背景:宮頸癌作為婦女最常見惡性腫瘤之一,嚴(yán)重威脅女性的身心健康。研發(fā)合理有效的治療藥物具有重要意義。高危型人乳頭瘤病毒的感染已被證實(shí)是最主要的病因,其致癌機(jī)理與病毒癌基因E6/E7過(guò)表達(dá)干擾細(xì)胞周期、抑制細(xì)胞凋亡從而導(dǎo)致細(xì)胞惡性增殖相關(guān)。E6/E7基因的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯是抗HPV病毒及其相關(guān)宮頸癌的重要分子靶點(diǎn)。紫草素作為中藥紫草的主要活性成分,已發(fā)現(xiàn)其可抑制宮頸癌Hela（HPV18型）增殖,并誘導(dǎo)其凋亡,其機(jī)制與影響caspase、ERK、P13K、ATK、mTOR、ROS/p38途徑有關(guān)。關(guān)于其對(duì)E6/E7 mRNA和蛋白表達(dá)的影響以及對(duì)感染HPV16型宮頸癌細(xì)胞的作用目前未見報(bào)道。目的:研究紫草素對(duì)感染HPV16型宮頸癌Caski細(xì)胞的增殖、凋亡以及對(duì)E6/E7基因表達(dá)的影響。方法:體外培養(yǎng)宮頸癌Caski細(xì)胞并進(jìn)行HPV基因檢測(cè),采用MTT法檢測(cè)不同濃度紫草素（1.25¹60）μmol/L作用于宮頸癌Caski細(xì)胞后細(xì)胞的存活率,流式細(xì)胞術(shù)觀察細(xì)胞凋亡率改變;DAPI染色觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)改變;采用qRT-PCR法檢測(cè)E6/E7 mRNA表達(dá)的變化,采用... 

【文章來(lái)源】：湖北醫(yī)藥學(xué)院湖北省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

宮頸癌Caski細(xì)胞分型檢測(cè)結(jié)果比較(a.宮頸癌Caski細(xì)胞HPV分型結(jié)果b.HPV分型結(jié)果對(duì)照表)

.1 宮頸癌 Caski 細(xì)胞分型檢測(cè)結(jié)果比較(a.宮頸癌 Caski 細(xì)胞 HPV 分型結(jié)果 果對(duì)照表) 紫草素對(duì)宮頸癌 Caski 細(xì)胞增殖的影響預(yù)實(shí)驗(yàn)紫草素濃度選擇根據(jù)是已有文獻(xiàn)報(bào)道紫草素抑制宮頸癌 Hela IC5018.9±1.1 μmol/L[26]，確定紫草素濃度為 1.25、2.5、5、10、2160 μmol/L，將其作用于宮頸癌 Caski 細(xì)胞 12 h、24 h、36 h 后，M到 12 h、36 h 時(shí)僅 20~40 μmol/L 才出現(xiàn)細(xì)胞存活率的改變（圖 2.2 Ph 時(shí)紫草素藥物濃度區(qū)間在 1.25~5 μmol/L 時(shí)細(xì)胞存活率無(wú)變化；ol/L 時(shí)存在隨著藥物濃度增加出現(xiàn)細(xì)胞存活率下降的梯度變化，差異意義（圖 2.2 P<0.05）；在 40~160 μmol/L 時(shí)細(xì)胞存活率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)確定藥物作用最佳時(shí)間為 24 h，最佳濃度為 5、10、20、40 μmol/L，組的數(shù)量，后續(xù)實(shí)驗(yàn)選取紫草素濃度為 5、10、20、40、80 μmol/L

2.3 紫草素對(duì)宮頸癌 Caski 細(xì)胞凋亡的作用以 0、5、10、20、40、80 μmol/L 的紫草素培養(yǎng)宮頸癌 Caski 細(xì)胞 24 h 后，用 Annexin V/PI 法觀察細(xì)胞凋亡變化，左下象限顯示活細(xì)胞，右下象限及右上象限分別顯示早期及晚期凋亡細(xì)胞，左上象限顯示死亡細(xì)胞。結(jié)果顯示未加藥組活細(xì)胞數(shù)高達(dá) 96.1%，凋亡及死細(xì)胞數(shù)目?jī)H占 3.9%。反映出細(xì)胞在此時(shí)處于良好生長(zhǎng)狀態(tài)。隨著紫草素濃度的加大，活細(xì)胞數(shù)開始逐漸減少，凋亡和死細(xì)胞數(shù)目逐漸增加（從 3.9%增加至 9.1%、28.9%、41.7%、88.1%、97.17%）（圖 2.3 ，圖 2.4）（P<0.01），與 MTT 所表現(xiàn)出的細(xì)胞存活率結(jié)果基本一致。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]新疆紫草水溶性成分開發(fā)利用的化學(xué)基礎(chǔ)研究[D]. 賀金華.新疆醫(yī)科大學(xué) 2005



本文編號(hào)：3279175