目的從中醫(yī)“祛瘀生新”的角度出發(fā),基于神經(jīng)干細(xì)胞的生物學(xué)特點(diǎn),從在體神經(jīng)干細(xì)胞發(fā)生和異體神經(jīng)干細(xì)胞移植兩個(gè)方面,探討神經(jīng)干細(xì)胞在缺血損傷修復(fù)過程中發(fā)揮的作用及機(jī)制。方法1孕15-17 d的SD大鼠,體外分離培養(yǎng)胎鼠海馬NSCs,采用免疫熒光染色法對NSCs特異性標(biāo)志物Nestin進(jìn)行鑒定,NSCs增殖標(biāo)記物BrdU進(jìn)行增殖鑒定,神經(jīng)元祖細(xì)胞特異性標(biāo)記物Tuj-1及星形膠質(zhì)細(xì)胞的祖細(xì)胞特異性標(biāo)記物Vimentin對NSCs進(jìn)行分化鑒定。2 SD雄性大鼠隨機(jī)分為5組（n=7）:正常對照組（Sham group）、模型組（Model group）、人參皂苷治療組（Gin group）、NSCs移植治療組（NSCs group）和人參皂苷治療同時(shí)神經(jīng)干細(xì)胞移植治療組（Gin+NSCs group）。SD大鼠建立局灶性腦缺血模型,NSCs移植治療組對建立缺血模型后大鼠缺血側(cè)進(jìn)行NSCs移植治療,對缺血7 d后大鼠神經(jīng)功能改善及腦組織梗死情況進(jìn)行評估。3基于上述實(shí)驗(yàn)分組,收集缺血7 d后大鼠全血及腦組織,制備血清及腦組織勻漿液。采用酶聯(lián)免疫分析ELISA方法測定在血清和組織勻漿液中的炎性介質(zhì),包括... 

【文章來源】：北京中醫(yī)藥大學(xué)北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：127 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１胎鼠海馬ＮＳＣｓ分離培養(yǎng)及其分化細(xì)胞的鑒定（２００Ｘ）??（Ａ）原代細(xì)胞球（Ｂ）傳代細(xì)胞球??神經(jīng)干細(xì)胞免疫熒光：（Ｃ）?Ｎｅｓｔｉｎ?（Ｄ）?ＢｒｄＵ?（Ｅ）?Ｔｕｊ－１?（Ｆ）?Ｖｉｍｅｎｔｉｎ．??

３．２對腦梗死體積的改善作用??經(jīng)圖像分析系統(tǒng)軟件處理并統(tǒng)計(jì)，計(jì)算每張腦片的梗塞面積，乘上腦片的厚度。每??只大鼠所有腦片梗塞面積乘以厚度并相加，即腦梗塞體積。如圖３和４，表２所示，大鼠??腦組織缺血損傷后，Ｓｈａｍ組無腦缺血出現(xiàn)，Ｍｏｄｅｌ組出現(xiàn)明顯缺血區(qū)而呈現(xiàn)白色。人參??皂苷和移植ＮＳＣｓ治療可顯著縮小腦缺血面積，減少梗死體積（；？＜０．０１）。而人參皂苷和??移植ＮＳＣｓ共同進(jìn)行治療時(shí)，二者有很好的交互作用，協(xié)同改善缺血后腦梗塞體積。??３．３腦水腫率測定??如圖５，表２所示，腦缺血７?ｄ，Ｍｏｄｅｌ組與Ｓｈａｍ組相比，腦水腫率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異??（；７＜０．０１），各治療組與ｍｏｄｅｌ組之間有顯著性差異（ｐ＜０．０５），說明人參阜苷治療和移植??ＮＳＣｓ治療均可明顯改善腦缺血７?ｄ大鼠的腦水腫情況。??表２各組腦梗死體積、腦水腫率及析因分析結(jié)果（：±ＳＤ，ｎ＝７）??組別?腦梗死體積?腦水腫率??Ｓｈａｍ?０．００?０．８２±０．８５??Ｍｏｄｅｌ?６５２．６２士１１４．５８＊＊?３．５２士?１．４０＊＊??Ｇｉｎ?３９５．５２±８３．１３＃＃?０．８２±１．７０＃??ＮＳＣｓ?２２８．３１?±９９．４１＃＃?１．０９±１．９７＃??Ｇｉｎ＋ＮＳＣｓ?２０２．０９±９６．７９＃＃?０．５２±１．０１＃＃??ＮＳＣｓ＊Ｇｉｎ?ｔｔ??■?－?■■丨???與?Ｓｈａｍ?組比較：＊＊ｐ＜０．０１；與?Ｍｏｄｅｌ?組比較：＃＃ｐ＜０．０１

圖２大腦中動(dòng)脈內(nèi)線栓法（ＭＣＡＯ）建立腦缺血模型及側(cè)腦室移植ＮＳＣｓ??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]電針對局灶腦缺血/再灌注大鼠大腦缺血皮質(zhì)區(qū)白介素-4/信號傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子6與核因子-κB的影響[J]. 張瑩,秦文熠,羅勇.  針刺研究. 2017(03)
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[5]腦出血對大鼠第三腦室伸展細(xì)胞的影響及人參皂苷的作用[J]. 劉峻崎,李光媛,白華靜,萬鳳,田沫,胡京紅,黃翔,李強(qiáng),李健,司銀楚.  中華中醫(yī)藥雜志. 2016(02)
[6]補(bǔ)腎中藥血清聯(lián)合BMP-2對人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及形態(tài)學(xué)的影響[J]. 馬勇,郭楊,魯俊山,黃桂成,王建偉.  中國骨質(zhì)疏松雜志. 2015(01)
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