目的:研究當歸補血湯促紅細胞生成的潛在藥效成分,探討當歸補血湯促紅細胞生成的作用通路。方法:一、DBT促紅細胞生成的藥效研究。1)設計兩因素三水平,即不同濃度（0.2μg/mL、0.1μg/mL、0.067μg/mL）和不同孵育時間（15 min、30 min、60 min）的實驗,利用流式細胞儀測量網織紅細胞比例來優(yōu)化網織紅細胞檢驗的方法;2)設計分組,分為對照組（生理鹽水）、高劑量組（10 g/kg）、中劑量組（5 g/kg）、低劑量組（0.1 g/kg）,每組5只,分別灌胃和腹腔注射,通過分析網織紅細胞比例的變化來確定給藥方式、給藥劑量以及給藥時間點;3)CD71-FITC、Ter119-PE標記骨髓單細胞懸液,流式細胞儀驗證DBT對骨髓中造血細胞系的早、中、晚期的紅系相關細胞的影響;4)CFU-E培養(yǎng)基培養(yǎng)BMSCs,48 h后,計數CFU-E克隆數目;5)BFU-E培養(yǎng)基來培養(yǎng)BMSCs,7 d后,計數BFU-E克隆數目,驗證DBT對紅細胞分化的能力。二、DBT促紅細胞生成潛在藥效成分研究。1)利用MTT法探討小鼠自體血清的制備方法和血清的最大添加量;2)末次給藥后,按照自體... 

【文章來源】：廣東藥科大學廣東省

【文章頁數】：101 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

優(yōu)化流式細胞儀檢測網織紅細胞的條件；(A):網織紅細胞隨染料孵育時間的變化圖；(B)：網織紅細胞隨染料的濃度變化圖

廣東藥科大學碩士研究生學位論文圖 2-2 優(yōu)化給藥方式；(A)：灌胃；(B)：腹腔注射；** p <0.01，*** p <0.001Fig2-2 Optimize the way of administration; A: intragastric administration; B: intraperitoinjection;** p <0.01，*** p <0.001；2.3.3 DBT 給藥劑量、時間的優(yōu)化前面已經確定了腹腔注射為給藥方式，恰當的給藥劑量也很關鍵，結果表藥劑量為5 g/kg 時，連續(xù)給藥至第 14 d，網織紅細胞所占的比例顯著增加，隨著時間的延長，網織紅細胞比例趨于穩(wěn)定；當給藥劑量為10 g/kg 時，網織紅細胞的比例顯著增加，隨著給藥時間的延長，網織紅細胞比例趨于穩(wěn)定，但是小鼠出溏等不太好的狀況，給藥濃度越高，網織紅細胞的比例上升的越快，但是鑒于的濃度越高，隨給藥時間的延長，會帶來一定的毒性。故后續(xù)實驗均采用 5 g/kDBT 的腹腔注射給藥劑量。

藥 DBT 對網織紅細胞的影響；值表示為平均值±標準差（n=6）；CON，DBT，當歸補血湯( 5 g/kg.d )。* p <0.05。effect of DBT on reticulocyte after continuous administration. Values are expreS.D (n = 6);CON, control group; DBT, Danggui Buxue Tang (5 g/kg.d). * p <對器官指數和體重的影響剖觀察小鼠內臟器官的形態(tài)和結構，有助于觀察小鼠的臟器是否藥14 d 后，對 DBT組與 CON 兩組間的體重和器官指數進行了統(tǒng)與 CON 組的體重隨時間的增加逐漸增加，二者之間沒有明顯的的結果表明，DBT組脾臟指數（0.522±0.04）%與對照組（0.412±增加（p＜0.05）；DBT 組腎臟指數（1.541±0.108）%與對照組（比無明顯差異（p=0.97）；DBT 組肝臟左葉指數（1.189±0.083）0.165）%相比無明顯差異（p=0.07）。表明脾臟有可能是 DBT的潛通過促進脾臟來促進紅細胞生成。

【參考文獻】：
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博士論文
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本文編號：3512429