基于DNA條形碼和HRM技術鑒別肉蓯蓉疑似偽品
發(fā)布時間:2021-05-24 12:38
目的:基于DNA條形碼技術及高分辨率熔解曲線(HRM)方法鑒定肉蓯蓉藥材的基原。方法:通過聚合酶鏈式反應(PCR)對肉蓯蓉樣品的ITS2序列進行擴增;將待鑒定肉蓯蓉樣品的ITS2序列與Genbank數(shù)據(jù)庫進行BLAST比對;利用MEGA 6.06軟件通過建樹法進行NJ樹聚類分析;通過HRM方法快速鑒定肉蓯蓉藥材基原。結果:21份待鑒定肉蓯蓉樣品ITS2序列的BLAST比對結果中,11份樣品與沙蓯蓉高度一致,其余10份樣品與《中華人民共和國藥典》2015年版一部收載品種肉蓯蓉(Cistanche deserticola)或管花肉蓯蓉(Cistanchetubulosa)高度一致;通過ITS2序列的NJ聚類分析,將21份待鑒定肉蓯蓉樣品分別聚類到沙蓯蓉、管花肉蓯蓉、鹽生肉蓯蓉、肉蓯蓉4個種;通過HRM方法鑒定肉蓯蓉藥材樣品,鑒定結果與NJ聚類分析結果一致。結論:通過DNA條形碼和HRM技術均能有效鑒定不同種的肉蓯蓉藥材樣品,且結果一致,起到互相驗證的作用,為肉蓯蓉及其他中藥民族藥品種的快速鑒定提供了參考依據(jù)。
【文章來源】:藥物分析雜志. 2020,40(06)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 植物總DNA的提取
1.3 聚合酶鏈式反應及測序
1.4 數(shù)據(jù)處理
1.5 HRM實驗[22]
2 結果
2.1 聚合酶鏈式反應結果
2.2 Genbank比對
2.2 NJ樹聚類分析
2.3 HRM結果
3 討論與分析
【參考文獻】:
期刊論文
[1]基于DNA條形碼和高分辨率熔解曲線技術快速鑒別肉蓯蓉[J]. 過立農(nóng),劉杰,趙春艷,昝珂,鄭健,馬雙成,陳艷菲,李昀錚. 藥物分析雜志. 2018(04)
[2]中藥材DNA條形碼技術研究進展[J]. 郭慧,王謙博,賈力維,丁常宏,郭盛磊,王振月. 中國藥師. 2016(03)
[3]Bar-HRM技術在人參和西洋參藥材鑒定中的應用研究[J]. 王志科,魯放,熊超,孫偉,薛建平. 世界科學技術-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2016(02)
[4]基于DNA條形碼和HRM技術對金銀花及山銀花藥材的快速鑒別[J]. 胡凱,王微,游玉明. 時珍國醫(yī)國藥. 2015(12)
[5]高分辨率熔解曲線技術及其在中藥DNA分子鑒定中的應用[J]. 陳康,蔣超,袁媛,黃璐琦. 藥學學報. 2015(12)
[6]基于熔解曲線分析技術的木通類藥材的分子鑒別[J]. 胡峻,詹志來,袁媛,黃璐琦,劉勇. 中國中藥雜志. 2015(12)
[7]基于熔解曲線分析技術的鹿茸藥材分子鑒別[J]. 陳康,蔣超,袁媛,黃璐琦,金艷. 中國中藥雜志. 2015(04)
[8]基于ITS序列位點特異性PCR的肉蓯蓉與其混偽品的鑒別研究[J]. 李振華,龍平,鄒德志,李越,崔占虎,李旻輝. 中國中藥雜志. 2014(19)
[9]酶切-熔解曲線分析:一種新的SNP分型方法及其在中藥材鑒定中的應用[J]. 蔣超,黃璐琦,袁媛,陳敏,侯靜怡,吳志剛,林淑芳. 藥學學報. 2014(04)
[10]用高分辨率熔解曲線做PCR條件優(yōu)化[J]. 王英紅,孔慶鑫,沈林海,倪曉平. 中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2012(11)
本文編號:3204209
【文章來源】:藥物分析雜志. 2020,40(06)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 植物總DNA的提取
1.3 聚合酶鏈式反應及測序
1.4 數(shù)據(jù)處理
1.5 HRM實驗[22]
2 結果
2.1 聚合酶鏈式反應結果
2.2 Genbank比對
2.2 NJ樹聚類分析
2.3 HRM結果
3 討論與分析
【參考文獻】:
期刊論文
[1]基于DNA條形碼和高分辨率熔解曲線技術快速鑒別肉蓯蓉[J]. 過立農(nóng),劉杰,趙春艷,昝珂,鄭健,馬雙成,陳艷菲,李昀錚. 藥物分析雜志. 2018(04)
[2]中藥材DNA條形碼技術研究進展[J]. 郭慧,王謙博,賈力維,丁常宏,郭盛磊,王振月. 中國藥師. 2016(03)
[3]Bar-HRM技術在人參和西洋參藥材鑒定中的應用研究[J]. 王志科,魯放,熊超,孫偉,薛建平. 世界科學技術-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2016(02)
[4]基于DNA條形碼和HRM技術對金銀花及山銀花藥材的快速鑒別[J]. 胡凱,王微,游玉明. 時珍國醫(yī)國藥. 2015(12)
[5]高分辨率熔解曲線技術及其在中藥DNA分子鑒定中的應用[J]. 陳康,蔣超,袁媛,黃璐琦. 藥學學報. 2015(12)
[6]基于熔解曲線分析技術的木通類藥材的分子鑒別[J]. 胡峻,詹志來,袁媛,黃璐琦,劉勇. 中國中藥雜志. 2015(12)
[7]基于熔解曲線分析技術的鹿茸藥材分子鑒別[J]. 陳康,蔣超,袁媛,黃璐琦,金艷. 中國中藥雜志. 2015(04)
[8]基于ITS序列位點特異性PCR的肉蓯蓉與其混偽品的鑒別研究[J]. 李振華,龍平,鄒德志,李越,崔占虎,李旻輝. 中國中藥雜志. 2014(19)
[9]酶切-熔解曲線分析:一種新的SNP分型方法及其在中藥材鑒定中的應用[J]. 蔣超,黃璐琦,袁媛,陳敏,侯靜怡,吳志剛,林淑芳. 藥學學報. 2014(04)
[10]用高分辨率熔解曲線做PCR條件優(yōu)化[J]. 王英紅,孔慶鑫,沈林海,倪曉平. 中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2012(11)
本文編號:3204209
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