油茶蒲中活性單體對人前列腺增生上皮細(xì)胞系和前列腺癌細(xì)胞株的抑制作用研究
發(fā)布時間:2021-11-21 01:32
良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)組織學(xué)定義是指上皮和間質(zhì)過渡區(qū)以及前列腺前尿道區(qū)域細(xì)胞的過度生長和增殖,目前BPH發(fā)病的分子機制仍然不明確,治療存在困難。前期研究表明油茶蒲提取物(Oiltea CamelliaExtract,OCE)具有改善前列腺疾病的功能,為了明確OCE抑制前列腺增生的關(guān)鍵活性成分并研究其作用機理,本文從具有高5α-還原酶抑制活性的OCE的聚酰胺組分Fr8中分離得到單體,研究活性單體對人前列腺增生上皮細(xì)胞系(BPH-1)和人前列腺癌細(xì)胞株(PC-3)的增殖抑制作用,進(jìn)一步通過實時熒光定量PCR研究其作用于BPH-1細(xì)胞的機理,并運用細(xì)胞劃痕實驗檢測其對PC-3細(xì)胞遷移能力的影響。主要研究結(jié)果如下:(1)采用固相萃。⊿PE)和高效制備液相色譜技術(shù)(preparative HPLC)從油茶蒲聚酰胺組分Fr8中分離制備得到單體,運用質(zhì)譜、核磁共振等手段,對3個具有高BPH-1細(xì)胞增殖抑制活性的單體進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果表明:3個單體分別為3-O-沒食子;-4,6-[(S)-六羥基聯(lián)苯二;鵠-α/β-D-吡喃葡萄糖(ge...
【文章來源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:87 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
致謝
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 緒論
1.1 良性前列腺增生
1.1.1 良性前列腺增生簡介
1.1.2 良性前列腺增生的實驗室研究指標(biāo)
1.1.3 良性前列腺增生與前列腺炎癥的關(guān)系
1.1.4 良性前列腺增生與前列腺癌的關(guān)系
1.1.5 良性前列腺增生的治療藥物
1.2 油茶蒲的簡介
1.2.1 油茶與油茶蒲
1.2.2 油茶蒲的生物學(xué)功效
1.2.3 油茶蒲的安全性評價
1.3 本文研究的依據(jù)、意義和主要內(nèi)容
1.3.1 研究依據(jù)
1.3.2 研究目的及意義
1.3.3 研究的主要內(nèi)容
1.3.4 研究的創(chuàng)新點
第二章 油茶蒲聚酰胺組分中活性單體的分離與結(jié)構(gòu)鑒定
2.1 引言
2.2 材料試劑和儀器
2.2.1 材料試劑
2.2.2 儀器
2.3 實驗方法
2.3.1 油茶蒲聚酰胺組分Fr8的制備和分析
2.3.2 Fr8的純化除雜
2.3.3 制備液相分離活性單體
2.3.4 制備液相收集的活性組分后處理
2.3.5 F1~F5的液相分析
2.3.6 活性單體的結(jié)構(gòu)鑒定
2.4 實驗結(jié)果
2.4.1 油茶蒲聚酰胺組分Fr8的液相分析結(jié)果
2.4.2 Fr8除雜后結(jié)果分析
2.4.3 Fr8制備液相分離結(jié)果
2.4.4 活性組分后處理
2.4.5 油茶蒲各活性單體得率
2.4.6 結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果分析
2.5 本章結(jié)論
第三章 油茶蒲活性單體對BPH-1細(xì)胞增殖和凋亡的影響
3.1 引言
3.2 材料和儀器
3.2.1 材料
3.2.2 儀器
3.3 實驗方法
3.3.1 細(xì)胞實驗基礎(chǔ)操作
3.3.2 活性組分對BPH-1細(xì)胞增殖的抑制作用
3.3.3 活性單體對BPH-1細(xì)胞凋亡的影響
3.3.4 統(tǒng)計學(xué)分析
3.4 實驗結(jié)果
3.4.1 活性組分對BPH-1細(xì)胞增殖抑制的結(jié)果
3.4.2 活性單體對BPH-1細(xì)胞形態(tài)的影響
3.4.3 活性單體對BPH-1細(xì)胞凋亡的影響
3.5 本章結(jié)論
第四章 油茶蒲活性單體對BPH-1細(xì)胞的作用機理研究
4.1 引言
4.2 材料和儀器
4.2.1 材料
4.2.2 儀器
4.3 實驗方法
4.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
4.3.2 細(xì)胞RNA提取(Trizol法)
