目的:本研究以補(bǔ)陽還五湯凍干粉和補(bǔ)陽還五湯含藥血清為受試藥物,以人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞（A549）和人肺成纖維細(xì)胞（HFL1）為受試細(xì)胞,從氣虛血瘀的關(guān)鍵病機(jī)入手,采用體外干預(yù)的方法,研究補(bǔ)陽還五湯凍干粉干預(yù)HMGB1誘導(dǎo)的IP F的分子機(jī)制及對(duì)比含藥血清和凍干粉對(duì)HMGB1誘導(dǎo)的IP F的信號(hào)通路是否表達(dá)一致。方法:1.MTT法檢測(cè)不同濃度補(bǔ)陽還五湯凍干粉對(duì)HFL1、A549細(xì)胞增殖的影響首先使用冷凍技術(shù)制備好補(bǔ)陽還五湯凍干粉,-20℃密封保存。使用時(shí)用超純水復(fù)溶,高溫滅菌后4℃保存。在避光條件下,用P BS將MTT溶解成濃度為5mg/ml的溶液,過濾后分裝-20℃保存?zhèn)溆�。A549細(xì)胞和HFL1細(xì)胞正常培養(yǎng)、傳代、凍存后,將細(xì)胞分為六組,分別為空白對(duì)照組、補(bǔ)陽還五湯凍干粉組（凍干粉終體積分別為5%、10%、15%、20%、25%）,種于96孔板中,37℃、5%CO_2、飽和濕度條件下培養(yǎng),待細(xì)胞融合達(dá)80%-90%后,按照上樣表分組處理細(xì)胞（每組設(shè)置三個(gè)重復(fù)）,加入無血清培養(yǎng)基使各孔終體積均為200ul,培養(yǎng)24小時(shí)后,避光加入MTT溶液,每孔10ul,上述條件繼續(xù)... 

【文章來源】：成都中醫(yī)藥大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

對(duì)比補(bǔ)陽還五湯凍干粉和含藥血清對(duì)HMGB1刺激下HFL1、A549細(xì)胞


本文編號(hào)：3468456