目的:研究當(dāng)歸補(bǔ)血湯促紅細(xì)胞生成的潛在藥效成分,探討當(dāng)歸補(bǔ)血湯促紅細(xì)胞生成的作用通路。方法:一、DBT促紅細(xì)胞生成的藥效研究。1)設(shè)計(jì)兩因素三水平,即不同濃度（0.2μg/mL、0.1μg/mL、0.067μg/mL）和不同孵育時(shí)間（15 min、30 min、60 min）的實(shí)驗(yàn),利用流式細(xì)胞儀測(cè)量網(wǎng)織紅細(xì)胞比例來(lái)優(yōu)化網(wǎng)織紅細(xì)胞檢驗(yàn)的方法;2)設(shè)計(jì)分組,分為對(duì)照組（生理鹽水）、高劑量組（10 g/kg）、中劑量組（5 g/kg）、低劑量組（0.1 g/kg）,每組5只,分別灌胃和腹腔注射,通過(guò)分析網(wǎng)織紅細(xì)胞比例的變化來(lái)確定給藥方式、給藥劑量以及給藥時(shí)間點(diǎn);3)CD71-FITC、Ter119-PE標(biāo)記骨髓單細(xì)胞懸液,流式細(xì)胞儀驗(yàn)證DBT對(duì)骨髓中造血細(xì)胞系的早、中、晚期的紅系相關(guān)細(xì)胞的影響;4)CFU-E培養(yǎng)基培養(yǎng)BMSCs,48 h后,計(jì)數(shù)CFU-E克隆數(shù)目;5)BFU-E培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)BMSCs,7 d后,計(jì)數(shù)BFU-E克隆數(shù)目,驗(yàn)證DBT對(duì)紅細(xì)胞分化的能力。二、DBT促紅細(xì)胞生成潛在藥效成分研究。1)利用MTT法探討小鼠自體血清的制備方法和血清的最大添加量;2)末次給藥后,按照自體... 

【文章來(lái)源】：廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：101 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

優(yōu)化流式細(xì)胞儀檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞的條件；(A):網(wǎng)織紅細(xì)胞隨染料孵育時(shí)間的變化圖；(B)：網(wǎng)織紅細(xì)胞隨染料的濃度變化圖

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文圖 2-2 優(yōu)化給藥方式；(A)：灌胃；(B)：腹腔注射；** p <0.01，*** p <0.001Fig2-2 Optimize the way of administration; A: intragastric administration; B: intraperitoinjection;** p <0.01，*** p <0.001；2.3.3 DBT 給藥劑量、時(shí)間的優(yōu)化前面已經(jīng)確定了腹腔注射為給藥方式，恰當(dāng)?shù)慕o藥劑量也很關(guān)鍵，結(jié)果表藥劑量為5 g/kg 時(shí)，連續(xù)給藥至第 14 d，網(wǎng)織紅細(xì)胞所占的比例顯著增加，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，網(wǎng)織紅細(xì)胞比例趨于穩(wěn)定；當(dāng)給藥劑量為10 g/kg 時(shí)，網(wǎng)織紅細(xì)胞的比例顯著增加，隨著給藥時(shí)間的延長(zhǎng)，網(wǎng)織紅細(xì)胞比例趨于穩(wěn)定，但是小鼠出溏等不太好的狀況，給藥濃度越高，網(wǎng)織紅細(xì)胞的比例上升的越快，但是鑒于的濃度越高，隨給藥時(shí)間的延長(zhǎng)，會(huì)帶來(lái)一定的毒性。故后續(xù)實(shí)驗(yàn)均采用 5 g/kDBT 的腹腔注射給藥劑量。

藥 DBT 對(duì)網(wǎng)織紅細(xì)胞的影響；值表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（n=6）；CON，DBT，當(dāng)歸補(bǔ)血湯( 5 g/kg.d )。* p <0.05。effect of DBT on reticulocyte after continuous administration. Values are expreS.D (n = 6);CON, control group; DBT, Danggui Buxue Tang (5 g/kg.d). * p <對(duì)器官指數(shù)和體重的影響剖觀察小鼠內(nèi)臟器官的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，有助于觀察小鼠的臟器是否藥14 d 后，對(duì) DBT組與 CON 兩組間的體重和器官指數(shù)進(jìn)行了統(tǒng)與 CON 組的體重隨時(shí)間的增加逐漸增加，二者之間沒(méi)有明顯的的結(jié)果表明，DBT組脾臟指數(shù)（0.522±0.04）%與對(duì)照組（0.412±增加（p＜0.05）；DBT 組腎臟指數(shù)（1.541±0.108）%與對(duì)照組（比無(wú)明顯差異（p=0.97）；DBT 組肝臟左葉指數(shù)（1.189±0.083）0.165）%相比無(wú)明顯差異（p=0.07）。表明脾臟有可能是 DBT的潛通過(guò)促進(jìn)脾臟來(lái)促進(jìn)紅細(xì)胞生成。

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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本文編號(hào)：3512429