4.3.3 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
4.3.4 實時熒光定量基因擴增檢測
4.4 實驗結(jié)果
4.4.1 RNA純度和濃度
4.4.2 RNA完整性測定
4.4.3 油茶蒲活性單體作用BPH-1細(xì)胞48h后基因表達(dá)分析
4.5 本章結(jié)論
第五章 油茶蒲活性單體對前列腺癌細(xì)胞PC-3的作用
5.1 引言
5.2 材料和儀器
5.2.1 材料
5.2.2 儀器
5.3 實驗方法
5.3.1 細(xì)胞實驗基礎(chǔ)操作
5.3.2 活性單體對PC-3細(xì)胞增殖的抑制作用
5.3.3 實時監(jiān)測活性單體對PC-3細(xì)胞增殖的影響
5.3.4 活性單體對PC-3細(xì)胞遷移的影響
5.3.5 活性單體對PC-3細(xì)胞凋亡的影響
5.3.6 統(tǒng)計學(xué)分析
5.4 實驗結(jié)果
5.4.1 活性單體對PC-3細(xì)胞增殖抑制的結(jié)果
5.4.2 實時監(jiān)測活性單體抑制PC-3細(xì)胞增殖的結(jié)果
5.4.3 活性單體對PC-3細(xì)胞橫向遷移的影響
5.4.4 活性單體對PC-3細(xì)胞形態(tài)的影響
5.4.5 活性單體對PC-3細(xì)胞凋亡的影響
5.5 本章結(jié)論
第六章 結(jié)論與展望
6.1 結(jié)論
6.2 展望
參考文獻(xiàn)
個人簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]油茶蒲提取物對脂代謝的影響研究[J]. 李佳興,潘柳葉,普紹丹,農(nóng)雪倩,朱明毅,王若琦. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥. 2016(03)
[2]良性前列腺增生癥的藥物治療進(jìn)展[J]. 李賀洋,孟凡學(xué). 醫(yī)學(xué)綜述. 2014(03)
[3]良性前列腺增生發(fā)病機制的研究進(jìn)展[J]. 朱圣生,吳建輝,孫祖越. 毒理學(xué)雜志. 2013(05)
[4]良性前列腺增生中Caspase的研究進(jìn)展[J]. 李鵬,孫鵬. 泌尿外科雜志(電子版). 2013(02)
[5]STAT3抑制劑及其抗腫瘤活性研究進(jìn)展[J]. 張大永,吳家強,吳曉明. 藥學(xué)進(jìn)展. 2012(07)
[6]油茶蒲水提物的減肥作用[J]. 陳秋平,姜天甲,馬曉豐,沈建福. 中國糧油學(xué)報. 2011(09)
[7]我國油茶產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及發(fā)展對策[J]. 王斌,王開良,童杰潔,姚小華. 林業(yè)科技開發(fā). 2011(02)
[8]PI3K/AKT抑制劑對前列腺增生的影響及機制研究[J]. 金鵬,王蔭槐,彭佑共,胡勝,盧強,楊羅艷. 中華男科學(xué)雜志. 2010(12)
[9]p38MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與細(xì)胞凋亡研究進(jìn)展[J]. 王譽霖,張勵才. 慢性病學(xué)雜志. 2010(12)
[10]STAT3蛋白在前列腺癌患者前列腺組織中的表達(dá)和意義[J]. 梁作文,賈慧婕,李馨,趙麗晶,高麗芳,張靈,趙雪儉. 中國老年學(xué)雜志. 2010(09)
博士論文
[1]中藥單體與中藥復(fù)方抑制前列腺癌生長與轉(zhuǎn)移的功能與機制研究[D]. 胡美純.華東師范大學(xué) 2015
[2]大豆異黃酮抑制前列腺增生的作用及其機理研究[D]. 任國峰.中南大學(xué) 2013
[3]油茶蒲減肥降脂功能因子研究[D]. 陳秋平.浙江大學(xué) 2011
[4]小花鬼針草抗前列腺增生活性成分的研究[D]. 李玉蘭.沈陽藥科大學(xué) 2009
[5]抑制良性前列腺增生有效中草藥的篩選及其機理研究[D]. 陳志強.廣西醫(yī)科大學(xué) 2008
[6]前列腺癌與良性前列腺增生差異表達(dá)基因的篩選及相關(guān)研究[D]. 張彤.天津醫(yī)科大學(xué) 2005
碩士論文
[1]油茶蒲抑制5α-還原酶關(guān)鍵組分對BPH-1細(xì)胞的作用及機理初探[D]. 沈駿.浙江大學(xué) 2015
[2]油茶蒲抑制良性前列腺增生活性成分的分離純化及其作用研究[D]. 鄭茜茜.浙江大學(xué) 2014
[3]油茶蒲醇提物抑制5α-還原酶及對前列腺疾病的作用[D]. 羅曉偉.浙江大學(xué) 2011
