第一章積雪草酸對乳酸誘導的心肌細胞損傷的保護作用及機制研究目的:研究積雪草酸（Asiatic acid,AA）對乳酸（Lactate）誘導的心肌細胞損傷的保護作用,并探討其可能的機制。方法:1.體外培養(yǎng)新生乳大鼠的原代心肌細胞,采用CCK-8法測定不同濃度AA（0、5、10、20、30μmol/L）和 Lactate（0、2.5、5、10、20、40mmol/L）對心肌細胞活力的影響。本實驗中采用Lactate（20 mmol/L）刺激心肌細胞24 h來建立心肌細胞Lactate損傷模型,研究AA（20 μmol/L）預處理24 h對心肌細胞Lactate損傷的保護作用和機制。2.實驗分為4組:①正常對照組（Control組）:不加Lactate和AA處理;②AA組:細胞中只加AA（20μmol/L）預處理24h;③Lactate組:細胞只加Lactate（20 mmol/L）處理 24h;④Lactate+AA 組:AA（20μmol/L）預處理 24h,再加 Lactate（20 mmol/L）處理 24 h。3.經(jīng)DCFH-DA染色,用流式細胞儀檢測細胞內(nèi)活性氧（Reactive... 

【文章來源】：蘇州大學江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．心肌細胞活力檢測

與單純Ｌａｃｔａｔｅ刺激組相比，％＜?０．０１，＜０．００１。??二、各組心肌細胞內(nèi)ＲＯＳ濃度比較??如圖２所示，流式細胞儀檢測結果表明，Ｌａｃｔａｔｅ?（２０?ｍＭ）刺激２４?ｈ后，心肌細??胞內(nèi)ＲＯＳ濃度與Ｃｏｎｔｒｏ丨組比較顯著升高（Ｐ＜０．００１）。ＡＡ?（２０ｐＭ）預處理２４ｈ，再??加Ｌａｃｔａｔｅ?（２０?ｍＭ）刺激２４?ｈ，心肌細胞內(nèi)ＲＯＳ濃度顯著低于Ｌａｃｔａｔｅ組（ＰＣ０．００１?）。??另外，單純ＡＡ?（２０?＾Ｍ）預處理２４?ｈ對正常心肌細胞內(nèi)Ｒ０Ｓ濃度并無顯著影響。??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＡＡ??；１?：?ｉ?｜?，丨?＿??１０１?１０＇?１（Ｈ?１０？?，０＿?１ｔ＞？?１０＇?§?３〇．??＊＊＊??〇?Ｌａｃｔａｔｅ?Ｌａｃｔａｔｅ＋ＡＡ?Ｊ??Ａ＂?Ｉ?廠「?＿?？??■?Ｌａｃｔａｔｅ?ｍＭ｝?－?－?＋?＋??」?Ｊ＾Ｂ?Ａｓｉａｔｉｃ?ａｃｉｄ?（２０?＞ｉＭ）?－?＋?？?＋??ｌｙ?？＇?ｉｃ＾?ｉｃ＂?ｉｏ＇???＞??ＤＣＦ－ＤＡ??圖２．各組心肌細胞內(nèi)ＲＯＳ濃度。與對照組相比，＊＊＊Ｐ?＜０．００１；與Ｌａｃｔａｔｅ組相??比，＿Ｐ?＜０．００１。??１７??

積雪草酸對小鼠心肌細胞凋亡和心力衰竭的保護作用及其機制研究??三、各組心肌細胞線粒體膜電位的比較??如圖３Ａ所示，焚光顯微鏡觀察各組心肌細胞線粒體膜電位（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ??ｍｅｍｂｒａｎｅ?ｐｏｔｅｎｔｉａｌ），Ｌａｃｔａｔｅ?（２０?ｍＭ）刺激心肌細胞２４?ｈ后，線粒體綠色焚光顯著??增多，表明線粒體膜電位顯著下降。ＡＡ?（２０?ｊｉＭ）預處理２４?ｈ，再加Ｌａｃｔａｔｅ?（２０?ｍＭ）??刺激心肌細胞２４?ｈ，線粒體綠色熒光顯著減少，表明線粒體膜電位上升。與此同時，??流式細胞儀檢測結果顯示，Ｌａｃｔａｔｅ組低線粒體膜電位的心肌細胞比例顯著高于??Ｃｏｎｔｒｏｌ組（Ｐ＜０．００１）。與Ｌａｃｔａｔｅ組相比，Ｌａｃｔａｔｅ＋ＡＡ組低線粒體膜電位的細胞比例??顯著降低（Ｐ＜〇．〇〇ｌ?），說明ＡＡ預處理可以阻止Ｌａｃｔａｔｅ損傷引起的心肌細胞線粒體??膜電位降低（圖３Ｂ）。另外，單純ＡＡ?（２０?ｐＭ）預處理２４?ｈ對正常心肌細胞線粒體??膜電位并無顯著影響。??Ａ?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＡＡ?Ｌａｃｔａｔｅ?Ｌａｃｔａｔｅ＋ＡＡ??－Ｍｌ?Ｈｉ??■＾■１?ＨＨ?Ｈｈｈ??Ｂ???Ｃｏｎｔｒｏｌ???ＡＡ???」?Ｉ??．ＤｌＪｔ／Ｕ?ｉｉａ?ａ??芒?Ｉｆｆ２?１０：?ｔ〇ｚ?１〇５?１０ｓ?１０’?１〇２?１０３?ｓ?．ＣＤ?＿??３?Ｊ?？§?２０－?丁??Ｑ?Ｌａｃｔａｔｅ?Ｌａｃｔａｔｅ＋ＡＡ?ｇ?ｇ?丨穩(wěn)瞻：贊??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]《中國心血管病報告2014》概要[J]. 陳偉偉,高潤霖,劉力生,朱曼璐,王文,王擁軍,吳兆蘇,李惠君,鄭哲,蔣立新,胡盛壽.  中國循環(huán)雜志. 2015(07)
[2]積雪草酸及其衍生物的生物活性研究概況[J]. 陳軍,華維一,孫宏斌.  中草藥. 2006(03)
[3]積雪草化學成分研究[J]. 張蕾磊,王海生,姚慶強,劉擁軍,欒陽,王秀麗.  中草藥. 2005(12)
[4]中國心力衰竭流行病學調(diào)查及其患病率[J]. 顧東風,黃廣勇,吳錫桂,段秀芳,何江,Paul K Whelton,Stephen Mac Mahon.  中華心血管病雜志. 2003(01)
[5]中國部分地區(qū)1980、1990、2000年慢性心力衰竭住院病例回顧性調(diào)查[J]. 程康安,吳寧.  中華心血管病雜志. 2002(08)



本文編號：3330281