目的:探討強(qiáng)骨康疏方總提取物對(duì)體外培養(yǎng)破骨細(xì)胞（Osteoclast,OC）分化、酶活性的影響,并初步探討其可能的作用機(jī)制。方法:制備強(qiáng)骨康疏方水提物,以O(shè)C前體細(xì)胞-小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞RAW264.7為研究對(duì)象,選取5-10代的RAW264.7細(xì)胞經(jīng)適應(yīng)性培養(yǎng)后,CCK-8法分析該方對(duì)細(xì)胞活力的影響;將細(xì)胞分為陰性對(duì)照組、模型對(duì)照組、強(qiáng)骨康疏方低、中、高劑量藥物組,除陰性對(duì)照組外,其他實(shí)驗(yàn)組均加入終濃度為50ng/ml的核因子κB受體活化因子配體（Receptor Activator of Nuclear Factor-κB Ligand,RANKL）為OC誘導(dǎo)劑,同時(shí),藥物組加入不同濃度的強(qiáng)骨康疏方提取物（50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml）進(jìn)行干預(yù)。采用抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase,TRAP）染色觀察各組細(xì)胞TRAP陽性多核細(xì)胞的數(shù)量;比色法試劑盒測(cè)定各組TRAP酶活性數(shù)值;實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR）檢測(cè)各組細(xì)胞TRAP、基質(zhì)金屬蛋... 

【文章來源】：湖北民族大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度RANKL對(duì)RAW264.7細(xì)胞向OC分化的影響（未行TRAP染色）

：圖 A 為陰性組，圖 B 為誘導(dǎo)劑 RANKL（20ng/ml）濃度組，圖 C 為誘導(dǎo)劑 RAN（50ng/ml）濃度組, 圖 D 為誘導(dǎo)劑 RANKL（150ng/ml）濃度組。圖 2-2：不同濃度 RANKL 對(duì) RAW264.7 細(xì)胞向 OC 分化的影響（TRAP 染色）g2-2：Effects of different concentrations of RANKLon differentiation of RAW264.7 cellsOC.（TRAP staining）2 強(qiáng)骨康疏方提取物對(duì) OC 分化過程的影響（TRAP 染色）TRAP 是 OC 特異性的標(biāo)志酶，TRAP 染色是鑒定 OC 分化成熟的金標(biāo)準(zhǔn)果觀察到三個(gè)或以上細(xì)胞核，同時(shí) TRAP 呈現(xiàn)陽性（酒紅色）的細(xì)胞便可為是破骨細(xì)胞。通過該實(shí)驗(yàn)觀察不同濃度的 QGKS 對(duì) RAW264.7 細(xì)胞向 分化的影響可以發(fā)現(xiàn)，陰性組沒有 OC 的產(chǎn)生，對(duì)照組可觀察到許多體積、呈酒紅色、內(nèi)含多個(gè)細(xì)胞核的破骨細(xì)胞，其他三組加入相應(yīng)濃度的強(qiáng)骨方水煎液干預(yù)后，其破骨細(xì)胞數(shù)量明顯減少，尤其是成熟的破骨細(xì)胞，同

注：相同時(shí)間下，藥物組與陰性組相比較*P＜0.05。K-8 檢測(cè)強(qiáng)骨康疏方提取物對(duì) RAW264.7 細(xì)胞增殖的影響（ ± s，nect of QGKS decoction was measured by CCK-8 on the proliferation of Rcells ( ± s，n=3)疏方提取物對(duì) OC 分化過程中 TRAP 酶活性的影響示，與陰性組相比，對(duì)照組酶活性顯著升高（P＜0.05）。用0μg/ml、200μg/ml 的藥物組干預(yù)后，與對(duì)照組比較，強(qiáng)骨康降低，以 100μg/ml 組更加顯著（P＜0.05）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]宣痹湯治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎濕熱瘀阻證的臨床研究[J]. 馬夢(mèng)洋,展俊平,孟慶良,孟婉婷,谷慧敏,王慧蓮,左瑞庭,馬俊福,苗喜云,范圍.  中國(guó)處方藥. 2019(03)
[2]類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者軀體功能受限影響因素研究[J]. 孫垚,高蕾,潘麗,李亞芳,曾潔,金蕾,闞燕,史寶欣.  現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2019(05)
[3]手術(shù)治療晚期類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎前足畸形近期療效觀察[J]. 胡東,趙宏謀,楊杰,李毅,梁曉軍,王軍虎.  實(shí)用骨科雜志. 2019(01)
[4]艾拉莫德對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎外周血破骨細(xì)胞分化及破骨細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)的影響[J]. 馮佳,龔書識(shí),夏燕,田瑞,楊年安,趙小丹,蔡德慧,向陽,袁林.  中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志. 2019(01)
[5]復(fù)方大黃散對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎NF-κB受體活化因子配體、骨保護(hù)素的影響[J]. 康勤龍,榮曉鳳.  現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2019(01)
[6]吡非尼酮聯(lián)合糖皮質(zhì)激素治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎合并肺間質(zhì)纖維化的效果及對(duì)血清KL-6、ACPA的影響[J]. 楊金良,鄭學(xué)軍,趙亞君,王曉霞,王建芳,韓寶華.  廣東醫(yī)學(xué). 2018(23)
[7]蘭州市城關(guān)區(qū)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的現(xiàn)況研究[J]. 慕婷婷,杜小正,亢永良,牛菊紅,陳雪蓮.  甘肅科學(xué)學(xué)報(bào). 2018(06)
[8]原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的破骨細(xì)胞靶向治療進(jìn)展[J]. 張壇,錢宇.  中華骨與關(guān)節(jié)外科雜志. 2018(10)
[9]護(hù)骨膠囊對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者骨破壞的影響[J]. 朱俊.  河南醫(yī)學(xué)高等�？茖W(xué)校學(xué)報(bào). 2018(03)
[10]RANKL-RANK-OPG信號(hào)通路對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎骨破壞作用的研究進(jìn)展[J]. 楊敏,洪夢(mèng)琴,范星宇.  醫(yī)學(xué)與哲學(xué)（B）. 2018(04)

博士論文
[1]強(qiáng)直性脊柱炎致病相關(guān)基因的篩選及RUNX1參與破骨細(xì)胞分化的可能機(jī)制[D]. 徐仲陽.山東大學(xué) 2018
[2]單體C反應(yīng)蛋白調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞分化的機(jī)制研究[D]. 賈哲坤.蘭州大學(xué) 2018

碩士論文
[1]強(qiáng)骨康疏方治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的臨床觀察[D]. 譚珂.湖北民族學(xué)院 2018
[2]MMP-3/TIMP-1與Th17/Treg在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清中的表達(dá)及臨床意義[D]. 崔靜.山西醫(yī)科大學(xué) 2018
[3]補(bǔ)腎活血法對(duì)去卵巢大鼠骨組織中TGF-β1、Smad2、Smad4信號(hào)傳導(dǎo)通路的研究[D]. 趙小丹.湖北民族學(xué)院 2014
[4]補(bǔ)腎化瘀法對(duì)去卵巢骨質(zhì)疏松癥模型大鼠骨生化代謝影響的機(jī)制探討[D]. 劉冬梅.湖北民族學(xué)院 2012
[5]路志正調(diào)理脾胃治療風(fēng)濕病學(xué)術(shù)思想傳承及臨床應(yīng)用研究[D]. 姜泉.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 2012



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