基于何首烏炮制“時-效-毒”變化規(guī)律的肝損傷機制及物質基礎研究
發(fā)布時間：2021-08-05 15:36
目的本研究通過體內(nèi)與體外實驗。探討了何首烏生品及不同炮制品“時（炮制時間）-效-毒”的相關性,采用HPLC技術、細胞流式儀并且結合血液生化指標、免疫組化及PCR技術,對何首烏生品及不同時間炮制品的主要成分以及一些相關性指標的變化進行研究,并為臨床正確用藥提供理論支持。方法1.采用HPLC的方法,用色譜柱:HYPERSIL GOLD AQ 5UM（250*4.6MM）COLUMN。甲醇為A相,0.1%的甲酸水為B相進行梯度洗脫,019min,10%36%A,90%63%B;1930min,36%71%A,63%29%B;3050min,71%100%A,29%0%B;5060min,100%A。色譜柱溫度:35℃;檢測波長:254 nm;流速:1.0 ml/min;進樣量為10μL的方法對何首烏不同炮制品中蒽醌類、沒食子酸及二苯乙烯苷成分的含量進行檢測。2.取42只SD大...
【文章來源】：陜西中醫(yī)藥大學陜西省
【文章頁數(shù)】：51 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
何首烏幾種不同炮制品4中成分色譜圖（1.沒食子酸2.二苯乙烯苷3.大黃素4.大黃素甲醚）
陜西中醫(yī)藥大學 2019 屆碩士學位論文表 1 含藥血清對 HepG2 細胞存活率的影響別 OD 值 存活率（%血清組 0.504±0.122 98.67白組 0.482±0.069 95.46烏組 0.246±0.107**48.90 8h 組 0.285±0.063**56.60 16h 組 0.318±0.028**#63.13 32h 組 0.329±0.071**#65.39 48h 組 0.373±0.067**#74.18 72h 組 0.395±0.075**#78.41比較，**P<0.01，*P<0.05；與生首烏組比較，##P<0.01，#P<0.05。
A.空白對照組；B.生首烏組；C-G.清蒸 8h、16h、32h、48h、72h 組圖 1 含藥血清對 HepG2 細胞形態(tài)學的影響3.3 何首烏不同炮制品含藥血清對 HepG2 細胞凋亡的影響在給藥培養(yǎng) 24h 后的六孔板中，用不含 EDTA 的胰酶將照 AnnexinV-PI 試劑盒說明書進行操作后進行檢測。細胞流式現(xiàn)不同程度的早期和晚期凋亡還有細胞壞死，空白大鼠血清組統(tǒng)計學差異（P>0.05），說明 10%的胎牛血清和 15%的空白大鼠而生首烏組、清蒸清蒸 8h、16h、32h、48h 及 72h 組與空白組學的差異（P<0.01），主要出現(xiàn)在 AV+、PI-區(qū)域，說明清蒸血清都會使 HepG2 細胞產(chǎn)生相應的凋亡。清蒸組與生首烏組統(tǒng)計學差異（P<0.01）。流式儀檢測的標準：AV-、PI-區(qū)域表示PI-區(qū)域表示的早期凋亡的細胞；AV-、PI+區(qū)域表示的是壞死的表示的晚期凋亡的細胞。如圖 2 所示：
【參考文獻】：
期刊論文
[1]何首烏中相關蒽醌類化合物抗癌作用的研究進展[J]. 朱藝,李琛,李洪亮,汪選斌. 中國實驗方劑學雜志. 2019(18)
[2]何首烏的臨床應用及其相關肝損傷的研究進展[J]. 陶麗宇,高月求,王建茹,周昕. 湖南中醫(yī)雜志. 2018(11)
[3]Cocktail法評價敵敵畏對大鼠CYP450亞型酶活性的影響[J]. 李君樺,吳海亞,陳東鑫,耿培武,莊開贊,周華. 中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2018(16)
[4]何首烏不同提取物致大鼠肝損傷的血清生物標志物研究[J]. 段小芳,段思明,李賀芝,王茜. 河北中醫(yī)藥學報. 2018(04)
[5]川芎嗪誘導小鼠肝藥酶Cyp3a11的作用及其機制研究[J]. 張軼雯,鐘里科,樓倩雯,潘宗富,方羅,黃萍. 中國現(xiàn)代應用藥學. 2018(07)
[6]大黃蒽醌類化學成分和藥理作用研究進展[J]. 王亦君,馮舒涵,程錦堂,陳莎. 中國實驗方劑學雜志. 2018(13)
[7]何首烏化學成分和藥理作用[J]. 趙明宇. 北方藥學. 2018(03)
[8]何首烏不同炮制品水提物對小鼠急性毒性實驗研究[J]. 王燕青,石亮,呂莉莉,黃娜娜,郭欣,蔡濤濤,李曉宇,孫蓉. 中國藥物警戒. 2017(10)
[9]肝臟藥物代謝酶CYP450與中藥肝毒性的關系[J]. 侯健,孫娥,宋捷,楊蕾,張振海,寧青,賈曉斌. 中國中藥雜志. 2016(15)
[10]何首烏下調(diào)1型糖尿病大鼠MLCK表達及其對認知功能的影響[J]. 任智晶,羅武,朱麗英,何玉,常嘯,潘衛(wèi),李興. 時珍國醫(yī)國藥. 2015(06)
