刺山柑免疫抑制成分分離純化與功能驗(yàn)證
發(fā)布時(shí)間:2021-11-21 08:07
自身免疫性疾。╝utoimmune diseases,AID)是由多種原因使機(jī)體對自身抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答,造成多系統(tǒng)損害,是一種慢性炎癥疾病,對人類的健康造成很大危害。刺山柑(Capparis spinosa L.)作為一種傳統(tǒng)中草藥常用來治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)等免疫性疾病。樹突狀細(xì)胞(dendritic cell,DC)作為機(jī)體內(nèi)專職的抗原遞呈細(xì)胞,其成熟狀態(tài)及分泌細(xì)胞因子的類型決定了免疫反應(yīng)的性質(zhì)。本研究以刺山柑果實(shí)為實(shí)驗(yàn)材料,用有機(jī)溶劑對刺山柑果實(shí)醇提物進(jìn)行分級分離,再通過陽離子交換樹脂與葡聚糖凝膠樹脂柱層析進(jìn)一步純化,得到刺山柑果實(shí)總生物堿粗提物(C.spinosa fruit alkaloids,CSFA)及CSES(C.spinosa fruit ethanol extracts,by Sephadex-LH20)兩個(gè)組分,檢測CSFA及CSES對DC成熟的影響:單獨(dú)或與細(xì)菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)聯(lián)合使用對DC表達(dá)表面分子及細(xì)胞因子分泌的影響;與熒光標(biāo)記的右旋糖苷(FITC-dextran)及DC共孵育后檢測DC吞噬抗原的能力;熒光倒置顯微...
【文章來源】:新疆大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
刺山柑果實(shí)分離純化
21***P<0.001 compared to Control.###P<0.001 compared to LPS.圖 1-2 石油醚部位對 DC 活性及成熟的影響A:DC 活性;B:DC 表面共刺激分子 CD40 的表達(dá)水平(n=3)。Fig.1-2 Effects of petroleum ether fraction on DC viability and maturationA, The viability of DC; B, The expression levels of costimulatory molecule CD40 on DC (n=2.1.2 乙酸乙酯萃取部位對 DC 活性及表面分子表達(dá)的影響接下來,我們用吹干后的乙酸乙酯層檢測其對 DC 活性及表面分子表達(dá)的。結(jié)果如圖 1-3 所示,LPS 及 0.4 mg/mL、0.6 mg/mL 單獨(dú)使用時(shí)顯著增加C 表面分子 CD40 的表達(dá),同時(shí)乙酸乙酯部位與 LPS 聯(lián)合使用時(shí)對 DC 表面 CD40 的表達(dá)無顯著影響,因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)我們不選擇乙酸乙酯部位進(jìn)行。
22*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001 compared to Control.圖 1-3 乙酸乙酯部位對 DC 活性及成熟的影響A:DC 活性;B:DC 表面共刺激分子 CD40 的表達(dá)水平(n=3)。Fig.1-3 Effects of ethyl acetate fraction on DC viability and maturationA, The viability of DC; B, The expression levels of costimulatory molecule CD40 on DC (n=2.1.3 萃取后的水部位對 DC 活性及表面分子表達(dá)的影響我們檢測了萃取后剩余的水層對 DC 活性及表面分子表達(dá)是否有影響,用水將水部位凍干粉溶解后,分別單獨(dú)或與 LPS 聯(lián)合處理 DC,12 h 后收集細(xì)胞光抗體染色后用流式細(xì)胞儀分析。結(jié)果顯示(圖 1-4),1 mg/mL、2 mg/ 3mg/mL 水部位對 DC 的活性均無顯著影響。與對照組相比,LPS 處理組C 表面分子 CD40 顯著上調(diào),不同濃度水部位單獨(dú)使用時(shí)對 DC 表面分子 CD達(dá)無顯著影響,但是與 LPS 聯(lián)合使用時(shí)均顯著抑制了 LPS 誘導(dǎo)的表面分
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]自身免疫性疾病新型自身抗體研究進(jìn)展[J]. 周鑫昀,陳惠,沈立松. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué). 2017(06)
[2]頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析刺山柑果不同生長時(shí)期揮發(fā)性成分[J]. 張軒晨,楊偉俊,何江,楊曉君,程波. 食品與發(fā)酵科技. 2017(03)
[3]丹參酮ⅡA對樹突狀細(xì)胞表型的影響及對功能的調(diào)控[J]. 夏金華,夏建川,謝麗燕,廖傳英. 中國免疫學(xué)雜志. 2017(03)
[4]萜類化合物的合成生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 孫麗超,李淑英,王鳳忠,辛鳳姣. 生物技術(shù)通報(bào). 2017(01)
[5]羅布麻葉總黃酮對大鼠動脈粥樣硬化干預(yù)作用[J]. 張洋,冷曉微,李亞娟,劉凱,閆夢彤,任立群. 中國公共衛(wèi)生. 2016(12)
[6]復(fù)方一枝蒿微丸抗炎、免疫及抗菌作用研究[J]. 陳蕾,姜雯,潘曉梅,劉婕妤,邢建國. 新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(02)
[7]人參皂苷Rg3對樹突狀細(xì)胞成熟及功能改變的影響[J]. 劉永華,譚樹穎,高瑞蘭,江錦紅,王朋,尹利明,鄭智茵,方炳木. 中華全科醫(yī)學(xué). 2016(02)
[8]胡柚皮黃酮對非酒精性脂肪性肝炎小鼠Th17/Treg平衡的調(diào)節(jié)作用[J]. 李劍霜,陳芝蕓,蔣劍平,何蓓暉. 中國中藥雜志. 2015(13)
