海洋作為天然的寶庫(kù)蘊(yùn)藏著豐富的資源,近年來海洋生物資源的開發(fā)也成為了一大熱點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)海洋生物提取物具有抗癌、抗氧化、降血脂、免疫調(diào)節(jié)等功效。文蛤作為海洋四大養(yǎng)殖貝類之一,具有很高的食用性和藥用價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)室前期提取的氨基酸序列為Gln-Leu-Asn-Trp-Asp的文蛤寡肽（M.meretrix oligopeptides,MMO）在免疫調(diào)節(jié)方面的研究鮮有報(bào)道。因此,本研究以RAW264.7細(xì)胞為體外細(xì)胞模型、環(huán)磷酰胺（Cyclophosphamide,Cy）免疫抑制小鼠為體內(nèi)動(dòng)物模型,探討MMO的免疫調(diào)節(jié)作用。體外實(shí)驗(yàn)設(shè)立空白對(duì)照組、陽(yáng)性組（脂多糖,lipopolysaccharides,LPS）和MMO低、中、高劑量組,采用MTT比色法檢測(cè)對(duì)RAW264.7巨噬細(xì)胞的活性,倒置顯微鏡、HE染色和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期變化,中性紅吞噬實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞吞噬能力,免疫熒光標(biāo)記法觀察iNOS的表達(dá)情況,硝酸根還原酶法和ELISA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中NO、IL-6和IL-1β的含量,Western Blot法檢測(cè)細(xì)胞中MAPKs信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)情況,探討MMO... 

【文章來源】：浙江海洋大學(xué)浙江省

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度MMO對(duì)RAW264.7細(xì)胞增殖的影響

注：(a)空白對(duì)照組；(b)低劑量組（MMO：10 μg/mL）；(c)中劑量組（MMO：50 μg/mL）；(d)高劑量組（MMO：250 μg/mL）；(e)LPS 組（LPS：1μg/mL）圖 3-2 RAW264.7 細(xì)胞周期的變化Fig 3-2 RAW264.7 cell cycle changes表 3-1 RAW264.7 細(xì)胞周期各期結(jié)果（ x±s，n=3）Table 3-1 RAW264.7 cell cycle results（ x±s，n=3）組別 濃度/（μg/mL） G0/G1 期 S 期 G2/M 期空白對(duì)照組 0 43.28±0.20 50.75±0.33 5.97±0.37低劑量組 10 39.52±0.15 51.01±0.28 9.47±0.26中劑量組 50 43.01±0.22 49.75±0.16 7.24±0.12高劑量組 250 44.82±0.32 46.04±0.19* 9.14±0.18*LPS 組 1 43.62±0.11 46.69±0.17* 9.7±0.22*注：*.與空白對(duì)照組相比，差異有顯著性（P<0.05）。3.2.3 RAW264.7 細(xì)胞形態(tài)的變化

18注：A.空白對(duì)照組；B.低劑量組（MMO：10 μg/mL）；C.中劑量組（MMO：50 μg/mL）；D.高劑量組（MMO：250 μg/mL）；E.LPS 組（LPS：1 μg/mL）；圓圈標(biāo)注：雙核仁；箭頭標(biāo)注：偽足。圖 3-3 RAW264.7 細(xì)胞形態(tài)(×200，×1000)Fig 3-3 The morphology of RAW264.7 cells (×200，×1000)各組 RAW264.7 細(xì)胞 HE 染色后所得的細(xì)胞內(nèi)部形態(tài)如圖 3-3 中 A2-E2 所示，空白

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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