博士論文
[1]何首烏致肝損傷成分及作用機制研究[D]. 林龍飛.北京中醫(yī)藥大學 2016
碩士論文
[1]基于肝細胞毒價檢測的何首烏質量控制方法研究[D]. 呂旸.北京化工大學 2013
[2]廣西何首烏中蒽醌類化合物GXHSWAQ-1單體對鼻咽癌的放射增敏作用及其機制[D]. 劉瑛.廣西醫(yī)科大學 2009
本文編號：3324012
【文章來源】：陜西中醫(yī)藥大學陜西省
【文章頁數(shù)】：51 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
何首烏幾種不同炮制品4中成分色譜圖（1.沒食子酸2.二苯乙烯苷3.大黃素4.大黃素甲醚）
陜西中醫(yī)藥大學 2019 屆碩士學位論文表 1 含藥血清對 HepG2 細胞存活率的影響別 OD 值 存活率（%血清組 0.504±0.122 98.67白組 0.482±0.069 95.46烏組 0.246±0.107**48.90 8h 組 0.285±0.063**56.60 16h 組 0.318±0.028**#63.13 32h 組 0.329±0.071**#65.39 48h 組 0.373±0.067**#74.18 72h 組 0.395±0.075**#78.41比較，**P<0.01，*P<0.05；與生首烏組比較，##P<0.01，#P<0.05。
A.空白對照組；B.生首烏組；C-G.清蒸 8h、16h、32h、48h、72h 組圖 1 含藥血清對 HepG2 細胞形態(tài)學的影響3.3 何首烏不同炮制品含藥血清對 HepG2 細胞凋亡的影響在給藥培養(yǎng) 24h 后的六孔板中，用不含 EDTA 的胰酶將照 AnnexinV-PI 試劑盒說明書進行操作后進行檢測。細胞流式現(xiàn)不同程度的早期和晚期凋亡還有細胞壞死，空白大鼠血清組統(tǒng)計學差異（P>0.05），說明 10%的胎牛血清和 15%的空白大鼠而生首烏組、清蒸清蒸 8h、16h、32h、48h 及 72h 組與空白組學的差異（P<0.01），主要出現(xiàn)在 AV+、PI-區(qū)域，說明清蒸血清都會使 HepG2 細胞產(chǎn)生相應的凋亡。清蒸組與生首烏組統(tǒng)計學差異（P<0.01）。流式儀檢測的標準：AV-、PI-區(qū)域表示PI-區(qū)域表示的早期凋亡的細胞；AV-、PI+區(qū)域表示的是壞死的表示的晚期凋亡的細胞。如圖 2 所示：
【參考文獻】：
期刊論文
[1]何首烏中相關蒽醌類化合物抗癌作用的研究進展[J]. 朱藝,李琛,李洪亮,汪選斌. 中國實驗方劑學雜志. 2019(18)
[2]何首烏的臨床應用及其相關肝損傷的研究進展[J]. 陶麗宇,高月求,王建茹,周昕. 湖南中醫(yī)雜志. 2018(11)
[3]Cocktail法評價敵敵畏對大鼠CYP450亞型酶活性的影響[J]. 李君樺,吳海亞,陳東鑫,耿培武,莊開贊,周華. 中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2018(16)
[4]何首烏不同提取物致大鼠肝損傷的血清生物標志物研究[J]. 段小芳,段思明,李賀芝,王茜. 河北中醫(yī)藥學報. 2018(04)
[5]川芎嗪誘導小鼠肝藥酶Cyp3a11的作用及其機制研究[J]. 張軼雯,鐘里科,樓倩雯,潘宗富,方羅,黃萍. 中國現(xiàn)代應用藥學. 2018(07)
[6]大黃蒽醌類化學成分和藥理作用研究進展[J]. 王亦君,馮舒涵,程錦堂,陳莎. 中國實驗方劑學雜志. 2018(13)
[7]何首烏化學成分和藥理作用[J]. 趙明宇. 北方藥學. 2018(03)
[8]何首烏不同炮制品水提物對小鼠急性毒性實驗研究[J]. 王燕青,石亮,呂莉莉,黃娜娜,郭欣,蔡濤濤,李曉宇,孫蓉. 中國藥物警戒. 2017(10)
[9]肝臟藥物代謝酶CYP450與中藥肝毒性的關系[J]. 侯健,孫娥,宋捷,楊蕾,張振海,寧青,賈曉斌. 中國中藥雜志. 2016(15)
[10]何首烏下調(diào)1型糖尿病大鼠MLCK表達及其對認知功能的影響[J]. 任智晶,羅武,朱麗英,何玉,常嘯,潘衛(wèi),李興. 時珍國醫(yī)國藥. 2015(06)
博士論文
[1]何首烏致肝損傷成分及作用機制研究[D]. 林龍飛.北京中醫(yī)藥大學 2016
碩士論文
[1]基于肝細胞毒價檢測的何首烏質量控制方法研究[D]. 呂旸.北京化工大學 2013
[2]廣西何首烏中蒽醌類化合物GXHSWAQ-1單體對鼻咽癌的放射增敏作用及其機制[D]. 劉瑛.廣西醫(yī)科大學 2009
本文編號：3324012
本文鏈接：http://sikaile.net/yixuelunwen/zhongyaolw/3324012.html
