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補(bǔ)中益氣湯含藥血清干預(yù)A549細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化改善細(xì)胞耐藥性的研究

發(fā)布時間:2021-07-25 16:04
  目的:肺癌是致死率最高的惡性腫瘤之一,起病隱匿,多數(shù)患者確診時即為晚期,手術(shù)切除率低。目前臨床主要運(yùn)用化療藥物治療,但隨著治療進(jìn)程推進(jìn),常出現(xiàn)進(jìn)行性耐藥性增加。在產(chǎn)生耐藥的過程中,腫瘤細(xì)胞上皮間質(zhì)化現(xiàn)象出現(xiàn)。上皮間質(zhì)化(EMT)指的是上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化為具有游走能力的間質(zhì)細(xì)胞的過程,是腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移過程的重要啟動步驟,與腫瘤耐藥密切相關(guān)。近年來對PI3K/Akt信號通路在惡性腫瘤組織中異常活化的研究,使人們開始關(guān)注其與腫瘤發(fā)生及轉(zhuǎn)化之間的關(guān)系。并且隨著研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)PI3K/Akt通路與上皮間質(zhì)化的發(fā)生、發(fā)展過程均有密切關(guān)系,可能是上皮間質(zhì)化信號傳導(dǎo)過程中的核心因子之一。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為肺癌的發(fā)生主要與肺脾氣虛緊密相關(guān),治法當(dāng)以健脾益氣,培土生金為主。補(bǔ)中益氣湯是培土生金法的代表方劑,具有健脾益氣、對抗耐藥、有效緩解腫瘤化療副作用等作用。臨床補(bǔ)中益氣湯聯(lián)合順鉑等化療藥治療非小細(xì)胞肺癌已取得了良好的效果。本實(shí)驗(yàn)用TGF-β1誘導(dǎo)人肺腺癌細(xì)胞株A549發(fā)生上皮間質(zhì)化,選取補(bǔ)中益氣湯含藥血清進(jìn)行干預(yù),檢測細(xì)胞耐藥以及間質(zhì)化相關(guān)指標(biāo)的變化情況,以研究補(bǔ)中益氣湯含藥血清在這一過程中發(fā)揮的作用;并進(jìn)一步... 

【文章來源】:遼寧中醫(yī)藥大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】:100 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

補(bǔ)中益氣湯含藥血清干預(yù)A549細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化改善細(xì)胞耐藥性的研究


A549及A549/DDP細(xì)胞劃痕愈合率(%)

蛋白表達(dá),棕黃色,細(xì)胞漿,細(xì)胞


圖 1-2 A549 及 A549/DDP 細(xì)胞劃痕愈合率(%)注:*P<0.05,與 A549 比較。2. A549 細(xì)胞與 A549/DDP 細(xì)胞中 EMT 標(biāo)志物 Vimentin、Twist1 表達(dá)比較2.1 免疫組織化學(xué)法檢測結(jié)果Vimentin 蛋白以細(xì)胞漿和胞核有棕黃色陽性產(chǎn)物表達(dá)為陽性結(jié)果,Twist1 蛋白以細(xì)胞漿有棕黃色陽性產(chǎn)物表達(dá)為陽性結(jié)果(見圖 1-3)。A549 細(xì)胞和 A549/DDP 細(xì)胞的細(xì)胞漿和胞核中 Vimentin 蛋白均有棕黃色陽性產(chǎn)物表達(dá),與 A549 細(xì)胞比較,A549/DDP細(xì)胞的棕黃色陽性產(chǎn)物較多(P<0.05),統(tǒng)計結(jié)果見表 1-3。A549 細(xì)胞和 A549/DDP細(xì)胞的細(xì)胞漿 Twist1 蛋白均有棕黃色陽性產(chǎn)物表達(dá)(見圖 1-4),與 A549 細(xì)胞比較,A549/DDP 細(xì)胞的棕黃色陽性產(chǎn)物較多(P<0.05)。統(tǒng)計結(jié)果見表 1-3。

蛋白表達(dá),積分光密度


圖 1-4 Twist1 蛋白表達(dá)(200×)表 1-3 各組中 Vimentin 和 Twist1 蛋白表達(dá)的積分光密度(x±s)組別 n Twist1 VimentinA549 6 0.180±0.019 0.177±0.028A549/DDP 6 0.256±0.035* 0.250±0.023*注:*P<0.05,與 A549 比較。2.2 Western blot 蛋白定量Western blot 結(jié)果顯示,與 A549 細(xì)胞比較,A549/DDP 細(xì)胞中 Twist1 和 Vimentin蛋白的表達(dá)量均較多(P<0.05),條帶見圖 1-5,統(tǒng)計結(jié)果見圖 1-6、表 1-4。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[3]加味六君子湯對腹膜纖維化大鼠腹膜間皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的影響[J]. 孟立鋒,楊端云,李吉武,覃志周,農(nóng)邵陽.  中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志. 2016(04)
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碩士論文
[1]Gli2和TGF-β1在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及與預(yù)后的關(guān)系[D]. 孫鳳嬌.天津醫(yī)科大學(xué) 2015
[2]Ezrin和E-Cadherin在肺癌中的表達(dá)及意義[D]. 席彩霞.蘭州大學(xué) 2008



本文編號:3302336

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