龜板提取物激活Wnt/β-catenin通路促毛囊干細胞修復(fù)皮膚創(chuàng)面
發(fā)布時間:2021-11-24 06:02
研究目的:皮膚損傷是臨床上的常見病與多發(fā)病。常見的皮膚損傷有燒傷、咬傷、日曬傷、碰傷、凍傷、刀割傷、電灼傷等。僅限于表皮的損傷為輕度,真皮及皮下組織損傷、斷裂為中度,肌肉、肌鍵、骨頭乃至神經(jīng)的損傷則為重度。皮膚損傷愈合不良可形成瘢痕,這不僅影響患者美觀,還可導(dǎo)致患者肢體的功能障礙,甚至危及生命。如何促進損傷皮膚的結(jié)構(gòu)功能完整是臨床工作的重點問題;诟杉毎委熎つw損傷的技術(shù)被譽為最有前景性的治療之一。干細胞具有多向分化潛能和低免疫性,可利于慢性創(chuàng)傷和急性創(chuàng)傷的治療。毛囊干細胞(Hair Follicle stem cells,HFSCs)來源于皮膚毛囊隆突部,在生理情況下可參與毛發(fā)與毛囊的周期性生長;在病理情況下時,HFSCs脫離靜息狀態(tài),呈線性方式向傷口中心遷移,并增殖分化為上皮細胞、毛囊、皮脂腺等,修復(fù)損傷的表皮。如何高效地促進HFSCs的增殖分化對皮膚的組織修復(fù)具有重要的意義。實驗證明,Wnt/β-catenin信號通路不僅在胚胎發(fā)育過程中促進表皮及毛囊的形成,出生以后可維持成體組織干細胞的自我更新和分化。若能有效地刺激該條通路,則可有利于皮膚的修復(fù)。中藥治療皮膚創(chuàng)傷歷史悠久,明...
【文章來源】:廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖8大鼠觸須部創(chuàng)傷模型??Figure?8?The?skin?defected?mode?I?in?rats??
圖9大鼠創(chuàng)面HE染色(X?100)??Figure?9?The?HE?staining?of?rat?wound??第三節(jié)S8、S9激活Wnt/f3?-catenin信號通路促大鼠觸須部皮膚創(chuàng)面修復(fù)??一、免疫熒光檢測Wnt/(3-catenin信號通路蛋白實驗步驟??1.常規(guī)取材,速凍組織,置于恒冷切片機冰凍切片。冰凍切片7?)am。??2.室溫下復(fù)溫30?min。??3.加入4?°C丙酮固定10?min,PBS洗4次,每次5?min。??4.滴加3%過氧化氫酶反應(yīng)15?niin,PBS洗4次,每次5?min。??5.加入5%正常山羊血清封閉30?min,甩掉片上多余的血清,勿洗。??6.按適當(dāng)稀釋例滴加丨抗,抗體覆蓋整個組織塊。??7.置于濕盒內(nèi)4?°C冰箱孵育過夜。??次日??8.室溫復(fù)溫3〇111丨11,1^5洗4次,每次5?11^11。??9.按適當(dāng)比例滴加生物素化II抗,室溫孵育30?min,?PBS洗4次,每次5?min。??
圖2?HFSCs的鑒定(X?400)??
本文編號:3515383
【文章來源】:廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖8大鼠觸須部創(chuàng)傷模型??Figure?8?The?skin?defected?mode?I?in?rats??
圖9大鼠創(chuàng)面HE染色(X?100)??Figure?9?The?HE?staining?of?rat?wound??第三節(jié)S8、S9激活Wnt/f3?-catenin信號通路促大鼠觸須部皮膚創(chuàng)面修復(fù)??一、免疫熒光檢測Wnt/(3-catenin信號通路蛋白實驗步驟??1.常規(guī)取材,速凍組織,置于恒冷切片機冰凍切片。冰凍切片7?)am。??2.室溫下復(fù)溫30?min。??3.加入4?°C丙酮固定10?min,PBS洗4次,每次5?min。??4.滴加3%過氧化氫酶反應(yīng)15?niin,PBS洗4次,每次5?min。??5.加入5%正常山羊血清封閉30?min,甩掉片上多余的血清,勿洗。??6.按適當(dāng)稀釋例滴加丨抗,抗體覆蓋整個組織塊。??7.置于濕盒內(nèi)4?°C冰箱孵育過夜。??次日??8.室溫復(fù)溫3〇111丨11,1^5洗4次,每次5?11^11。??9.按適當(dāng)比例滴加生物素化II抗,室溫孵育30?min,?PBS洗4次,每次5?min。??
圖2?HFSCs的鑒定(X?400)??
本文編號:3515383
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