雷公藤紅素基于蛋白酶體抑制活性誘導(dǎo)多發(fā)性骨髓瘤凋亡研究
發(fā)布時(shí)間：2021-08-22 09:02
多發(fā)性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）是漿細(xì)胞異常增生的惡性腫瘤,伴隨免疫球蛋白的急劇產(chǎn)生,蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊的機(jī)會(huì)更多,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)處于應(yīng)激狀態(tài)。為緩解這種壓力,MM細(xì)胞高度依賴(lài)于蛋白酶體,以便移除錯(cuò)誤折疊蛋白,維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)。MM細(xì)胞的這種特征也成為其治療靶點(diǎn),例如:當(dāng)硼替佐米（Bortezomib）抑制蛋白酶體,上述錯(cuò)誤折疊蛋白不能被降解、滯留于胞質(zhì),導(dǎo)致過(guò)度的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、誘導(dǎo)MM細(xì)胞凋亡,這是MM細(xì)胞對(duì)蛋白酶體抑制劑尤為敏感的重要原因。盡管蛋白酶體抑制劑是治療MM的革命性藥物,但其仍有局限,例如:部分患者伴有原發(fā)耐藥或者藥物治療過(guò)程中出現(xiàn)繼發(fā)耐藥;治療窗口窄、存在劑量限制性等不良反應(yīng)。因此,針對(duì)蛋白酶體抑制劑耐藥機(jī)制進(jìn)行研究或繼續(xù)發(fā)現(xiàn)新的蛋白酶體抑制劑是MM研究領(lǐng)域的重點(diǎn)和難點(diǎn)。雷公藤紅素（Celastrol,Cel）為醌甲基三萜類(lèi)化合物,其顯著的抗癌活性引起了廣泛關(guān)注。有研究提示Celastrol可抑制兔源蛋白酶體活性,可能與抑制人前列腺癌細(xì)胞效應(yīng)有關(guān)。但上述研究缺乏直接基于人蛋白酶體活性抑制數(shù)據(jù),且在MM細(xì)胞以及移植瘤組織中是否能發(fā)揮蛋白酶體抑制活性仍然未知。目的本研究...
【文章來(lái)源】：成都醫(yī)學(xué)院四川省
【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
基于分子水平Celastrol對(duì)20S蛋白酶體β1、β2和β5亞基的抑制活性Fig.1-2Celastrolinhibitstheβ1,β2andβ5activityofthe20Sproteasomeatthemolecular
圖 1-2 基于分子水平 Celastrol 對(duì) 20S 蛋白酶體β1、β2 和β5 亞基的抑制活性Fig.1-2 Celastrol inhibits the β1, β2 and β5 activity of the 20S proteasome at the molecular注：Celastrol 抑制純化人 20S 蛋白酶體β1、β2 和β5 亞基的活性，不同濃度(0.78、1.56、3.12、6.25、12.5、25、50、100 μM)的 Celastrol 分別作用于熒光底物(Z)‐LLE‐AMC，Bz‐VGR‐AMC和 Suc‐Leu‐Leu‐Val‐Tyr‐AMC，反應(yīng) 1 h，檢測(cè) Celastrol 對(duì)純化人 20S 蛋白酶體β1、β2、β5 亞基活性的影響,數(shù)據(jù)由 x ± s 表示。3.2 細(xì)胞水平檢測(cè)結(jié)果本研究測(cè)定不同濃度 Celastrol 對(duì) MM.1S 細(xì)胞蛋白酶體β1、β2、β5 亞基的抑制情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：Celastrol 能有效抑制人蛋白酶體β1、β2、β5 亞基的活性，其 IC50 分別為 2.3、2.1 和 0.9 μM，結(jié)果如圖 1-3。
