床子素組的細(xì)胞存活率較對(duì)照組顯著降低(P<0.01);以100 μmol/L蛇床子素分別作用LV-vector轉(zhuǎn)染細(xì)胞和LV-over/MALAT1轉(zhuǎn)染細(xì)胞,即蛇床子素組和MALAT1過(guò)表達(dá)+蛇床子素組比較,后者的細(xì)胞存活率顯著升高(P<0.05),提示MALAT1過(guò)表達(dá)可減弱蛇床子素對(duì)U-2OS細(xì)胞增殖的抑制作用。見(jiàn)圖4B。Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,蛇床子素組的穿膜細(xì)胞數(shù)[(132.75±12.29)個(gè)]顯著降低(P<0.01);與蛇床子素組相比,MALAT1過(guò)表達(dá)+蛇床子素組的穿膜細(xì)胞數(shù)[(190.21±9.07)個(gè)]顯著增多(P<0.05),提示MALAT1過(guò)表達(dá)可減弱蛇床子素對(duì)U-2OS細(xì)胞侵襲的抑制作用。見(jiàn)圖4C、圖4D。


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