肺癌是目前發(fā)病率最高的癌癥之一,嚴(yán)重危害著人類的健康。本實驗室前期通過處方優(yōu)化對復(fù)方藥金復(fù)康處方組成進行了優(yōu)化,得到了金復(fù)康優(yōu)化方。且前期研究基礎(chǔ)表明,黃芪在金復(fù)康優(yōu)化方防治肺癌活性的發(fā)揮中起到至關(guān)重要的作用。為了明確黃芪防治肺癌的物質(zhì)基礎(chǔ),闡明其組成成分及其量與量比關(guān)系,本文使用了多種技術(shù)方法,以期從不同層面對這一根本問題進行探討。本論文主要圍繞五個部分進行展開,具體內(nèi)容如下:多靶點、多種作用途徑下黃芪防治肺癌物質(zhì)基礎(chǔ)組成成分的預(yù)測:通過文獻檢索及文本分析構(gòu)建黃芪成分-作用途徑-靶點網(wǎng)絡(luò),并通過對網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)信息的分析對作用途徑、靶點及物質(zhì)基礎(chǔ)組成成分進行預(yù)測。并在此基礎(chǔ)上,利用苯并芘化學(xué)誘導(dǎo)法構(gòu)建AJ小鼠體內(nèi)肺癌模型,取肺組織進行基因表達(dá)譜芯片檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn),苯并芘可使正常AJ小鼠肺組織基因網(wǎng)絡(luò)出現(xiàn)紊亂,上調(diào)及下調(diào)大量靶點基因,而黃芪給藥可促使偏離的基因表達(dá)向正常范圍回歸,從而糾正苯并芘誘導(dǎo)所引發(fā)的病理紊亂�；诰W(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與基因芯片結(jié)果,預(yù)測出包括黃芪皂苷類化合物黃芪皂苷IV、黃芪皂苷II、環(huán)黃芪醇、黃芪皂苷VII、黃芪皂苷I以及黃芪黃酮類化合物毛蕊異黃酮、芒柄花黃素、鷹嘴豆素A、... 

【文章來源】：南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：117 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
第一章 緒論
    1.1 組分結(jié)構(gòu)理論指導(dǎo)下創(chuàng)新中藥制劑的拓展與外延
        1.1.1 組分結(jié)構(gòu)理論提出的必要性及合理性
        1.1.2 組分結(jié)構(gòu)理論指導(dǎo)下中藥藥效組分的篩選
    1.2 黃芪成分及其生物活性研究進展
        1.2.1 黃芪主要成分研究進展
        1.2.2 生物活性研究進展
    1.3 腸菌代謝與藥物活性的發(fā)揮
    1.4 基于胞內(nèi)蛋白/膜蛋白結(jié)合特性篩選藥效成分的探索
    1.5 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究
        1.5.1 在網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)指導(dǎo)下研究多組分對多靶點的活性
        1.5.2 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與基因芯片技術(shù)
        1.5.3 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與代謝研究的結(jié)合
    參考文獻
第二章 多靶點、多種作用途徑下黃芪防治肺癌物質(zhì)基礎(chǔ)組成成分的預(yù)測
    2.1 實驗方法
        2.1.1 儀器與材料
        2.1.2 黃芪成分、作用途徑相關(guān)靶點的搜集
        2.1.3 基因表達(dá)譜芯片分析黃芪給藥對肺癌AJ小鼠基因表達(dá)影響
    2.2 實驗結(jié)果
        2.2.1 成分-基因-作用途徑網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建
        2.2.2 黃芪給藥對AJ肺癌小鼠體內(nèi)基因的調(diào)控
    2.3 本章小結(jié)
    參考文獻
第三章 自噬作用途徑下黃芪防治肺癌物質(zhì)基礎(chǔ)組成成分的初步發(fā)現(xiàn)
    3.1 實驗方法
        3.1.1 儀器與材料
        3.1.2 溶液配制
        3.1.3 NHBE細(xì)胞培養(yǎng)
        3.1.4 MTT實驗
        3.1.5 透射電鏡觀察自噬小體的形成
        3.1.6 WB實驗
        3.1.7 IF買驗
        3.1.8 RCR實驗
        3.1.9 黃芪醇提物UPLC-MS定性分析
        3.1.10 統(tǒng)計學(xué)分析
    3.2 實驗結(jié)果
        3.2.1 黃芪提取物給藥對自噬體形成的影響
        3.2.2 黃芪對香煙誘導(dǎo)細(xì)胞模型中p53的調(diào)節(jié)作用