圖 2-1 Celastrol 抑制 MM 細(xì)胞增殖Figure.2-1 Celastrol inhibits MM cell proliferation：用不同濃度的 Celastrol 分別處理 MM.1S、MM.1R、RPMI8226、U266 細(xì)胞 48 小時(shí)，通 CCK-8 法測(cè)定其增殖抑制效應(yīng)，GI50 值范圍為 0.52 至 1.14 μM，結(jié)果由三次不同實(shí)驗(yàn)的 s 表示，（*p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001）具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.2 Annexin V 與 PI 雙染實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過(guò) Annexin V 和 PI 的染色結(jié)果顯示 Celastrol 能誘導(dǎo) MM.1S、MM.1R、RPMI8226、U266 細(xì)胞凋亡 ；當(dāng)給予 500 nM Celastrol，藥物作用 8 h，MM.1S、MM.1R、RPMI8226 和 U266 細(xì)胞的凋亡率分別是 35.5%、35.1%、26.6%和 40.9%給予 250 nM Celastrol，凋亡率分別是 6.3%、6.8%、15.3%和 26.8%；而空白對(duì)照（DMSO）中各細(xì)胞的凋亡率分別為 MM.1S（4.6%）、MM.1R（5.3%）、RPMI822（12.8%）和 U266（12.5%），結(jié)果如圖 2-2。
本文編號(hào)：3357445
【文章來(lái)源】：成都醫(yī)學(xué)院四川省
【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
基于分子水平Celastrol對(duì)20S蛋白酶體β1、β2和β5亞基的抑制活性Fig.1-2Celastrolinhibitstheβ1,β2andβ5activityofthe20Sproteasomeatthemolecular
圖 1-2 基于分子水平 Celastrol 對(duì) 20S 蛋白酶體β1、β2 和β5 亞基的抑制活性Fig.1-2 Celastrol inhibits the β1, β2 and β5 activity of the 20S proteasome at the molecular注：Celastrol 抑制純化人 20S 蛋白酶體β1、β2 和β5 亞基的活性，不同濃度(0.78、1.56、3.12、6.25、12.5、25、50、100 μM)的 Celastrol 分別作用于熒光底物(Z)‐LLE‐AMC，Bz‐VGR‐AMC和 Suc‐Leu‐Leu‐Val‐Tyr‐AMC，反應(yīng) 1 h，檢測(cè) Celastrol 對(duì)純化人 20S 蛋白酶體β1、β2、β5 亞基活性的影響,數(shù)據(jù)由 x ± s 表示。3.2 細(xì)胞水平檢測(cè)結(jié)果本研究測(cè)定不同濃度 Celastrol 對(duì) MM.1S 細(xì)胞蛋白酶體β1、β2、β5 亞基的抑制情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：Celastrol 能有效抑制人蛋白酶體β1、β2、β5 亞基的活性，其 IC50 分別為 2.3、2.1 和 0.9 μM，結(jié)果如圖 1-3。
圖 2-1 Celastrol 抑制 MM 細(xì)胞增殖Figure.2-1 Celastrol inhibits MM cell proliferation：用不同濃度的 Celastrol 分別處理 MM.1S、MM.1R、RPMI8226、U266 細(xì)胞 48 小時(shí)，通 CCK-8 法測(cè)定其增殖抑制效應(yīng)，GI50 值范圍為 0.52 至 1.14 μM，結(jié)果由三次不同實(shí)驗(yàn)的 s 表示，（*p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001）具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.2 Annexin V 與 PI 雙染實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過(guò) Annexin V 和 PI 的染色結(jié)果顯示 Celastrol 能誘導(dǎo) MM.1S、MM.1R、RPMI8226、U266 細(xì)胞凋亡 ；當(dāng)給予 500 nM Celastrol，藥物作用 8 h，MM.1S、MM.1R、RPMI8226 和 U266 細(xì)胞的凋亡率分別是 35.5%、35.1%、26.6%和 40.9%給予 250 nM Celastrol，凋亡率分別是 6.3%、6.8%、15.3%和 26.8%；而空白對(duì)照（DMSO）中各細(xì)胞的凋亡率分別為 MM.1S（4.6%）、MM.1R（5.3%）、RPMI822（12.8%）和 U266（12.5%），結(jié)果如圖 2-2。
本文編號(hào)：3357445
本文鏈接：http://sikaile.net/yixuelunwen/zhongyaolw/3357445.html
最近更新
教材專(zhuān)著
