目的:構建體外人牙髓細胞（human dental pulp cells,h DPCs）炎癥模型,研究姜黃素對該模型h DPCs炎癥相關細胞因子m RNA表達水平及成骨分化的影響。方法:1、CCK8法檢測不同濃度大腸桿菌來源的LPS（Escherichia coli lipopolysaccharide,E.coli LPS）對h DPCs的細胞毒性作用。2、實時熒光定量PCR（Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR）檢測不同濃度E.coli LPS刺激h DPCs 3、6、12、24h后炎癥相關因子IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8及COX-2的m RNA表達水平,ELISA檢測E.coli LPS刺激h DPCs其IL-6的蛋白表達水平,從而篩選構建體外h DPCs炎癥環(huán)境最適宜的E.coli LPS濃度及相應刺激時間。3、CCK8法檢測不同濃度姜黃素作用h DPCs 24、48h后細胞活力值。4、Real-time PCR檢測姜黃素對炎癥環(huán)境下h DPCs IL-... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學福建省

【文章頁數】：72 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

CCK8檢測LPS對人牙髓細胞的細胞毒性作用

18圖 1-2 RT-PCR 檢測 LPS 刺激人牙髓細胞不同時間后炎癥因子的 mRNA 表達。（*表示該組與不含 LPS 對照組比較，p＜0.05）3.2 LPS 刺激 hDPCs 24 h 后細胞上清液中 IL-6 的蛋白表達水平。0，1 或 10 μg/ml E.coli LPS 分別刺激 hDPCs 24 h，通過 ELISA 檢測細胞上清

圖 1-3 ELISA 檢測 LPS 刺激 hDPCs 24 h 后 IL（*表示該組與 control 組比較， p＜討論感染根管及壞死牙髓中常可檢出革蘭陰性菌（gram- 研究表明 G－菌常引起牙髓炎癥反應[38]。組織學證據顯示織前，就可引發(fā)牙髓疾病，表明牙髓炎癥的發(fā)生不僅由產物也參與炎癥的發(fā)生[39]。LPS，是 G－菌內毒素，具有破誘導宿主細胞的免疫應答，從而參與牙髓炎癥的發(fā)生、發(fā)LPS 可通過上調牙髓細胞表達大量炎癥細胞因子而子是一類小分子分泌性的可溶性蛋白質，可促進免疫活同作用。通過測量炎癥因子的表達水平，可反映牙IL-1β，TNF-a 及 IL-6 是參與各種急性期炎癥免疫反應的

【參考文獻】：
期刊論文
[1]殼聚糖聚乳酸羥基乙酸納米粒子作為抗瘤藥物載體的研究[J]. 馬方奎,包子嫻,陳西廣.  中國海洋大學學報(自然科學版). 2014(07)
[2]白細胞介素1β對牙髓干細胞礦化潛能的影響[J]. 楊雪超,張思遠,樊明文,李新,劉甜,姚瑤.  中華口腔醫(yī)學雜志. 2011 (07)
[3]脂多糖對人牙髓細胞增殖和堿性磷酸酶活性的影響[J]. 王鳳明,胡濤,周學東.  上�？谇会t(yī)學. 2005(01)



本文編號：3312440