[4]油茶蒲鞣質(zhì)提取及其降血糖活性研究[D]. 戴甜甜.浙江大學(xué) 2011
[5]油茶蒲提取物抗氧化及抗癌活性研究[D]. 陳亞琪.浙江大學(xué) 2010
[6]油茶蒲多糖的制備、組分分析及抗腫瘤活性初步研究[D]. 康海權(quán).浙江大學(xué) 2010
[7]前列腺增生和前列腺癌細(xì)胞增殖與凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)及相關(guān)性[D]. 方志啟.安徽醫(yī)科大學(xué) 2007
[8]5α-還原酶抑制劑與DU145細(xì)胞生長抑制劑的研究[D]. 董文洪.浙江大學(xué) 2006
本文編號:3508490
【文章來源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:87 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
致謝
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 緒論
1.1 良性前列腺增生
1.1.1 良性前列腺增生簡介
1.1.2 良性前列腺增生的實驗室研究指標(biāo)
1.1.3 良性前列腺增生與前列腺炎癥的關(guān)系
1.1.4 良性前列腺增生與前列腺癌的關(guān)系
1.1.5 良性前列腺增生的治療藥物
1.2 油茶蒲的簡介
1.2.1 油茶與油茶蒲
1.2.2 油茶蒲的生物學(xué)功效
1.2.3 油茶蒲的安全性評價
1.3 本文研究的依據(jù)、意義和主要內(nèi)容
1.3.1 研究依據(jù)
1.3.2 研究目的及意義
1.3.3 研究的主要內(nèi)容
1.3.4 研究的創(chuàng)新點
第二章 油茶蒲聚酰胺組分中活性單體的分離與結(jié)構(gòu)鑒定
2.1 引言
2.2 材料試劑和儀器
2.2.1 材料試劑
2.2.2 儀器
2.3 實驗方法
2.3.1 油茶蒲聚酰胺組分Fr8的制備和分析
2.3.2 Fr8的純化除雜
2.3.3 制備液相分離活性單體
2.3.4 制備液相收集的活性組分后處理
2.3.5 F1~F5的液相分析
2.3.6 活性單體的結(jié)構(gòu)鑒定
2.4 實驗結(jié)果
2.4.1 油茶蒲聚酰胺組分Fr8的液相分析結(jié)果
2.4.2 Fr8除雜后結(jié)果分析
2.4.3 Fr8制備液相分離結(jié)果
2.4.4 活性組分后處理
2.4.5 油茶蒲各活性單體得率
2.4.6 結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果分析
2.5 本章結(jié)論
第三章 油茶蒲活性單體對BPH-1細(xì)胞增殖和凋亡的影響
3.1 引言
3.2 材料和儀器
3.2.1 材料
3.2.2 儀器
3.3 實驗方法
3.3.1 細(xì)胞實驗基礎(chǔ)操作
3.3.2 活性組分對BPH-1細(xì)胞增殖的抑制作用
3.3.3 活性單體對BPH-1細(xì)胞凋亡的影響
3.3.4 統(tǒng)計學(xué)分析
3.4 實驗結(jié)果
3.4.1 活性組分對BPH-1細(xì)胞增殖抑制的結(jié)果
3.4.2 活性單體對BPH-1細(xì)胞形態(tài)的影響
3.4.3 活性單體對BPH-1細(xì)胞凋亡的影響
3.5 本章結(jié)論
第四章 油茶蒲活性單體對BPH-1細(xì)胞的作用機理研究
4.1 引言
4.2 材料和儀器
4.2.1 材料
4.2.2 儀器
4.3 實驗方法
4.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
4.3.2 細(xì)胞RNA提取(Trizol法)
4.3.3 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
4.3.4 實時熒光定量基因擴增檢測
4.4 實驗結(jié)果
4.4.1 RNA純度和濃度
4.4.2 RNA完整性測定
4.4.3 油茶蒲活性單體作用BPH-1細(xì)胞48h后基因表達(dá)分析
4.5 本章結(jié)論
第五章 油茶蒲活性單體對前列腺癌細(xì)胞PC-3的作用
5.1 引言
5.2 材料和儀器
5.2.1 材料
5.2.2 儀器
5.3 實驗方法
5.3.1 細(xì)胞實驗基礎(chǔ)操作
5.3.2 活性單體對PC-3細(xì)胞增殖的抑制作用
5.3.3 實時監(jiān)測活性單體對PC-3細(xì)胞增殖的影響
5.3.4 活性單體對PC-3細(xì)胞遷移的影響
5.3.5 活性單體對PC-3細(xì)胞凋亡的影響
5.3.6 統(tǒng)計學(xué)分析