[9]樹突狀細(xì)胞在自身免疫性疾病中的作用[J]. 宋佳,尹月,王丹,邱春紅. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2015(05)
[10]天然活性異硫氰酸酯類化合物的研究進(jìn)展[J]. 梁浩,李瑞敏,袁其朋. 北京化工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(02)
碩士論文
[1]GDF-15對樹突狀細(xì)胞成熟和功能的影響[D]. 周治中.第四軍醫(yī)大學(xué) 2013
[2]漢桃葉有機(jī)酸類成分研究及軟膏劑開發(fā)[D]. 胡書平.中央民族大學(xué) 2012
本文編號:3509107
【文章來源】:新疆大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
刺山柑果實(shí)分離純化
21***P<0.001 compared to Control.###P<0.001 compared to LPS.圖 1-2 石油醚部位對 DC 活性及成熟的影響A:DC 活性;B:DC 表面共刺激分子 CD40 的表達(dá)水平(n=3)。Fig.1-2 Effects of petroleum ether fraction on DC viability and maturationA, The viability of DC; B, The expression levels of costimulatory molecule CD40 on DC (n=2.1.2 乙酸乙酯萃取部位對 DC 活性及表面分子表達(dá)的影響接下來,我們用吹干后的乙酸乙酯層檢測其對 DC 活性及表面分子表達(dá)的。結(jié)果如圖 1-3 所示,LPS 及 0.4 mg/mL、0.6 mg/mL 單獨(dú)使用時(shí)顯著增加C 表面分子 CD40 的表達(dá),同時(shí)乙酸乙酯部位與 LPS 聯(lián)合使用時(shí)對 DC 表面 CD40 的表達(dá)無顯著影響,因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)我們不選擇乙酸乙酯部位進(jìn)行。
22*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001 compared to Control.圖 1-3 乙酸乙酯部位對 DC 活性及成熟的影響A:DC 活性;B:DC 表面共刺激分子 CD40 的表達(dá)水平(n=3)。Fig.1-3 Effects of ethyl acetate fraction on DC viability and maturationA, The viability of DC; B, The expression levels of costimulatory molecule CD40 on DC (n=2.1.3 萃取后的水部位對 DC 活性及表面分子表達(dá)的影響我們檢測了萃取后剩余的水層對 DC 活性及表面分子表達(dá)是否有影響,用水將水部位凍干粉溶解后,分別單獨(dú)或與 LPS 聯(lián)合處理 DC,12 h 后收集細(xì)胞光抗體染色后用流式細(xì)胞儀分析。結(jié)果顯示(圖 1-4),1 mg/mL、2 mg/ 3mg/mL 水部位對 DC 的活性均無顯著影響。與對照組相比,LPS 處理組C 表面分子 CD40 顯著上調(diào),不同濃度水部位單獨(dú)使用時(shí)對 DC 表面分子 CD達(dá)無顯著影響,但是與 LPS 聯(lián)合使用時(shí)均顯著抑制了 LPS 誘導(dǎo)的表面分
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]自身免疫性疾病新型自身抗體研究進(jìn)展[J]. 周鑫昀,陳惠,沈立松. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué). 2017(06)
[2]頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析刺山柑果不同生長時(shí)期揮發(fā)性成分[J]. 張軒晨,楊偉俊,何江,楊曉君,程波. 食品與發(fā)酵科技. 2017(03)
[3]丹參酮ⅡA對樹突狀細(xì)胞表型的影響及對功能的調(diào)控[J]. 夏金華,夏建川,謝麗燕,廖傳英. 中國免疫學(xué)雜志. 2017(03)
[4]萜類化合物的合成生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 孫麗超,李淑英,王鳳忠,辛鳳姣. 生物技術(shù)通報(bào). 2017(01)
[5]羅布麻葉總黃酮對大鼠動脈粥樣硬化干預(yù)作用[J]. 張洋,冷曉微,李亞娟,劉凱,閆夢彤,任立群. 中國公共衛(wèi)生. 2016(12)
[6]復(fù)方一枝蒿微丸抗炎、免疫及抗菌作用研究[J]. 陳蕾,姜雯,潘曉梅,劉婕妤,邢建國. 新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(02)
[7]人參皂苷Rg3對樹突狀細(xì)胞成熟及功能改變的影響[J]. 劉永華,譚樹穎,高瑞蘭,江錦紅,王朋,尹利明,鄭智茵,方炳木. 中華全科醫(yī)學(xué). 2016(02)
[8]胡柚皮黃酮對非酒精性脂肪性肝炎小鼠Th17/Treg平衡的調(diào)節(jié)作用[J]. 李劍霜,陳芝蕓,蔣劍平,何蓓暉. 中國中藥雜志. 2015(13)
[9]樹突狀細(xì)胞在自身免疫性疾病中的作用[J]. 宋佳,尹月,王丹,邱春紅. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2015(05)
[10]天然活性異硫氰酸酯類化合物的研究進(jìn)展[J]. 梁浩,李瑞敏,袁其朋. 北京化工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(02)
碩士論文
[1]GDF-15對樹突狀細(xì)胞成熟和功能的影響[D]. 周治中.第四軍醫(yī)大學(xué) 2013
[2]漢桃葉有機(jī)酸類成分研究及軟膏劑開發(fā)[D]. 胡書平.中央民族大學(xué) 2012
本文編號:3509107
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