目的:探討強骨康疏方總提取物對體外培養(yǎng)破骨細胞（Osteoclast,OC）分化、酶活性的影響,并初步探討其可能的作用機制。方法:制備強骨康疏方水提物,以OC前體細胞-小鼠單核巨噬細胞白血病細胞RAW264.7為研究對象,選取5-10代的RAW264.7細胞經(jīng)適應性培養(yǎng)后,CCK-8法分析該方對細胞活力的影響;將細胞分為陰性對照組、模型對照組、強骨康疏方低、中、高劑量藥物組,除陰性對照組外,其他實驗組均加入終濃度為50ng/ml的核因子κB受體活化因子配體（Receptor Activator of Nuclear Factor-κB Ligand,RANKL）為OC誘導劑,同時,藥物組加入不同濃度的強骨康疏方提取物（50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml）進行干預。采用抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase,TRAP）染色觀察各組細胞TRAP陽性多核細胞的數(shù)量;比色法試劑盒測定各組TRAP酶活性數(shù)值;實時熒光定量PCR（Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR）檢測各組細胞TRAP、基質金屬蛋... 

【文章來源】：湖北民族大學湖北省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度RANKL對RAW264.7細胞向OC分化的影響（未行TRAP染色）

：圖 A 為陰性組，圖 B 為誘導劑 RANKL（20ng/ml）濃度組，圖 C 為誘導劑 RAN（50ng/ml）濃度組, 圖 D 為誘導劑 RANKL（150ng/ml）濃度組。圖 2-2：不同濃度 RANKL 對 RAW264.7 細胞向 OC 分化的影響（TRAP 染色）g2-2：Effects of different concentrations of RANKLon differentiation of RAW264.7 cellsOC.（TRAP staining）2 強骨康疏方提取物對 OC 分化過程的影響（TRAP 染色）TRAP 是 OC 特異性的標志酶，TRAP 染色是鑒定 OC 分化成熟的金標準果觀察到三個或以上細胞核，同時 TRAP 呈現(xiàn)陽性（酒紅色）的細胞便可為是破骨細胞。通過該實驗觀察不同濃度的 QGKS 對 RAW264.7 細胞向 分化的影響可以發(fā)現(xiàn)，陰性組沒有 OC 的產(chǎn)生，對照組可觀察到許多體積、呈酒紅色、內(nèi)含多個細胞核的破骨細胞，其他三組加入相應濃度的強骨方水煎液干預后，其破骨細胞數(shù)量明顯減少，尤其是成熟的破骨細胞，同

注：相同時間下，藥物組與陰性組相比較*P＜0.05。K-8 檢測強骨康疏方提取物對 RAW264.7 細胞增殖的影響（ ± s，nect of QGKS decoction was measured by CCK-8 on the proliferation of Rcells ( ± s，n=3)疏方提取物對 OC 分化過程中 TRAP 酶活性的影響示，與陰性組相比，對照組酶活性顯著升高（P＜0.05）。用0μg/ml、200μg/ml 的藥物組干預后，與對照組比較，強骨康降低，以 100μg/ml 組更加顯著（P＜0.05）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]宣痹湯治療類風濕關節(jié)炎濕熱瘀阻證的臨床研究[J]. 馬夢洋,展俊平,孟慶良,孟婉婷,谷慧敏,王慧蓮,左瑞庭,馬俊福,苗喜云,范圍.  中國處方藥. 2019(03)
[2]類風濕關節(jié)炎患者軀體功能受限影響因素研究[J]. 孫垚,高蕾,潘麗,李亞芳,曾潔,金蕾,闞燕,史寶欣.  現(xiàn)代預防醫(yī)學. 2019(05)
[3]手術治療晚期類風濕性關節(jié)炎前足畸形近期療效觀察[J]. 胡東,趙宏謀,楊杰,李毅,梁曉軍,王軍虎.  實用骨科雜志. 2019(01)
[4]艾拉莫德對類風濕關節(jié)炎外周血破骨細胞分化及破骨細胞相關基因表達的影響[J]. 馮佳,龔書識,夏燕,田瑞,楊年安,趙小丹,蔡德慧,向陽,袁林.  中國骨質疏松雜志. 2019(01)
[5]復方大黃散對類風濕關節(jié)炎NF-κB受體活化因子配體、骨保護素的影響[J]. 康勤龍,榮曉鳳.  現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志. 2019(01)
[6]吡非尼酮聯(lián)合糖皮質激素治療類風濕關節(jié)炎合并肺間質纖維化的效果及對血清KL-6、ACPA的影響[J]. 楊金良,鄭學軍,趙亞君,王曉霞,王建芳,韓寶華.  廣東醫(yī)學. 2018(23)
[7]蘭州市城關區(qū)類風濕關節(jié)炎的現(xiàn)況研究[J]. 慕婷婷,杜小正,亢永良,牛菊紅,陳雪蓮.  甘肅科學學報. 2018(06)
[8]原發(fā)性骨質疏松癥的破骨細胞靶向治療進展[J]. 張壇,錢宇.  中華骨與關節(jié)外科雜志. 2018(10)
[9]護骨膠囊對類風濕關節(jié)炎患者骨破壞的影響[J]. 朱俊.  河南醫(yī)學高等專科學校學報. 2018(03)
[10]RANKL-RANK-OPG信號通路對類風濕關節(jié)炎骨破壞作用的研究進展[J]. 楊敏,洪夢琴,范星宇.  醫(yī)學與哲學（B）. 2018(04)

博士論文
[1]強直性脊柱炎致病相關基因的篩選及RUNX1參與破骨細胞分化的可能機制[D]. 徐仲陽.山東大學 2018
[2]單體C反應蛋白調(diào)節(jié)破骨細胞分化的機制研究[D]. 賈哲坤.蘭州大學 2018

碩士論文
[1]強骨康疏方治療絕經(jīng)后骨質疏松癥的臨床觀察[D]. 譚珂.湖北民族學院 2018
[2]MMP-3/TIMP-1與Th17/Treg在類風濕關節(jié)炎患者血清中的表達及臨床意義[D]. 崔靜.山西醫(yī)科大學 2018
[3]補腎活血法對去卵巢大鼠骨組織中TGF-β1、Smad2、Smad4信號傳導通路的研究[D]. 趙小丹.湖北民族學院 2014
[4]補腎化瘀法對去卵巢骨質疏松癥模型大鼠骨生化代謝影響的機制探討[D]. 劉冬梅.湖北民族學院 2012
[5]路志正調(diào)理脾胃治療風濕病學術思想傳承及臨床應用研究[D]. 姜泉.中國中醫(yī)科學院 2012



本文編號：3289687