背景:小檗堿是一種喹啉類生物堿,研究報道其可通過核受體調(diào)控轉(zhuǎn)運體的表達(dá)。他汀類藥物與小檗堿聯(lián)合運用可增強降脂作用,減少他汀類藥物的用量,降低他汀類不良反應(yīng)的風(fēng)險。有研究表明,他汀類主要通過OATPs轉(zhuǎn)運進(jìn)入肝臟從而發(fā)揮降血脂作用,且OATPs的表達(dá)受核受體調(diào)控。那么小檗堿是否可通過介導(dǎo)核受體來調(diào)控OATPs的表達(dá),從而影響他汀類藥物的攝取,有待進(jìn)一步研究。目的:本研究旨在探討小檗堿與他汀類藥物聯(lián)合用藥時發(fā)生的藥物相互作用機制,為深入探究臨床小檗堿合理用藥與聯(lián)合用藥提供理論基礎(chǔ)與科學(xué)依據(jù)。方法:1.通過RT-qPCR、Western blot等實驗技術(shù),探究小檗堿對HepG2細(xì)胞中OATP1B1和OATP1B3的mRNA和蛋白表達(dá)及對FXR和LXRα在細(xì)胞中的表達(dá)和分布的影響。2.通過HPLC-MS/MS實驗技術(shù),探究小檗堿對HepG2細(xì)胞攝取瑞舒伐他汀的影響。3.通過雙熒光素酶報告基因法,探究在過表達(dá)FXR或LXRα的HepG2細(xì)胞中小檗堿對FXR/LXRα-OATP1B1調(diào)控通路的影響機制。4.通過小干擾RNA技術(shù),探究在沉默F(xiàn)XR或LXRα的HepG2細(xì)胞中小檗堿對OATP1B1蛋... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 小檗堿對HepG2 細(xì)胞中OATP1B1和OATP1B3 表達(dá)的影響
    2.1 材料
        2.1.1 細(xì)胞株和質(zhì)粒
        2.1.2 主要藥品
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器設(shè)備
    2.2 方法
        2.2.1 主要工作液的配置
        2.2.2 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)及其生長曲線的繪制
        2.2.3 小檗堿對HepG2細(xì)胞的毒性實驗
        2.2.4 細(xì)胞樣品蛋白的含量測定
        2.2.5 小檗堿對HepG2 細(xì)胞中OATP1B1和OATP1B3 表達(dá)的影響
        2.2.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 HepG2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)及生長曲線
        2.3.2 HepG2細(xì)胞的毒性實驗
        2.3.3 細(xì)胞樣品蛋白的含量測定結(jié)果
        2.3.4 RNA純度和完整性鑒定結(jié)果
        2.3.5 擴增產(chǎn)物特異性
        2.3.6 小檗堿干預(yù)對HepG2 細(xì)胞中OATP1B1和OATP1B3 mRNA表達(dá)的影響
        2.3.7 小檗堿干預(yù)對HepG2 細(xì)胞中OATP1B1和OATP1B3 蛋白表達(dá)的影響
    2.4 討論
第3章 小檗堿對HepG2 細(xì)胞攝取RSV的影響
    3.1 材料
        3.1.1 細(xì)胞株
        3.1.2 主要藥品
        3.1.3 主要試劑
        3.1.4 主要儀器和設(shè)備
    3.2 方法
        3.2.1 主要工作液的配制
        3.2.2 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)
        3.2.3 細(xì)胞樣品中RSV的方法學(xué)評價及細(xì)胞樣品中濃度測定
        3.2.4 RSV在 HepG2 細(xì)胞中攝取條件的探索
        3.2.5 小檗堿對HepG2 細(xì)胞攝取RSV的影響研究
        3.2.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 細(xì)胞樣品中RSV濃度測定的方法學(xué)評價結(jié)果
        3.3.2 RSV在 HepG2 細(xì)胞中攝取條件的探索結(jié)果
        3.3.3 小檗堿對HepG2 細(xì)胞攝取RSV的影響
    3.4 討論
第4章 LXRα和 FXR的激活對小檗堿上調(diào)OATP1B1 的影響
    4.1 材料
        4.1.1 細(xì)胞株和質(zhì)粒
        4.1.2 主要藥品
        4.1.3 主要試劑
        4.1.4 主要儀器設(shè)備
    4.2 方法
        4.2.1 主要工作液的配置
        4.2.2 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)
        4.2.3 質(zhì)粒的構(gòu)建及提取
        4.2.4 瞬時共轉(zhuǎn)染
        4.2.5 雙熒光素酶報告基因活性的檢測
        4.2.6 核受體對OATP1B1 的表達(dá)影響
        4.2.7 基于核受體通路探究小檗堿對OATP1B1 表達(dá)的影響
        4.2.8 沉默hFXR或 hLXRα對小檗堿調(diào)控OATP1B1 表達(dá)的影響
        4.2.9 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 核受體激動劑對HepG2 細(xì)胞中OATP1B1 表達(dá)的影響
        4.3.2 基于hFXR/LXRα-OATP1B1 雙熒光素酶報告基因模型的鑒定
        4.3.3 小檗堿對瞬時共轉(zhuǎn)染hFXR/hLXRα的 HepG2 細(xì)胞中OATP1B1 報告基因的影響
        4.3.4 沉默F(xiàn)XR或 LXRα對小檗堿調(diào)控OATP1B1 表達(dá)的影響
    4.4 討論
第5章 小檗堿對HepG2 細(xì)胞中FXR和 LXRα表達(dá)的影響
    5.1 材料
        5.1.1 細(xì)胞株和質(zhì)粒
        5.1.2 主要藥品
        5.1.3 主要試劑
        5.1.4 主要儀器設(shè)備
    5.2 方法
        5.2.1 主要工作液的配置
        5.2.2 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)
        5.2.3 核膜蛋白的提取
        5.2.4 小檗堿對FXR和 LXRα的激活效應(yīng)
        5.2.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 小檗堿對FXR和 LXRαmRNA和總蛋白表達(dá)的影響
        5.3.2 小檗堿誘導(dǎo)FXR和 LXRα核易位
    5.4 討論
第6章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR-1-3p/206/613對LXRα和OATP1B1蛋白表達(dá)的影響及其機制研究[J]. 葉容芳,劉名義,許玉,張艷麗,朱丹丹,丁薇,熊玉卿.  中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué). 2018(08)
[2]黃連素對HepG2細(xì)胞CYP3A4和P-gp的影響和作用機制研究[J]. 唐霞,辛華雯,李維亮,歐陽萌.  中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué). 2015(01)
[3]藥物代謝性別差異及與核受體的關(guān)系[J]. 張松波,周宏灝.  中國藥理學(xué)通報. 2007(03)
[4]孕烷受體的研究進(jìn)展[J]. 余幫寧,周宏灝.  中國臨床藥理學(xué)雜志. 2005(01)



本文編號：3217833