目的:探討脫氫卡維丁對(duì)過氧化氫（H₂O₂）誘導(dǎo)下MC3T3-E1細(xì)胞凋亡和氧化應(yīng)激損傷的影響及其潛在作用機(jī)制。方法:取處于對(duì)數(shù)生長期的MC3T3-E1細(xì)胞,優(yōu)化H₂O₂氧化損傷細(xì)胞模型的工作液濃度,采用500μmol/L H₂O₂作用MC3T3-E1細(xì)胞建立體外氧化應(yīng)激損傷細(xì)胞模型,以不同濃度（0.001、0.01、0.1μmol/L）脫氫卡維丁進(jìn)行干預(yù),1 mmol/L N-乙酰半胱氨酸作陽性對(duì)照組,使用噻唑藍(lán)（MTT）比色法檢測(cè)其對(duì)于細(xì)胞活力的影響,生化法測(cè)定細(xì)胞中丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）水平,利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞氧化損傷的凋亡程度,RT-PCR和蛋白免疫印跡法檢測(cè)Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表達(dá)。結(jié)果:與對(duì)照組比較,模型組細(xì)胞存活率顯著降低,細(xì)胞MDA、ROS水平及Bax表達(dá)顯著升高,Bcl-2表達(dá)顯著降低。與模型組比較,各給藥組對(duì)H₂O₂誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷得到有效抑制,Bcl-2表達(dá)升... 

【文章來源】：中藥材. 2020,43(02)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

不同濃度的H2O2對(duì)MC3T3細(xì)胞存活率的影響

結(jié)果如圖3所示,與空白對(duì)照組比較,模型組細(xì)胞增殖能力顯著降低,MDA含量顯著升高(P<0.01)。與模型組比較,脫氫卡維丁0.1 μmol/L 組以及N-乙酰半胱氨酸組MC3T3-E1細(xì)胞存活率顯著升高,除脫氫卡維丁0.001 μmol/L 組外,各給藥組MDA含量顯著降低(P<0.05或P<0.01)。3.4 脫氫卡維丁對(duì)H2O2誘導(dǎo)下MC3T3-E1細(xì)胞ROS水平的影響

Hoechst結(jié)果如圖5所示,空白對(duì)照組細(xì)胞核較大,出現(xiàn)均勻的低強(qiáng)度熒光。模型組有大量的高強(qiáng)度的藍(lán)色亮點(diǎn),大量細(xì)胞發(fā)生凋亡。各給藥組有數(shù)目極少強(qiáng)度很高的藍(lán)色亮點(diǎn),與模型組比較凋亡細(xì)胞明顯減少。Annexin V/PI雙染色法結(jié)果如圖6所示,模型組細(xì)胞凋亡比例明顯高于空白對(duì)照組。各給藥組細(xì)胞凋亡比例明顯低于模型組。圖4 脫氫卡維丁對(duì)H2O2誘導(dǎo)下MC3T3-E1細(xì)胞ROS水平的影響(×200)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]四氫小檗堿對(duì)過氧化氫致前成骨細(xì)胞MC3T3-E1氧化損傷的防治作用及機(jī)制探討[J]. 朱建紅,薛照蕓,黃光業(yè),陳健文,石勇輝,伍俊妍.  今日藥學(xué). 2018(10)
[2]脫氫卡維丁的藥理作用及其相關(guān)機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 薛斐倩,王績英.  世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2017(95)
[3]葛根素對(duì)過氧化氫致成骨細(xì)胞氧化損傷的影響[J]. 王昌,湯旭磊,陳克明,張莉,劉偉寧,趙瑾.  中國骨質(zhì)疏松雜志. 2017(11)
[4]丹參素拮抗氧化應(yīng)激所致骨質(zhì)疏松并通過PI3k/Akt通路減少成骨細(xì)胞的凋亡[J]. 王秉義,潘劍.  中國骨質(zhì)疏松雜志. 2017(01)
[5]巖黃連生物堿類成分及其抗氧化活性研究[J]. 何志超,王冬梅,李國成,伍俊妍.  中草藥. 2014(11)



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