目的:本研究以補陽還五湯凍干粉和補陽還五湯含藥血清為受試藥物,以人非小細胞肺癌細胞（A549）和人肺成纖維細胞（HFL1）為受試細胞,從氣虛血瘀的關(guān)鍵病機入手,采用體外干預的方法,研究補陽還五湯凍干粉干預HMGB1誘導的IP F的分子機制及對比含藥血清和凍干粉對HMGB1誘導的IP F的信號通路是否表達一致。方法:1.MTT法檢測不同濃度補陽還五湯凍干粉對HFL1、A549細胞增殖的影響首先使用冷凍技術(shù)制備好補陽還五湯凍干粉,-20℃密封保存。使用時用超純水復溶,高溫滅菌后4℃保存。在避光條件下,用P BS將MTT溶解成濃度為5mg/ml的溶液,過濾后分裝-20℃保存?zhèn)溆谩549細胞和HFL1細胞正常培養(yǎng)、傳代、凍存后,將細胞分為六組,分別為空白對照組、補陽還五湯凍干粉組（凍干粉終體積分別為5%、10%、15%、20%、25%）,種于96孔板中,37℃、5%CO_2、飽和濕度條件下培養(yǎng),待細胞融合達80%-90%后,按照上樣表分組處理細胞（每組設置三個重復）,加入無血清培養(yǎng)基使各孔終體積均為200ul,培養(yǎng)24小時后,避光加入MTT溶液,每孔10ul,上述條件繼續(xù)... 

【文章來源】：成都中醫(yī)藥大學四川省

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

對比補陽還五湯凍干粉和含藥血清對HMGB1刺激下HFL1、A549細胞


本文編號：3468456