目的本研究通過體內(nèi)與體外實(shí)驗(yàn)。探討了何首烏生品及不同炮制品“時(shí)（炮制時(shí)間）-效-毒”的相關(guān)性,采用HPLC技術(shù)、細(xì)胞流式儀并且結(jié)合血液生化指標(biāo)、免疫組化及PCR技術(shù),對(duì)何首烏生品及不同時(shí)間炮制品的主要成分以及一些相關(guān)性指標(biāo)的變化進(jìn)行研究,并為臨床正確用藥提供理論支持。方法1.采用HPLC的方法,用色譜柱:HYPERSIL GOLD AQ 5UM（250*4.6MM）COLUMN。甲醇為A相,0.1%的甲酸水為B相進(jìn)行梯度洗脫,0¹9min,10%³6%A,90%⁶3%B;19³0min,36%⁷1%A,63%²9%B;30⁵0min,71%¹00%A,29%⁰%B;50⁶0min,100%A。色譜柱溫度:35℃;檢測(cè)波長(zhǎng):254 nm;流速:1.0 ml/min;進(jìn)樣量為10μL的方法對(duì)何首烏不同炮制品中蒽醌類、沒食子酸及二苯乙烯苷成分的含量進(jìn)行檢測(cè)。2.取42只SD大... 

【文章來源】：陜西中醫(yī)藥大學(xué)陜西省

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

何首烏幾種不同炮制品4中成分色譜圖（1.沒食子酸2.二苯乙烯苷3.大黃素4.大黃素甲醚）

陜西中醫(yī)藥大學(xué) 2019 屆碩士學(xué)位論文表 1 含藥血清對(duì) HepG2 細(xì)胞存活率的影響別 OD 值 存活率（%血清組 0.504±0.122 98.67白組 0.482±0.069 95.46烏組 0.246±0.107**48.90 8h 組 0.285±0.063**56.60 16h 組 0.318±0.028**#63.13 32h 組 0.329±0.071**#65.39 48h 組 0.373±0.067**#74.18 72h 組 0.395±0.075**#78.41比較，**P<0.01，*P<0.05；與生首烏組比較，##P<0.01，#P<0.05。

A.空白對(duì)照組；B.生首烏組；C-G.清蒸 8h、16h、32h、48h、72h 組圖 1 含藥血清對(duì) HepG2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響3.3 何首烏不同炮制品含藥血清對(duì) HepG2 細(xì)胞凋亡的影響在給藥培養(yǎng) 24h 后的六孔板中，用不含 EDTA 的胰酶將照 AnnexinV-PI 試劑盒說明書進(jìn)行操作后進(jìn)行檢測(cè)。細(xì)胞流式現(xiàn)不同程度的早期和晚期凋亡還有細(xì)胞壞死，空白大鼠血清組統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），說明 10%的胎牛血清和 15%的空白大鼠而生首烏組、清蒸清蒸 8h、16h、32h、48h 及 72h 組與空白組學(xué)的差異（P<0.01），主要出現(xiàn)在 AV+、PI-區(qū)域，說明清蒸血清都會(huì)使 HepG2 細(xì)胞產(chǎn)生相應(yīng)的凋亡。清蒸組與生首烏組統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。流式儀檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)：AV-、PI-區(qū)域表示PI-區(qū)域表示的早期凋亡的細(xì)胞；AV-、PI+區(qū)域表示的是壞死的表示的晚期凋亡的細(xì)胞。如圖 2 所示：

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]基于肝細(xì)胞毒價(jià)檢測(cè)的何首烏質(zhì)量控制方法研究[D]. 呂旸.北京化工大學(xué) 2013
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本文編號(hào)：3324012