背景:小檗堿是一種喹啉類生物堿,研究報(bào)道其可通過(guò)核受體調(diào)控轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)。他汀類藥物與小檗堿聯(lián)合運(yùn)用可增強(qiáng)降脂作用,減少他汀類藥物的用量,降低他汀類不良反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)。有研究表明,他汀類主要通過(guò)OATPs轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入肝臟從而發(fā)揮降血脂作用,且OATPs的表達(dá)受核受體調(diào)控。那么小檗堿是否可通過(guò)介導(dǎo)核受體來(lái)調(diào)控OATPs的表達(dá),從而影響他汀類藥物的攝取,有待進(jìn)一步研究。目的:本研究旨在探討小檗堿與他汀類藥物聯(lián)合用藥時(shí)發(fā)生的藥物相互作用機(jī)制,為深入探究臨床小檗堿合理用藥與聯(lián)合用藥提供理論基礎(chǔ)與科學(xué)依據(jù)。方法:1.通過(guò)RT-qPCR、Western blot等實(shí)驗(yàn)技術(shù),探究小檗堿對(duì)HepG2細(xì)胞中OATP1B1和OATP1B3的mRNA和蛋白表達(dá)及對(duì)FXR和LXRα在細(xì)胞中的表達(dá)和分布的影響。2.通過(guò)HPLC-MS/MS實(shí)驗(yàn)技術(shù),探究小檗堿對(duì)HepG2細(xì)胞攝取瑞舒伐他汀的影響。3.通過(guò)雙熒光素酶報(bào)告基因法,探究在過(guò)表達(dá)FXR或LXRα的HepG2細(xì)胞中小檗堿對(duì)FXR/LXRα-OATP1B1調(diào)控通路的影響機(jī)制。4.通過(guò)小干擾RNA技術(shù),探究在沉默F(xiàn)XR或LXRα的HepG2細(xì)胞中小檗堿對(duì)OATP1B1蛋... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 小檗堿對(duì)HepG2 細(xì)胞中OATP1B1和OATP1B3 表達(dá)的影響
    2.1 材料
        2.1.1 細(xì)胞株和質(zhì)粒
        2.1.2 主要藥品
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器設(shè)備
    2.2 方法
        2.2.1 主要工作液的配置
        2.2.2 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)及其生長(zhǎng)曲線的繪制
        2.2.3 小檗堿對(duì)HepG2細(xì)胞的毒性實(shí)驗(yàn)
        2.2.4 細(xì)胞樣品蛋白的含量測(cè)定
        2.2.5 小檗堿對(duì)HepG2 細(xì)胞中OATP1B1和OATP1B3 表達(dá)的影響
        2.2.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 HepG2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)及生長(zhǎng)曲線
        2.3.2 HepG2細(xì)胞的毒性實(shí)驗(yàn)
        2.3.3 細(xì)胞樣品蛋白的含量測(cè)定結(jié)果
        2.3.4 RNA純度和完整性鑒定結(jié)果
        2.3.5 擴(kuò)增產(chǎn)物特異性
        2.3.6 小檗堿干預(yù)對(duì)HepG2 細(xì)胞中OATP1B1和OATP1B3 mRNA表達(dá)的影響
        2.3.7 小檗堿干預(yù)對(duì)HepG2 細(xì)胞中OATP1B1和OATP1B3 蛋白表達(dá)的影響
    2.4 討論
第3章 小檗堿對(duì)HepG2 細(xì)胞攝取RSV的影響
    3.1 材料
        3.1.1 細(xì)胞株
        3.1.2 主要藥品
        3.1.3 主要試劑
        3.1.4 主要儀器和設(shè)備
    3.2 方法
        3.2.1 主要工作液的配制
        3.2.2 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)
        3.2.3 細(xì)胞樣品中RSV的方法學(xué)評(píng)價(jià)及細(xì)胞樣品中濃度測(cè)定
        3.2.4 RSV在 HepG2 細(xì)胞中攝取條件的探索
        3.2.5 小檗堿對(duì)HepG2 細(xì)胞攝取RSV的影響研究
        3.2.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 細(xì)胞樣品中RSV濃度測(cè)定的方法學(xué)評(píng)價(jià)結(jié)果
        3.3.2 RSV在 HepG2 細(xì)胞中攝取條件的探索結(jié)果
        3.3.3 小檗堿對(duì)HepG2 細(xì)胞攝取RSV的影響
    3.4 討論
第4章 LXRα和 FXR的激活對(duì)小檗堿上調(diào)OATP1B1 的影響
    4.1 材料
        4.1.1 細(xì)胞株和質(zhì)粒
        4.1.2 主要藥品
        4.1.3 主要試劑
        4.1.4 主要儀器設(shè)備
    4.2 方法
        4.2.1 主要工作液的配置
        4.2.2 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)
        4.2.3 質(zhì)粒的構(gòu)建及提取
        4.2.4 瞬時(shí)共轉(zhuǎn)染
        4.2.5 雙熒光素酶報(bào)告基因活性的檢測(cè)
        4.2.6 核受體對(duì)OATP1B1 的表達(dá)影響
        4.2.7 基于核受體通路探究小檗堿對(duì)OATP1B1 表達(dá)的影響
        4.2.8 沉默hFXR或 hLXRα對(duì)小檗堿調(diào)控OATP1B1 表達(dá)的影響
        4.2.9 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 核受體激動(dòng)劑對(duì)HepG2 細(xì)胞中OATP1B1 表達(dá)的影響
        4.3.2 基于hFXR/LXRα-OATP1B1 雙熒光素酶報(bào)告基因模型的鑒定
        4.3.3 小檗堿對(duì)瞬時(shí)共轉(zhuǎn)染hFXR/hLXRα的 HepG2 細(xì)胞中OATP1B1 報(bào)告基因的影響
        4.3.4 沉默F(xiàn)XR或 LXRα對(duì)小檗堿調(diào)控OATP1B1 表達(dá)的影響
    4.4 討論
第5章 小檗堿對(duì)HepG2 細(xì)胞中FXR和 LXRα表達(dá)的影響
    5.1 材料
        5.1.1 細(xì)胞株和質(zhì)粒
        5.1.2 主要藥品
        5.1.3 主要試劑
        5.1.4 主要儀器設(shè)備
    5.2 方法
        5.2.1 主要工作液的配置
        5.2.2 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)
        5.2.3 核膜蛋白的提取
        5.2.4 小檗堿對(duì)FXR和 LXRα的激活效應(yīng)
        5.2.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 小檗堿對(duì)FXR和 LXRαmRNA和總蛋白表達(dá)的影響
        5.3.2 小檗堿誘導(dǎo)FXR和 LXRα核易位
    5.4 討論
第6章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR-1-3p/206/613對(duì)LXRα和OATP1B1蛋白表達(dá)的影響及其機(jī)制研究[J]. 葉容芳,劉名義,許玉,張艷麗,朱丹丹,丁薇,熊玉卿.  中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué). 2018(08)
[2]黃連素對(duì)HepG2細(xì)胞CYP3A4和P-gp的影響和作用機(jī)制研究[J]. 唐霞,辛華雯,李維亮,歐陽(yáng)萌.  中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué). 2015(01)
[3]藥物代謝性別差異及與核受體的關(guān)系[J]. 張松波,周宏灝.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2007(03)
[4]孕烷受體的研究進(jìn)展[J]. 余幫寧,周宏灝.  中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2005(01)



本文編號(hào)：3217833