TLR4/NF-κB p65信號(hào)通路介導(dǎo)雷公藤甲素內(nèi)皮保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2021-05-14 23:58
目的:通過細(xì)菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,10mg/kg,ip)復(fù)制內(nèi)毒血癥大鼠模型,探討雷公藤甲素(triptolide,TP)對(duì)其心血管功能的作用,同時(shí)結(jié)合LPS共培養(yǎng)(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)細(xì)胞,觀察TP對(duì)LPS刺激HUVEC細(xì)胞炎性損傷的影響,旨在探討TP防治內(nèi)毒血癥的新靶點(diǎn)及依據(jù)。方法:1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)取雄性SD大鼠60只,腹腔注射10mg/kg的LPS(L82749,Lipopolysaccharide,026:B6)來復(fù)制內(nèi)毒血癥大鼠模型。TP干預(yù)組在大鼠腹腔注射LPS前15 min進(jìn)行預(yù)處理。將大鼠分為正常組(NC組)、內(nèi)毒血癥模型組(LPS組)、TP低濃度干預(yù)組(LPS+TP-L組,25μg/kg)、TP中濃度干預(yù)組(LPS+TP-M組,50μg/kg)、TP高濃度干預(yù)組(LPS+TP-H組,100μg/kg)和多粘菌素B組(LPS+PMX-B組,0.2mg/kg)。各組大鼠行頸總動(dòng)脈插管,分別測(cè)量平均動(dòng)脈壓(mean arterial blood pressure,MABP)和...
【文章來源】:皖南醫(yī)學(xué)院安徽省
【文章頁數(shù)】:79 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中英文縮略詞對(duì)照表
摘要
Abstract
前言
第一部分 雷公藤甲素對(duì)內(nèi)毒血癥大鼠心血管功能作用的研究
研究材料與方法
1.實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2 主要試劑和藥品
1.3 主要儀器
2.實(shí)驗(yàn)方法
2.1 藥物及主要溶液的配制
2.2 模型建立及分組
2.3 實(shí)驗(yàn)指標(biāo)檢測(cè)
2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
1.各組大鼠MABP和血流動(dòng)力學(xué)變化
2.生化指標(biāo)檢測(cè)
2.1 各組大鼠血清中BNP、CK-MB和 cTn-Ⅰ的含量
2.2 各組大鼠血漿中TNF-α和 IL-6 的含量
3.各組大鼠心血管組織中相關(guān)蛋白的表達(dá)情況
3.1 各組大鼠心肌中p65 的表達(dá)
3.2 各組大鼠血管中iNOS、eNOS、TLR4和p65 的表達(dá)
4.血管環(huán)功能實(shí)驗(yàn)
4.1 TP對(duì) Phe誘導(dǎo)的胸主動(dòng)脈環(huán)(E+、E-)收縮反應(yīng)的改變
4.2 TP對(duì) ACh誘導(dǎo)的胸主動(dòng)脈環(huán)(E+)舒張反應(yīng)的影響
4.3 TP對(duì) Phe誘導(dǎo)的L-NAME和 MB預(yù)處理胸主動(dòng)脈環(huán)(E+)收縮率的影響
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
第二部分 雷公藤甲素對(duì)脂多糖誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞急性損傷的保護(hù)作用
研究材料和方法
1.實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
1.2 主要試劑和藥品
1.3 主要儀器
2.實(shí)驗(yàn)方法
2.1 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的體外培養(yǎng)
2.2 HUVEC 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
2.3 ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清中IL-6、TNF-α的含量
2.4 Western Blot法
2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 TLR4/NF-κB 通路在心血管疾病中的研究進(jìn)展
參考文獻(xiàn)
作者簡介及讀研期間主要科研成果
致謝
本文編號(hào):3186567
【文章來源】:皖南醫(yī)學(xué)院安徽省
【文章頁數(shù)】:79 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中英文縮略詞對(duì)照表
摘要
Abstract
前言
第一部分 雷公藤甲素對(duì)內(nèi)毒血癥大鼠心血管功能作用的研究
研究材料與方法
1.實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2 主要試劑和藥品
1.3 主要儀器
2.實(shí)驗(yàn)方法
2.1 藥物及主要溶液的配制
2.2 模型建立及分組
2.3 實(shí)驗(yàn)指標(biāo)檢測(cè)
2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
1.各組大鼠MABP和血流動(dòng)力學(xué)變化
2.生化指標(biāo)檢測(cè)
2.1 各組大鼠血清中BNP、CK-MB和 cTn-Ⅰ的含量
2.2 各組大鼠血漿中TNF-α和 IL-6 的含量
3.各組大鼠心血管組織中相關(guān)蛋白的表達(dá)情況
3.1 各組大鼠心肌中p65 的表達(dá)
3.2 各組大鼠血管中iNOS、eNOS、TLR4和p65 的表達(dá)
4.血管環(huán)功能實(shí)驗(yàn)
4.1 TP對(duì) Phe誘導(dǎo)的胸主動(dòng)脈環(huán)(E+、E-)收縮反應(yīng)的改變
4.2 TP對(duì) ACh誘導(dǎo)的胸主動(dòng)脈環(huán)(E+)舒張反應(yīng)的影響
4.3 TP對(duì) Phe誘導(dǎo)的L-NAME和 MB預(yù)處理胸主動(dòng)脈環(huán)(E+)收縮率的影響
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
第二部分 雷公藤甲素對(duì)脂多糖誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞急性損傷的保護(hù)作用
研究材料和方法
1.實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
1.2 主要試劑和藥品
1.3 主要儀器
2.實(shí)驗(yàn)方法
2.1 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的體外培養(yǎng)
2.2 HUVEC 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
2.3 ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清中IL-6、TNF-α的含量
2.4 Western Blot法
2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 TLR4/NF-κB 通路在心血管疾病中的研究進(jìn)展
參考文獻(xiàn)
作者簡介及讀研期間主要科研成果
致謝
本文編號(hào):3186567
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