建立了快速分離及鑒定葛花中活性化合物的方法。采用70%乙醇加熱回流提取得到葛花提取物,以α-葡萄糖苷酶和乳酸脫氫酶作為生物靶分子,以超濾質(zhì)譜技術(shù)篩選酶抑制劑。運(yùn)用高速逆流色譜分離純化所得酶抑制劑,以乙酸乙酯-乙醇-水（4.0∶0.5∶3.0,V/V/V）組成三元溶劑體系,從200 mg葛花粗提物中,一次性分離制備得到2.36 mg葛根素、8.57 mg鳶尾苷、5.34 mg染料木苷,經(jīng)高效液相色譜分析其純度均達(dá)到90.0%以上。該三個化合物均可與α-葡萄糖苷酶及乳酸脫氫酶親和,具有潛在的抗糖尿病及抗腦卒中的活性。通過液-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)及核磁共振波譜技術(shù)確定了每個化合物的結(jié)構(gòu)。該方法簡單、快速、高效,分離樣品純度高,適用于葛花中異黃酮類活性化合物的分離純化及鑒定研究。 

【文章來源】：分析科學(xué)學(xué)報(bào). 2020,36(03)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

化合物染料木苷(A)、鳶尾苷(B)和葛根素(C)的結(jié)構(gòu)

利用超濾色譜技術(shù)對葛花粗提物的乳酸脫氫酶(LDH)抑制活性的研究結(jié)果見圖3。由圖3可以看出,葛花粗提物中的化合物與1.0 U/mL LDH的結(jié)合效果最好。通過進(jìn)行體外活性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),葛花中6個化合物具有LDH的抑制活性�；衔锏囊种苹钚皂樞�?yàn)?化合物4>化合物6>化合物3>化合物5>化合物2>化合物1。表2的數(shù)據(jù)表明,加LDH的樣品中化合物的液相色譜峰面積均明顯高于空白對照組。抑制率分別為28.26%、25.73%、24.54%、18.61%、16.34%和15.67%。證明葛花中的化學(xué)成分與LDH具有生物親和能力,可以抑制LDH生物活性,具有潛在的抗腦卒中活性。圖3 葛花提取物與0.2 U/mL(A)、0.5 U/mL(B)和1.0 U/mL(C)乳酸脫氫酶結(jié)合的色譜圖

圖2 葛花提取物與0.2 U/mL(A)、0.5 U/mL(B)和1.0 U/mL(C) α -葡萄糖苷酶結(jié)合的色譜圖表2 受體結(jié)合能力通過液相色譜信號增強(qiáng)因子的表達(dá)Table 2 Expression of receptor binding ability by signal enhancement factor by liquid chromatography LDH(U) Inhibition rate of active ingredients in crude extract of P.Flos(%) 1 2 3 4 5 6 0.2 ND ND ND ND ND ND 0.5 ND ND ND ND ND ND 1.0 15.67 16.34 24.54 28.26 18.61 25.73 ND:not detected.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3296429