目的:研究穿心蓮內(nèi)酯（andrographolide,AND）對(duì)急性淋巴細(xì)胞白血�。╝cute lymphoblastic leukemia,ALL）細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡的影響。方法:人ALL細(xì)胞株CEM-C1經(jīng)AND處理12 h、24 h和48 h,應(yīng)用CCK-8法檢測(cè)AND對(duì)細(xì)胞活力的影響;應(yīng)用Wright-Giemsa染色法觀(guān)察AND處理24 h對(duì)CEM-C1細(xì)胞形態(tài)及數(shù)量的影響;應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)+annexin V-FITC/碘化丙啶（propidium iodide,PI）雙染色法分析AND作用24 h對(duì)CEM-C1細(xì)胞凋亡的作用;采用流式細(xì)胞術(shù)+PI染色法分析AND作用24 h對(duì)CEM-C1細(xì)胞周期分布的作用;用Western blot法檢測(cè)AND對(duì)CEM-C1細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白水平的影響;應(yīng)用JC-1線(xiàn)粒體膜電位（mitochondrial membrane potential,MMP）檢測(cè)試劑盒檢測(cè)AND作用24 h對(duì)CEM-C1細(xì)胞MMP的影響。最后將CEM-C1細(xì)胞接種于BALB/c-nu雌性裸鼠右脅腹側(cè)建立裸鼠ALL移植瘤模型,通過(guò)檢測(cè)腫瘤體積及重量觀(guān)察AND的體內(nèi)抗ALL... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)病理生理雜志. 2020,36(06)北大核心CSCD

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AND對(duì)ALL細(xì)胞移植瘤模型的體內(nèi)生長(zhǎng)抑制作用

圖3 AND對(duì)CEM-C1細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白水平的影響為驗(yàn)證AND誘導(dǎo)CEM-C1細(xì)胞凋亡的效應(yīng)，我們應(yīng)用Western blot法檢測(cè)應(yīng)用AND后CEM-C1細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的情況。作為caspase家族的關(guān)鍵因子，caspase-3和caspase-7是凋亡被誘導(dǎo)的過(guò)程中最主要的效應(yīng)凋亡蛋白酶，其活化可誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡[14];cleaved caspase-3和cleaved caspase-7分別是caspase-3和caspase-7活化過(guò)程中經(jīng)剪切產(chǎn)生的活性片段，其活化程度及其與caspase-3和caspase-7的比值越高，細(xì)胞凋亡越明顯[15-16]。在本研究中，AND劑量依賴(lài)性地升高caspase-3、caspase-7、cleaved cas?pase-3、cleaved caspase-7、cleaved caspase-3/caspase-3和cleaved caspase-7/caspase-7的水平。在此基礎(chǔ)上，我們進(jìn)一步觀(guān)察AND對(duì)凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和Bax的調(diào)控作用。Bcl-2蛋白通過(guò)抑制促細(xì)胞凋亡家族成員Bax的激活來(lái)阻止細(xì)胞凋亡[17]。而作為預(yù)測(cè)抗腫瘤藥物臨床療效的指標(biāo)之一，Bax/Bcl-2的比值與腫瘤緩解率成正比[18]。本研究表明，AND下調(diào)CEM-C1細(xì)胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)，上調(diào)促凋亡蛋白Bax的表達(dá)，提高Bax/Bcl-2的比值，從而抑制ALL細(xì)胞生長(zhǎng)。

AND處理細(xì)胞24 h后，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果證明，隨著藥物濃度的增加，處于第2、4象限的細(xì)胞數(shù)增多，即凋亡細(xì)胞數(shù)量增多；對(duì)3次實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行定量分析，結(jié)果顯示，8μmol/L AND處理24 h后，CEM-C1細(xì)胞的凋亡率與空白對(duì)照組相比顯著升高（P<0.05），見(jiàn)圖2A。AND處理24 h后，隨著藥物AND濃度增大，停留在G2期的細(xì)胞增加，證明細(xì)胞周期被阻滯在G2期，細(xì)胞的生長(zhǎng)被抑制，見(jiàn)圖2B。3 AND對(duì)凋亡相關(guān)蛋白的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]沉默F(xiàn)oxM1通過(guò)促進(jìn)線(xiàn)粒體釋放細(xì)胞色素C誘導(dǎo)口腔鱗癌細(xì)胞凋亡[J]. 王曉庚,劉林,左健,張非煜,李若萱.  中國(guó)病理生理雜志. 2019(03)
[2]RASA1在胰腺癌中的異常表達(dá)及其臨床意義[J]. 秦玉璇,李東風(fēng),張世能,段伊帆,謝子鈞,李子俊.  中國(guó)病理生理雜志. 2012(06)



本文編號(hào)：3365799