        3.2.3 黃芪對香煙誘導(dǎo)細(xì)胞模型中Beclin1的調(diào)節(jié)作用
        3.2.4 黃芪對香煙誘導(dǎo)細(xì)胞模型中AMPK的調(diào)節(jié)作用
        3.2.5 黃芪對香煙誘導(dǎo)細(xì)胞模型中p-Bcl-2的調(diào)節(jié)作用
        3.2.6 黃芪對香煙誘導(dǎo)細(xì)胞模型中mTOR的調(diào)節(jié)作用
        3.2.7 黃芪醇提物成分定性分析
    3.3 本章小結(jié)
    參考文獻
第四章 代謝作用對黃芪防治肺癌物質(zhì)基礎(chǔ)組成成分量的改變與質(zhì)的轉(zhuǎn)化
    4.1 實驗方法
        4.1.1 儀器與材料
        4.1.2 溶液的配制
        4.1.3 黃芪提取
        4.1.4 標(biāo)本采集與稀釋
        4.1.5 腸道菌群與藥物共孵育
        4.1.6 檢測方法的構(gòu)建
    4.2 實驗結(jié)果
        4.2.1 黃芪效應(yīng)成分在腸道菌群作用下的代謝轉(zhuǎn)化
        4.2.2 黃芪效應(yīng)成分代謝途徑
    4.3 本章小結(jié)
    參考文獻
第五章 細(xì)胞固相化色譜模型明確黃芪防治肺癌物質(zhì)基礎(chǔ)組成成分及組分
    5.1 實驗方法
        5.1.1 儀器與材料
        5.1.2 A549細(xì)胞培養(yǎng)
        5.1.3 溶液的配制
        5.1.4 孵育液與A549細(xì)胞共孵育
        5.1.5 洗脫未結(jié)合成分
        5.1.6 細(xì)胞膜固相化黃芪成分的解離
        5.1.7 黃芪提取物與胞內(nèi)蛋白的結(jié)合
        5.1.8 樣品處理
        5.1.9 檢測條件
    5.2 實驗結(jié)果
        5.2.1 孵育條件考察
        5.2.2 結(jié)合成分分析
        5.2.3 成分結(jié)合過程動力學(xué)特征
    5.3 本章小結(jié)
    參考文獻
第六章 黃芪皂苷與黃芪黃酮組分的生物藥劑學(xué)性質(zhì)研究
    6.1 實驗方法
        6.1.1 儀器與材料
        6.1.2 HPLC法標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        6.1.3 含量測定
        6.1.4 方法學(xué)試驗
        6.1.5 平衡溶解度及油水分配系數(shù)的測定
    6.2 實驗結(jié)果
        6.2.1 平衡溶解度
        6.2.2 油水分配系數(shù)
        6.2.3 生物藥劑學(xué)性質(zhì)的相似度分析
        6.2.4 質(zhì)量權(quán)重系數(shù)法整合表征組分整體性質(zhì)
        6.2.5 生物藥劑學(xué)性質(zhì)分類
    6.3 本章小結(jié)
    參考文獻
第七章 結(jié)論與展望
    7.1 研究創(chuàng)新點
    7.2 主要結(jié)論
    7.3 工作展望
攻讀碩士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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[2]12種黃酮化合物油水分配系數(shù)的測定[J]. 張慧杰,王萌,陳麗娜,劉亞男,任曉亮,戚愛棣.  中成藥. 2016(08)
[3]消巖湯對A549/DDP細(xì)胞自噬及耐藥蛋白的影響研究[J]. 楊佩穎,許文婷,劉宏根,張欣,張瑩,于曉宇,賈英杰.  天津中醫(yī)藥. 2016(06)
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博士論文
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碩士論文
[1]白花蛇舌草總黃酮苷和苷元的制備及腸道菌群代謝研究[D]. 高志敏.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2013
[2]丹參二萜醌組分整體藥劑學(xué)性質(zhì)表征及其固體分散體微丸的研究[D]. 郁丹紅.南京中醫(yī)藥大學(xué) 2013
[3]刺芒柄花素應(yīng)用于非小細(xì)胞肺癌治療的初步探討[D]. 于聲利.華中科技大學(xué) 2012
[4]脾細(xì)胞固相化萃取結(jié)合高效液相色譜法（SE-HPLC）研究玉屏風(fēng)散抑制遲發(fā)型超敏反應(yīng)的效應(yīng)物質(zhì)基礎(chǔ)[D]. 王亮.南京中醫(yī)藥大學(xué) 2009
[5]離體培養(yǎng)的腸道菌群對黃山藥總皂苷的代謝研究[D]. 張怡紅.廣東藥學(xué)院 2008
[6]黃芪有效部位脂質(zhì)體的研究[D]. 井水泉.沈陽藥科大學(xué) 2003



本文編號：3247281