5.4 實驗結(jié)果
5.4.1 活性單體對PC-3細(xì)胞增殖抑制的結(jié)果
5.4.2 實時監(jiān)測活性單體抑制PC-3細(xì)胞增殖的結(jié)果
5.4.3 活性單體對PC-3細(xì)胞橫向遷移的影響
5.4.4 活性單體對PC-3細(xì)胞形態(tài)的影響
5.4.5 活性單體對PC-3細(xì)胞凋亡的影響
5.5 本章結(jié)論
第六章 結(jié)論與展望
6.1 結(jié)論
6.2 展望
參考文獻(xiàn)
個人簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]油茶蒲提取物對脂代謝的影響研究[J]. 李佳興,潘柳葉,普紹丹,農(nóng)雪倩,朱明毅,王若琦. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥. 2016(03)
[2]良性前列腺增生癥的藥物治療進(jìn)展[J]. 李賀洋,孟凡學(xué). 醫(yī)學(xué)綜述. 2014(03)
[3]良性前列腺增生發(fā)病機制的研究進(jìn)展[J]. 朱圣生,吳建輝,孫祖越. 毒理學(xué)雜志. 2013(05)
[4]良性前列腺增生中Caspase的研究進(jìn)展[J]. 李鵬,孫鵬. 泌尿外科雜志(電子版). 2013(02)
[5]STAT3抑制劑及其抗腫瘤活性研究進(jìn)展[J]. 張大永,吳家強,吳曉明. 藥學(xué)進(jìn)展. 2012(07)
[6]油茶蒲水提物的減肥作用[J]. 陳秋平,姜天甲,馬曉豐,沈建福. 中國糧油學(xué)報. 2011(09)
[7]我國油茶產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及發(fā)展對策[J]. 王斌,王開良,童杰潔,姚小華. 林業(yè)科技開發(fā). 2011(02)
[8]PI3K/AKT抑制劑對前列腺增生的影響及機制研究[J]. 金鵬,王蔭槐,彭佑共,胡勝,盧強,楊羅艷. 中華男科學(xué)雜志. 2010(12)
[9]p38MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與細(xì)胞凋亡研究進(jìn)展[J]. 王譽霖,張勵才. 慢性病學(xué)雜志. 2010(12)
[10]STAT3蛋白在前列腺癌患者前列腺組織中的表達(dá)和意義[J]. 梁作文,賈慧婕,李馨,趙麗晶,高麗芳,張靈,趙雪儉. 中國老年學(xué)雜志. 2010(09)
博士論文
[1]中藥單體與中藥復(fù)方抑制前列腺癌生長與轉(zhuǎn)移的功能與機制研究[D]. 胡美純.華東師范大學(xué) 2015
[2]大豆異黃酮抑制前列腺增生的作用及其機理研究[D]. 任國峰.中南大學(xué) 2013
[3]油茶蒲減肥降脂功能因子研究[D]. 陳秋平.浙江大學(xué) 2011
[4]小花鬼針草抗前列腺增生活性成分的研究[D]. 李玉蘭.沈陽藥科大學(xué) 2009
[5]抑制良性前列腺增生有效中草藥的篩選及其機理研究[D]. 陳志強.廣西醫(yī)科大學(xué) 2008
[6]前列腺癌與良性前列腺增生差異表達(dá)基因的篩選及相關(guān)研究[D]. 張彤.天津醫(yī)科大學(xué) 2005
碩士論文
[1]油茶蒲抑制5α-還原酶關(guān)鍵組分對BPH-1細(xì)胞的作用及機理初探[D]. 沈駿.浙江大學(xué) 2015
[2]油茶蒲抑制良性前列腺增生活性成分的分離純化及其作用研究[D]. 鄭茜茜.浙江大學(xué) 2014
[3]油茶蒲醇提物抑制5α-還原酶及對前列腺疾病的作用[D]. 羅曉偉.浙江大學(xué) 2011
[4]油茶蒲鞣質(zhì)提取及其降血糖活性研究[D]. 戴甜甜.浙江大學(xué) 2011
[5]油茶蒲提取物抗氧化及抗癌活性研究[D]. 陳亞琪.浙江大學(xué) 2010
[6]油茶蒲多糖的制備、組分分析及抗腫瘤活性初步研究[D]. 康海權(quán).浙江大學(xué) 2010
[7]前列腺增生和前列腺癌細(xì)胞增殖與凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)及相關(guān)性[D]. 方志啟.安徽醫(yī)科大學(xué) 2007
[8]5α-還原酶抑制劑與DU145細(xì)胞生長抑制劑的研究[D]. 董文洪.浙江大學(xué) 2006
本文編號:3508490
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/zhongyaolw/3508490.html
最近更新
教材專著