第一章積雪草酸對(duì)乳酸誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究目的:研究積雪草酸（Asiatic acid,AA）對(duì)乳酸（Lactate）誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞損傷的保護(hù)作用,并探討其可能的機(jī)制。方法:1.體外培養(yǎng)新生乳大鼠的原代心肌細(xì)胞,采用CCK-8法測(cè)定不同濃度AA（0、5、10、20、30μmol/L）和 Lactate（0、2.5、5、10、20、40mmol/L）對(duì)心肌細(xì)胞活力的影響。本實(shí)驗(yàn)中采用Lactate（20 mmol/L）刺激心肌細(xì)胞24 h來(lái)建立心肌細(xì)胞Lactate損傷模型,研究AA（20 μmol/L）預(yù)處理24 h對(duì)心肌細(xì)胞Lactate損傷的保護(hù)作用和機(jī)制。2.實(shí)驗(yàn)分為4組:①正常對(duì)照組（Control組）:不加Lactate和AA處理;②AA組:細(xì)胞中只加AA（20μmol/L）預(yù)處理24h;③Lactate組:細(xì)胞只加Lactate（20 mmol/L）處理 24h;④Lactate+AA 組:AA（20μmol/L）預(yù)處理 24h,再加 Lactate（20 mmol/L）處理 24 h。3.經(jīng)DCFH-DA染色,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧（Reactive... 

【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．心肌細(xì)胞活力檢測(cè)

與單純Ｌａｃｔａｔｅ刺激組相比，％＜?０．０１，＜０．００１。??二、各組心肌細(xì)胞內(nèi)ＲＯＳ濃度比較??如圖２所示，流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果表明，Ｌａｃｔａｔｅ?（２０?ｍＭ）刺激２４?ｈ后，心肌細(xì)??胞內(nèi)ＲＯＳ濃度與Ｃｏｎｔｒｏ丨組比較顯著升高（Ｐ＜０．００１）。ＡＡ?（２０ｐＭ）預(yù)處理２４ｈ，再??加Ｌａｃｔａｔｅ?（２０?ｍＭ）刺激２４?ｈ，心肌細(xì)胞內(nèi)ＲＯＳ濃度顯著低于Ｌａｃｔａｔｅ組（ＰＣ０．００１?）。??另外，單純ＡＡ?（２０?＾Ｍ）預(yù)處理２４?ｈ對(duì)正常心肌細(xì)胞內(nèi)Ｒ０Ｓ濃度并無(wú)顯著影響。??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＡＡ??；１?：?ｉ?｜?，丨?＿??１０１?１０＇?１（Ｈ?１０？?，０＿?１ｔ＞？?１０＇?§?３〇．??＊＊＊??〇?Ｌａｃｔａｔｅ?Ｌａｃｔａｔｅ＋ＡＡ?Ｊ??Ａ＂?Ｉ?廠「?＿?？??■?Ｌａｃｔａｔｅ?ｍＭ｝?－?－?＋?＋??」?Ｊ＾Ｂ?Ａｓｉａｔｉｃ?ａｃｉｄ?（２０?＞ｉＭ）?－?＋?？?＋??ｌｙ?？＇?ｉｃ＾?ｉｃ＂?ｉｏ＇???＞??ＤＣＦ－ＤＡ??圖２．各組心肌細(xì)胞內(nèi)ＲＯＳ濃度。與對(duì)照組相比，＊＊＊Ｐ?＜０．００１；與Ｌａｃｔａｔｅ組相??比，＿Ｐ?＜０．００１。??１７??

積雪草酸對(duì)小鼠心肌細(xì)胞凋亡和心力衰竭的保護(hù)作用及其機(jī)制研究??三、各組心肌細(xì)胞線粒體膜電位的比較??如圖３Ａ所示，焚光顯微鏡觀察各組心肌細(xì)胞線粒體膜電位（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ??ｍｅｍｂｒａｎｅ?ｐｏｔｅｎｔｉａｌ），Ｌａｃｔａｔｅ?（２０?ｍＭ）刺激心肌細(xì)胞２４?ｈ后，線粒體綠色焚光顯著??增多，表明線粒體膜電位顯著下降。ＡＡ?（２０?ｊｉＭ）預(yù)處理２４?ｈ，再加Ｌａｃｔａｔｅ?（２０?ｍＭ）??刺激心肌細(xì)胞２４?ｈ，線粒體綠色熒光顯著減少，表明線粒體膜電位上升。與此同時(shí)，??流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示，Ｌａｃｔａｔｅ組低線粒體膜電位的心肌細(xì)胞比例顯著高于??Ｃｏｎｔｒｏｌ組（Ｐ＜０．００１）。與Ｌａｃｔａｔｅ組相比，Ｌａｃｔａｔｅ＋ＡＡ組低線粒體膜電位的細(xì)胞比例??顯著降低（Ｐ＜〇．〇〇ｌ?），說(shuō)明ＡＡ預(yù)處理可以阻止Ｌａｃｔａｔｅ損傷引起的心肌細(xì)胞線粒體??膜電位降低（圖３Ｂ）。另外，單純ＡＡ?（２０?ｐＭ）預(yù)處理２４?ｈ對(duì)正常心肌細(xì)胞線粒體??膜電位并無(wú)顯著影響。??Ａ?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＡＡ?Ｌａｃｔａｔｅ?Ｌａｃｔａｔｅ＋ＡＡ??－Ｍｌ?Ｈｉ??■＾■１?ＨＨ?Ｈｈｈ??Ｂ???Ｃｏｎｔｒｏｌ???ＡＡ???」?Ｉ??．ＤｌＪｔ／Ｕ?ｉｉａ?ａ??芒?Ｉｆｆ２?１０：?ｔ〇ｚ?１〇５?１０ｓ?１０’?１〇２?１０３?ｓ?．ＣＤ?＿??３?Ｊ?？§?２０－?丁??Ｑ?Ｌａｃｔａｔｅ?Ｌａｃｔａｔｅ＋ＡＡ?ｇ?ｇ?丨穩(wěn)瞻：贊??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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